Page 104 - 2019年8月第30卷第16期

genotypes in 2 groups were in accordance with Hardy-Weinberg equilibrium（P＞0.05），while there was significant difference in
genotype and allele frequencies between 2 groups （P＜0.05）. Compared with TT genotype，the risk of NSCLC in individuals
carrying TC and CC genotypes raised by 1.179，3.122 folds [OR TC＝2.179，95％CI（1.435，3.309），P＜0.05；ORCC＝4.122，95％CI
（2.401，7.075），P＜0.05]. Compared with individuals carrying TT genotype，the risk of NSCLC occurrence in non-smokers carrying
TC and CC genotypes increased by 0.371，1.328 fold [OR TC＝1.371，95％CI（0.927，3.428），P＜0.05；ORCC＝2.328，95％CI（1.249，
4.622），P＜0.05]；and the risk of NSCLC occurrence in smokers carrying TC and CC genotypes increased by 0.928，2.182 folds
[OR TC＝1.928，95％CI（1.257，2.957），P＜0.05；ORCC＝3.182，95％CI（1.760，5.754），P＜0.05]. CONCLUSIONS：The rs1136410
locus mutant genotype of ADPRT gene is the risk factor of NSCLC in Han nationality from Northern Jiangsu，and smoking raises
this risk of NSCLC occurrence in individuals with mutation genotypes of ADPRT rs1136410.
KEYWORDS ADPRT gene；rs1136410；Single nucleotide polymorphism；Non-small cell lung cancer；Correlation；Smoking；
Han nationality；Northern Jiangsu

肺癌是近年来发病率和病死率最高的恶性肿瘤 [1-3] 。 例，非吸烟者107例；腺癌176例，鳞癌99例，类型不明确
其 中 ，非 小 细 胞 肺 癌（Non-small cell lung cancer， 的8例；TNM分期Ⅰ～Ⅱ期80例，Ⅲ～Ⅳ期203例。
NSCLC）约占 85％，且其确诊时大多患者已处于晚期， 1.1.2 对照组 选取同期于该院进行体检的健康者210
错失手术机会 [4-5] ，故其早期诊断至关重要。有研究发 例，作为对照组。纳入标准：（1）体检结果为健康，无肿
现，DNA 修复能力下降是引发肺癌（包括 NSCLC）的重 瘤和/或内分泌及代谢性疾病；（2）与NSCLC组患者无血
要原因之一，DNA 修复途径基因的单核苷酸多态性 缘关系；（3）无肿瘤尤其是NSCLC家族史；（4）无明确职
（Single nucleotide polymorphism，SNP）可导致机体DNA 业性致癌因素接触史；（5）年龄、性别与 NSCLC 组患者
[6]
修复能力下降，并增加患者对肿瘤的易感性 。聚腺苷 匹配。排除标准：（1）有肿瘤史者；（2）三代以内亲属有
二磷酸核糖转移酶（ADPRT）又称聚腺苷酸二磷酸核糖 肿瘤史者。其中，男性 131 例，女性 79 例；平均年龄
基转移酶（PARP），其编码基因（ADPRT）是DNA修复途 （59.74±8.85）岁；吸烟者101例，非吸烟者109例。
[7]
径中重要的修复基因 。既往文献报道，该基因存在多 1.2 资料收集
个与恶性肿瘤易感性相关的 SNP 位点，但研究结果不 本研究采用回顾性分析方法，收集并记录两组受试
一 [8-14] 。其中，rs1136410位点是研究热点之一，其突变可 者的人口学资料，包括年龄、性别、个人疾病史、吸烟史
[11]
增加胃癌发生的风险 ，但可降低脑部肿瘤的发生率 。 等；采集NSCLC组患者的确诊信息。
[12]
[13]
Wang X等 研究发现，ADPRT基因rs1136410位点多态 1.3 ADPRT基因rs1136410位点多态性检测
[14]
性与我国北方人群肺癌的发生无关。Qin Q等 的研究 所有受试者均抽取外周静脉血 2 mL，采用 Ezup 柱
指出，该位点多态性可导致亚洲人群肺癌发生的风险增 式血液基因组DNA抽提试剂盒[生工生物工程（上海）有
加，而与高加索人群肺癌的发生无关。目前尚未检索到 限公司]，并参照说明书提取 DNA，产物置于－20 ℃保
ADPRT基因rs1136410位点多态性对我国苏北地区汉族 存。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法
人群 NSCLC 易感性影响的相关报道。为此，本研究以 （PCR-RFLP）进行基因分型。引物由生工生物工程（上
该 类 人 群 为 研 究 对 象 ，初 步 探 讨 了 ADPRT 基 因 海）有限公司设计并合成，上游引物：5′-GTTCTTC-
rs1136410 位点多态性与其 NSCLC 发生的相关性，旨在 CACCTCTCAACTCCCCCA-3′，下游引物：5′-TGCTGC-
为NSCLC早期预防和诊断新标志物的寻找提供参考。 TATCAGACCCTCCCCT-3′。反应体系（共 25.0 μL）：
1 资料与方法 DNA 模 板 9.0 μ L，10 × EasyTaq 缓 冲 液 5.0 μ L（含 20
1.1 研究对象 mmol/L氯化镁），10 mmol/L dNTP 5.0 μL，10 μmol/L上、
本研究经徐州医科大学附属医院临床试验伦理委 下游引物各 2.5 μL，5 U/μL EasyTaq DNA Polymerase
员会审查通过（批件号：XYFY2018-KL023-01），取样前 1.0 μL（除上、下游引物和DNA模板外，其余试剂均购自
所有受试者均知情同意并且签署了知情同意书。 北京全式金生物技术有限公司）。反应条件：94 ℃预变
1.1.1 NSCLC 组 选取 2015 年 11 月－2018 年 12 月于 性5 min，94 ℃变性30 s，62.0 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，
徐州医科大学附属医院就诊的原发性NSCLC的苏北地 72 ℃再延伸 5 min，共 30 个循环。酶切反应体系（共
区患者283例，作为NSCLC组。纳入标准：（1）年龄＞18 20.0 μL）：10 U/μL EciⅠ内切酶 1.0 μL（美国 New Eng-
岁；（2）汉族；（3）无血缘关系；（4）经病理学和/或组织学 land Biolabs 公司）、10×酶切缓冲液 2.0 μL（美国 New
检查确诊为NSCLC（如肺腺癌、肺鳞癌等）。排除标准： England Biolabs 公司）、0.1％牛血清白蛋白 2.0 μL（徐州
（1）有肿瘤史者；（2）曾接受过手术或放化疗者；（3）伴有 微科曼得生物工程有限公司）、PCR产物10.0 μL、灭菌双
其他严重疾病（如糖尿病，无法控制的高血压，最近6个 蒸水5.0 μL，混匀后于37 ℃消化12 h。取酶切产物10 μg，
月内出现过心力衰竭、心肌梗死等）者。其中，男性 182 行2.0％琼脂糖凝胶电泳（电压：100 V，时间：40 min），于
例，女性 101 例；平均年龄（60.50±7.32）岁；吸烟者 176 1600R 型凝胶成像系统（上海天能科技有限公司）上成

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