Page 30 - 《中国药房》2025年6期

67.52 μg/mL的混合对照品溶液。 2.2.7 样品含量测定
2.2.2 线性关系考察 取20批样品粉末各2 g，精密称定，按“2.1.2”项下方
取“2.2.1”项下混合对照品溶液，分别取 1、2、4、8、 法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项下色谱条件进样测
10、12、14 μL，按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，以各成 定，按外标法计算样品含量，每批样品平行测定2次。结
分进样量为横坐标（X）、峰面积为纵坐标（Y）进行线性回 果显示，20批样品中绿原酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、
归。结果见表3。 萹蓄苷、槲皮苷、槲皮素的含量分别为0.025％～0.166％、
表3 各成分的回归方程与线性范围 0.048％～0.339％、0.082％～0.419％、0.017％～0.209％、
成分 线性范围/μg 回归方程 R 2 0.011％～0.134％、0.020％～0.135％、0.041％～0.235％。
绿原酸 0.029 9～0.418 6 Y＝1 095 849.26X+2 180.00 0.999 8
芦丁 0.086 5～1.211 3 Y＝1 667 891.97X－5 518.18 0.999 9 表明不同批次贯叶金丝桃中各成分含量存在较大差异。
金丝桃苷 0.132 3～1.852 2 Y＝2 150 250.03X－7 338.79 0.999 9 进一步分析发现，S7 和 S10 样品中金丝桃苷含量低于
异槲皮苷 0.030 8～0.431 5 Y＝2 258 416.25X－3 051.32 0.999 9 《中国药典》规定不得少于 0.10％标准，故为不合格品，
萹蓄苷 0.019 6～0.274 4 Y＝1 864 218.40X－1 334.04 0.999 9
槲皮苷 0.020 1～0.282 0 Y＝2 298 336.04X－3 584.50 0.999 9 其余18批样品为合格品。结果见表4。
槲皮素 0.067 5～0.945 3 Y＝2 531 572.42X－12 178.32 0.999 8 表4 贯叶金丝桃中7种成分含量测定结果（n＝2，％％）
2.2.3 精密度试验 编号 绿原酸 芦丁 金丝桃苷 异槲皮苷 萹蓄苷 槲皮苷 槲皮素
S1 0.111 0.175 0.172 0.066 0.070 0.090 0.094
取“2.1.2”项下供试品溶液（编号 S11），按“2.1.1”项
S2 0.077 0.167 0.286 0.099 0.105 0.071 0.140
下色谱条件连续进样6次，记录峰面积。结果显示，绿原 S3 0.048 0.189 0.172 0.152 0.059 0.023 0.062
酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、扁蓄苷、槲皮苷、槲皮素 S4 0.088 0.232 0.290 0.137 0.117 0.063 0.162
峰面积的 RSD 分别为 0.39％、0.50％、0.41％、0.52％、 S5 0.071 0.066 0.151 0.018 0.047 0.058 0.087
S6 0.111 0.339 0.360 0.164 0.134 0.061 0.138
0.53％、0.71％、0.94％（n＝6），表明仪器的精密度良好。 S7 0.025 0.056 0.082 0.040 0.011 0.020 0.064
2.2.4 稳定性试验 S8 0.078 0.086 0.125 0.018 0.050 0.082 0.091
S9 0.103 0.084 0.211 0.021 0.079 0.091 0.153
取“2.1.2”项下供试品溶液（编号 S11），分别于制备
S10 0.073 0.117 0.089 0.020 0.025 0.040 0.067
后室温下放置0、2、4、8、12、24 h时按“2.1.1”项下色谱条 S11 0.072 0.054 0.141 0.162 0.058 0.074 0.100
件进样测定，记录峰面积。结果显示，绿原酸、芦丁、金 S12 0.081 0.048 0.115 0.038 0.022 0.047 0.041
S13 0.054 0.059 0.122 0.027 0.037 0.066 0.056
丝桃苷、异槲皮苷、扁蓄苷、槲皮苷、槲皮素峰面积的
S14 0.060 0.168 0.165 0.035 0.039 0.135 0.130
RSD 分 别 为 0.75％ 、1.35％ 、0.89％ 、1.00％ 、0.93％ 、 S15 0.081 0.162 0.294 0.209 0.123 0.031 0.235
1.07％、1.27％（n＝6），表明供试品溶液在室温下放置 S16 0.077 0.069 0.162 0.019 0.051 0.059 0.101
24 h内稳定性良好。 S17 0.037 0.054 0.120 0.017 0.046 0.063 0.125
S18 0.048 0.137 0.123 0.025 0.046 0.128 0.134
2.2.5 重复性试验 S19 0.166 0.160 0.419 0.039 0.121 0.126 0.137
取样品（编号S11），共6份，按“2.1.2”项下方法制备 S20 0.100 0.112 0.199 0.029 0.083 0.093 0.149
供试品溶液，再按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，记录
2.2.8 贯叶金丝桃中7种成分含量结果的聚类分析
峰面积并根据外标法计算各成分的含量。结果显示，绿
以 18 批合格贯叶金丝桃中绿原酸等 7 种成分的含
原酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、萹蓄苷、槲皮苷、槲皮
量为变量，采用SPSS 26.0软件进行聚类分析（图2）。结
素含量的 RSD 分别为 1.39％、1.77％、0.64％、0.55％、
果显示，当欧氏距离为 1.4 时，18 批样品聚为 3 类：S2、
1.32％、0.93％、1.41％（n＝6），表明该方法的重复性
S4、S6、S15、S19 聚为第 1 类，S1、S9、S14、S18、S20 聚为
良好。
第 2 类，S3、S5、S8、S11～S13、S16、S17 聚为第 3 类。当
2.2.6 加样回收率试验
欧氏距离为2.0时，第2类和第3类可聚为一类。结合含
精密量取已知含量的贯叶金丝桃粉末（编号 S11），
共 6 份，每份 1 g，按各成分含量质量比约 1∶1 加入适量 量测定结果发现，第 1 类样品中所含的 7 种成分的总含
量明显高于第2类和第3类样品，而大部分第2类样品中
的各单一对照品溶液，精密加入 60％乙醇至 50 mL，然
后按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项下 所含的7种成分的总含量高于第3类样品，但存在S3和
色谱条件进样测定，记录峰面积并计算加样回收率。结 S11样品按总含量应归第2类，实际却归为第3类的特殊
果显示，绿原酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、萹蓄苷、槲 情况。对此结果进一步分析发现，原因可能与 S3 样品
皮 苷 、槲 皮 素 的 平 均 加 样 回 收 率 分 别 为 93.85％ 、 中槲皮苷和槲皮素含量、S11 样品中芦丁和槲皮苷含量
95.85％、94.53％、95.68％、93.86％、100.29％、96.48％， 均低于第2类样品，与第3类样品类似有关。综上，基于
RSD 分 别 为 2.81％ 、2.68％ 、2.71％ 、2.74％ 、2.31％ 、 聚类分析结合含量测定结果，可将18批样品中的第1类
2.57％、2.50％（n＝6），表明方法的准确度良好。 划为优品，第2类划为良品，第3类划为合格品。

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