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tyrosine metabolism pathway，glycine，serine and threonine metabolism pathway. CONCLUSIONS：The mechanism of bambuterol
hydrochloride improving COPD may be associated with the decrease of the levels of TNF-α and IL-6，as well as the pathway of
amino acid metabolism，energy metabolism and lipid metabolism.
KEYWORDS Bambuterol hydrochloride；Chronic obstructive pulmonary disease；Mechanism；Biomarkers；Metabolomics；LC-
MS；Rat

慢性阻塞性肺疾病（Chronic obstructive pulmonary 号：C18100104）；水合氯醛（天津市大茂化学试剂厂，批
disease，COPD）是一种常见的以持续气流受限为特征的 号：20171215）；大鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）酶联免疫吸
慢性炎症性疾病 [1-4] 。COPD 是呼吸系统的常见病和多 附（ELISA）试剂盒（批号：569180906）、大鼠白细胞介素
发病，多发于老年人，目前全球40岁以上成年人中至少 6（IL-6）ELISA 试剂盒（批号：385180906）均购自天津安
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有10％患有COPD，已成为世界上第四大死因 。COPD 若瑞康生物技术有限公司；无水乙醚（广州化学试剂厂，
患病率高、病程长，发作期与缓解期呈交替进行，最终导 批号：20180901）；甲醇、甲酸和乙腈为色谱纯，水为蒸
致呼吸残疾，严重影响患者的劳动能力和生活质量，增 馏水。
加沉重的社会经济负担，已成为一个重要的公共卫生问 1.3 动物
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题 。 SPF 级 SD 大鼠 30 只，雄性，体质量 180～220 g，购
盐酸班布特罗是肾上腺素β 2受体激动剂的前体药 自南方医科大学实验动物中心，动物使用许可证号：
物，能够对支气管平滑肌产生松弛作用，能够很好地改 SYXK（粤）2017-0125。大鼠于温度（23±2）℃、湿度
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善 COPD ，但其治疗 COPD 的机制尚不明确。近年来， （50±5）％、12 h光照/12 h黑暗交替的环境下进行饲养。
代谢组学的研究不断发展，不仅成为后基因组学时代最 2 方法
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重要的组学技术之一，亦成为最重要的系统生物学科 。 2.1 溶液的制备
为了进一步了解盐酸班布特罗治疗COPD的作用机制， 2.1.1 盐酸班布特罗灌胃溶液的制备 将盐酸班布特
本课题组通过烟熏联合脂多糖滴注法构建 COPD 大鼠 罗片研磨成细粉，精密称取适量细粉于锥形瓶中，加水
模型，然后给予盐酸班布特罗进行干预，利用液质联用 超声（功率：350 W，频率：35 kHz）10 min，制成质量浓度
（LC-MS）技术分析盐酸班布特罗对 COPD 作用的潜在 为 0.33 mg/mL 的盐酸班布特罗灌胃溶液（以主药计），
生物标志物，从代谢网络层面阐明盐酸班布特罗治疗 备用。
COPD 的作用机制，以期进一步了解 COPD 的病理生理 2.1.2 脂多糖溶液的制备 精密称取适量脂多糖于 10
过程，并为早期诊断、病情监测及盐酸班布特罗的疗效 mL 离心管中，加生理盐水涡旋溶解，制成质量浓度为 1
评价提供依据。 mg/mL的脂多糖溶液，备用。
1 材料 2.1.3 水合氯醛溶液的制备 精密称取适量水合氯醛
1.1 仪器 于50 mL离心管中，加水涡旋溶解制成10％水合氯醛溶
400 L 烟熏箱（课题组自制）；SKJ.MHP 型麻醉咽喉 液，备用。
镜（泰兴市斯美特医疗器械有限公司）；Nexera X2 型高 2.2 分组、造模与给药
效液相色谱仪（日本岛津公司）；Triple TOF 5600+型质 将30只SD大鼠适应性饲养3 d后，将大鼠随机分为
谱（MS）仪（美国 Sciex 公司）；Multiskan FC 型酶标仪、 正常组、模型组和盐酸班布特罗组（3.3 mg/kg，以主药
HERA 型 CO2细胞培养箱[赛默飞世尔科技（中国）有限 计，根据人临床有效剂量换算而得），每组 10 只。模型
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公司]；CX41 型光学显微镜（日本奥林巴斯有限公司）； 组、盐酸班布特罗组采用烟熏联合脂多糖滴注法 复制
Buxco PFT 型实验动物肺功能检测系统（美国 DSI 公 COPD 大鼠模型：将大鼠每天定时在烟薰箱内用香烟烟
司）；ALLEGRA X-30R 型离心机（美国 Beckman Coulter 熏，每天3次，每次30 min，烟熏间隔1 h；同时，分别于烟
公司）；1-16K 型高速低温离心机（德国 Sigma 公司）； 熏第1、14天时用10％水合氯醛（0.95 mL/300 g）麻醉，仰
XW-80A型涡旋混合器（上海精科实业有限公司）。 卧位固定大鼠，暴露声门，将喉镜轻轻插入喉口，再将
1.2 药品与试剂 静脉套管针快速插入气管，拔出针芯，用注射器滴注 1
盐 酸 班 布 特 罗 片（齐 鲁 制 药 有 限 公 司 ，批 号 ： mg/mL 脂多糖溶液 0.2 mL，然后将大鼠固定板直立旋
7K0091D28、8C0011D28，规格：10 mg）；椰树牌香烟（广 转，使药物均匀散布于大鼠两肺。正常组大鼠正常饲
东中烟工业有限责任公司）；脂多糖（美国Sigma公司，批 养，不烟熏，滴注时以等体积生理盐水代替。以肺功能
号：057M4013V）；生理盐水（江西科伦药业有限公司，批 检测及肺泡灌洗液生化指标等作为 COPD 造模成功的

中国药房 2020年第31卷第5期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 5 ·565 ·