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2.1.6 精密度试验 取”2.1.2”项下混合对照品溶液适 热烫时间和烘干温度对滇龙胆药材中有效成分马钱苷
量，按“2.1.1”项下色谱条件连续进样 6 次，记录峰面积。 酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷的含量影响较大，因此以这 3
结果，马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷峰面积的RSD分 个因素进行加工工艺的单因素考察。为了使试验结果
别为0.46％、0.41％、0.36％（n＝6），表明仪器精密度良好。 较全面地反映滇龙胆的质量，本研究利用Hassan法 对
[18]
2.1.7 稳定性试验 取“2.1.3”项下供试品溶液适量，在 实际测得的马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷含量进行
室温下放置0、2、4、6、8、10、12 h后按“2.1.1”项下色谱条 归一化，然后以三者的OD值作为评价指标进行试验：先
件进样分析，记录峰面积。结果，马钱苷酸、獐牙菜苦 将各成分含量的数值标准化为 0～1 之间的归一值（d），
苷、龙胆苦苷峰面积的 RSD 分别为 1.48％、2.60％、 公式为di＝（yi－ymax ）/（ymax－ymin ），其中di表示归一化后某
1.56％（n＝7），表明供试品溶液在室温下放置 12 h 内稳 成分的含量，yi表示归一化前某成分的含量，ymin表示归
定性良好。 一化前某成分的最小含量，ymax表示归一化前某成分的
2.1.8 重复性试验 称取滇龙胆阴干样品 6 份，按 最大含量；再根据各成分的d值求算几何平均值，即得这
“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，然后按“2.1.1”项下色 3种成分的OD值，OD值越高，表明滇龙胆药材质量越好。
谱条件进样分析，根据标准曲线法计算 3 种成分的含 2.2.1 热烫时间的考察 取新鲜滇龙胆药材，共5份，洗
量。结果，马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷含量的RSD 净，置于60 ℃水浴锅中，分别热烫处理1、2、3、4、5 min，
分别为 1.55％、1.55％、0.97％（n＝6），表明该方法的重 再置于 40 ℃烘箱中烘干至水分符合 2015 年版《中国药
复性良好。 典》（一部）中龙胆药材的含水量规定（不得小于 9.0％，
2.1.9 加样回收率试验 取已知马钱苷酸、獐牙菜苦 下同） 。取不同热烫时间处理并烘干后的滇龙胆样品，
[7]
苷、龙胆苦苷含量的滇龙胆阴干样品0.1 g，平行6份，加 打粉，过三号筛，取适量粉末，按”2.1.3”项下方法制备供
入马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷质量浓度分别为 试品溶液，再按“2.1.1”项下色谱条件进样分析，根据标
0.26、0.102、2.6 mg/mL 的混合对照品溶液（按”2.1.2”项 准曲线法计算马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷含量，再
下方法制备）2 mL，用甲醇溶解并定容后，按”2.1.3”项下 计算OD值。结果，随着热烫时间的增加，滇龙胆中3种
方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项下色谱条件进样分 有效成分的 OD 值呈先升高后降低的趋势；当热烫处理
析，记录峰面积并计算加样回收率。结果，马钱苷酸、獐 4 min时，OD值最大，详见表3。
牙菜苦苷、龙胆苦苷的平均加样回收率分别为96.09％、 表3 热烫时间考察结果
102.74％、102.05％，RSD 分别为 1.91％、1.23％、1.53％ Tab 3 Results of blanching time test
（n＝6），表明该方法的准确度良好，详见表2。 热烫时间，min 马钱苷酸，％ 獐牙菜苦苷，％ 龙胆苦苷，％ OD值
表2 加样回收试验结果（n＝6） 1 0.605 2 0.195 2 6.052 4 0.156 0
2 0.616 4 0.198 7 6.163 8 0.334 5
Tab 2 Results of recovery tests（n＝6） 3 0.622 5 0.205 2 6.225 4 0.547 0
取样量， 样品中含 加入量， 测得量， 加样回收 平均加样回 RSD， 4 0.638 9 0.205 0 6.388 9 0.748 4
成分
g 量，mg mg mg 率，％ 收率，％ ％ 5 0.629 8 0.200 7 6.297 9 0.556 7
马钱苷酸 0.102 4 0.522 6 0.520 0 1.016 7 95.03 96.09 1.91 2.2.2 热烫温度的考察 取新鲜滇龙胆药材，共5份，洗
0.102 2 0.521 6 0.520 0 1.015 6 95.01
0.103 2 0.526 7 0.520 0 1.025 0 95.88 净，分别置于 40、50、60、70、80 ℃水浴锅中，热烫处理 4
0.103 2 0.526 7 0.520 0 1.045 3 99.74 min，再置于40 ℃烘箱中烘干至水分符合要求。取不同
0.105 0 0.535 8 0.520 0 1.033 6 95.86 热烫温度处理并烘干后的滇龙胆样品，打粉，过三号筛，
0.103 2 0.526 7 0.520 0 1.020 6 95.05
獐牙菜苦苷 0.102 4 0.325 8 0.326 4 0.664 4 103.75 102.74 1.23 取适量粉末，按”2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再按
0.102 2 0.325 2 0.326 4 0.664 5 103.97 “2.1.1”项下色谱条件进样分析，根据标准曲线法计算马
0.103 2 0.328 3 0.326 4 0.659 6 101.49
0.103 2 0.328 3 0.326 4 0.660 1 101.64 钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷含量，再计算 OD 值。结
0.105 0 0.334 1 0.326 4 0.666 0 101.64 果，随着热烫温度的升高，滇龙胆中3种成分的OD值呈
0.103 2 0.328 3 0.326 4 0.667 7 103.95 先升高后降低的趋势；当热烫温度为 60 ℃时，OD 值最
龙胆苦苷 0.102 4 5.234 5 5.200 0 10.662 7 104.36 102.05 1.53
0.102 2 5.224 2 5.200 0 10.610 7 103.57 大，详见表4。
0.103 2 5.275 4 5.200 0 10.554 7 101.50 2.2.3 烘干温度的考察 取新鲜滇龙胆药材，共5份，洗
0.103 2 5.275 4 5.200 0 10.511 6 100.69
0.105 0 5.367 4 5.200 0 10.596 6 100.54 净，置于60 ℃水浴锅中，热烫处理4 min，然后分别置于
0.103 2 5.275 4 5.200 0 10.561 7 101.64 30、40、50、60 ℃烘箱中烘干至水分符合要求。取热烫处
2.2 单因素试验 理并在不同温度下烘干后的滇龙胆样品，打粉，过三号
通过本课题组前期调研及预试验发现，热烫温度、 筛，取适量粉末，按”2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再

·1832 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 15 中国药房 2020年第31卷第15期