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由图 7 可知，右上端表示南五味子药材中峰面积较
80
大的化合物，包括 9 号峰（五味子酯甲）和 13 号峰（五味
60
40 子甲素）；左下端表示北五味子药材中峰面积较大的化
20
合物，分别为 2 号峰（五味子醇甲）和 16 号峰（五味子乙
0
t[2]
－20 素）。
－40
变量重要性投影（VIP）可衡量各共有特征峰的表达
－60
－80 模式对样本分类判别的影响强度和解释能力，从而辅助
－100 [24]
－400 －300 －200 －100 0 100 200 300 筛选质量差异标志物 。当VIP值＞1.0时，表明该变量
t[1] 对所建模型的贡献度高于平均水平 [25-26] ，因此本研究以
图5 PCA得分图
VIP值＞1.0为标准筛选质量差异标志物。结果，共得到
Fig 5 PCA scatter score diagram
4个VIP值大于1的共有特征峰，分别为13号峰（五味子
2.4 OPLS-DA 甲素，VIP 值为 2.29）、2 号峰（五味子醇甲，VIP 值为
以 19 个共有特征峰相对峰面积为多元变量，采用 2.24）、9 号峰（五味子酯甲，VIP 值为 1.73）和 16 号峰（五
[22]
SIMCA 14.1 软件进行有监督模式的 OPLS-DA 。结 味子乙素，VIP值为1.48）。这提示上述4个成分为影响
2
果，累积解释能力参数（R X）为 0.917，累积解释能力参 南、北五味子药材质量的差异标志性成分，详见图8。
2
数（R Y）为 0.985，预测能力参数（Q）为 0.952，均大于
2
0.5，表明该模型预测能力好，可用于区别南、北五味子药 2.5
材，详见图6。 2.0

80 VIP值 1.5
60 1.0
40
0.5
20
1.491 09*t0[1] －20 0 0 13 2 9 16 11 18 15 6 14 3 12 7 5 10 4 8 19 17 1

－40 峰号
图8 OPLS-DA模型中各共有特征峰的VIP值
－60
－80 Fig 8 VIP values of common charasteristic peaks in
－100 OPLS-DA model
－400 －300 －200 －100 0 100 200 300
1.000 01*t[1] 3 讨论
图6 OPLS-DA得分图
本研究试验前期采用二极管阵列检测器进行了
Fig 6 OPLS-DA scatter score diagram
190～800 nm全波长扫描。结果发现，在220 nm波长处
为了进一步检验样本分类是否有效或样本间是否
所得指纹图谱的色谱峰信息较为全面，可识别的化合物
有差异，提取OPLS-DA模型中的19个变量，采用SIMCA
种类也较丰富，故选择220 nm作为检测波长。随后，对
14.1软件对所建OPLS-DA模型进行200次的置换检验，
乙腈-0.1％甲酸水溶液、乙腈-0.1％磷酸水溶液、乙腈-水
得到 OPLS-DA/S-plot 图，详见图 7（该图中，S 型曲线上
等不同流动相体系的分离效果进行了比较。结果发现，
的每个点各代表 1 个化合物，差异性化合物分布在 S 型
以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱时，各色谱峰的峰形
曲线的上下端 ）。
[23]
佳且流动相配制简单，故选择乙腈-水为流动相。同时，
又考察了不同流速（0.8、1.0、1.2 mL/min）的分离效果。
0.8
0.66 结果发现，当流速为 0.8 mL/min 时，色谱峰峰形和分离
0.4 度均较好，故选择流速为0.8 mL/min。
0.2
0 本研究采用 HPLC 法分别建立了南、北五味子药材
p[2] －0.2
－0.4 的指纹图谱。结果显示，南、北五味子指纹图谱中分别
－0.6 有32、33个共有峰。选择指纹图谱中含量较高且分离度
－0.8
－1 较好的色谱峰作为共有特征峰，共标定出19个共有特征
－0.6 －0.4 －0.2 0 0.2 0.4
p[1] 峰；通过与混合对照品指认，共鉴别出其中的5个，分别
图7 OPLS-DA/S-plot图 为五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、
Fig 7 OPLS-DA/S-plot diagram 五味子乙素。

·2228 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 18 中国药房 2020年第31卷第18期