Page 73 - 《中国药房》2025年5期

of ZO-1 and Occludin positive areas increased significantly in loganin low-dose and high-dose groups； while the levels of IL-6，
TNF-α， IL-1β， DAO， D-lactate and endotoxin， Chiu’s intestinal mucosal injury score as well as protein expressions of RhoA and
ROCK1 decreased significantly （P＜0.05）； the destruction of rat ileal tissue was alleviated， and tissue edema and inflammatory
infiltration were significantly reduced； moreover， the improvement effect in loganin high-dose group was superior to that in loganin
low-dose group （P＜0.05）. Compared with loganin high-dose group， RhoA activator LPA reversed the trend of changes in the
above indicators （P＜0.05）. CONCLUSIONS Loganin can alleviate inflammatory response and intestinal barrier damage in septic
rats， the mechanism of which may be associated with inhibiting RhoA/ROCK1 signaling pathway.
KEYWORDS loganin； sepsis； RhoA/ROCK1 signaling pathway； inflammatory response； intestinal barrier damage

脓毒症是宿主对感染的异常反应引发的危重疾病， 为 ab197004、ab273325、ab307799、ab216327、ab187027、
进展迅速且死亡率高，可导致多器官功能障碍，已成为 ab134181）均购自英国 Abcam 公司；IL-6 试剂盒（批号
公认的全球健康问题，且尚无特异性疗法。脓毒症可引 QN-PS1726）购自上海岑特生物科技有限公司；肿瘤坏
发肠道屏障损伤进而发生细菌易位，加剧全身炎症反 死因子 α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）试剂盒（批号
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应，并导致多器官功能障碍 ，因此关注肠道屏障损伤是 ER006）购自上海吉泰依科赛生物科技有限公司。
治疗脓毒症的关键。肠道屏障功能的完整性可以通过 1.3 实验动物
上皮紧密连接蛋白的表达来评估，Ras 同源基因家族成 SPF级大鼠，雄性，体重（190±20） g，购自广州明迅
员 A（Ras homolog gene family member A，RhoA）/Rho相 生物科技有限责任公司，实验动物生产许可证号为
关卷曲螺旋形成蛋白激酶 1（Rho-associated coiled-coil SCXK（粤）2024-0070。大鼠在无特异性病原体的标准
forming protein kinase 1，ROCK1）信号通路已被证明在 环境中适应性喂养1周，自由摄食、饮水。本研究通过河
[2]
调节肠道细胞间紧密连接中起关键作用 ，同时也被证 北中医药大学实验动物管理和伦理委员会批准（编号：
[3]
实在脓毒症急性肺损伤等并发症中发挥着调控作用 。 DWLL202306019）。
马钱苷是一种具有强大药理作用的环烯醚萜类化合物， 2 方法
研究表明，通过其抗炎、抗凋亡作用可明显改善烧伤后 2.1 脓毒症大鼠模型的制备及干预
引发的肠道屏障损伤和肠道功能障碍，发挥肠道保护作 大鼠禁食 8 h 后，按照随机数字表法分为造模组
[4]
用 。但马钱苷是否通过调节RhoA/ROCK1信号通路来 （n＝50）及假手术组（n＝10）。造模组大鼠腹腔注射 30
改善脓毒症大鼠的肠道屏障损伤尚不可知。本研究通 mg/kg 戊巴比妥钠进行麻醉，采用盲肠结扎和穿刺法建
过建立脓毒症大鼠模型，旨在探讨马钱苷对脓毒症大鼠 立脓毒症模型 。假手术组大鼠接受相同的手术，不包
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炎症反应、肠道屏障损伤的影响及其潜在机制。 括盲肠结扎和穿刺。术后监测大鼠平均动脉压，当平均
1 材料 动脉压下降30%，提示脓毒症大鼠模型构建成功。将造
1.1 主要仪器 模成功的大鼠随机分为脓毒症组、马钱苷低剂量组、马
本研究所用主要仪器包括Multiskan MK3型酶标仪 钱苷高剂量组、阳性对照组、马钱苷高剂量+LPA 组，每
（美国Thermo Scientific公司）；DM4B型光学显微镜（德 组 10 只。马钱苷低、高剂量组大鼠分别灌胃 50、200
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国 Leica 公司）；Enduro GDS 型凝胶成像系统（北京兰博 mg/kg 的马钱苷 ；阳性对照组大鼠腹腔注射 0.2 mg/kg
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康斯科技有限公司）。 的阿托伐他汀 ；马钱苷高剂量+LPA 组大鼠灌胃 200
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1.2 主要药品与试剂 mg/kg 的马钱苷，并腹腔注射 10 mg/kg 的 LPA ；脓毒症
马钱苷对照品（纯度99.7%，批号yb-2148）购自成都 组和假手术组大鼠灌胃与马钱苷等体积的生理盐水，每
普瑞法科技开发有限公司；RhoA 激活剂溶血磷脂酸 6 h给药1次，连续给药4次。
（lysophosphatidic acid，LPA；批号 SAB2107510）购自美 2.2 血清炎症因子指标分析
国 Sigma 公司；阿托伐他汀对照品（纯度 98.0%，批号 末次给药 24 h 后，麻醉并处死各组大鼠，从其心脏
T3116）购自南京赛泓瑞生物科技有限公司；白细胞介素 抽取血液，并以3 000×g离心15 min，取上清液，用酶联
1β（interleukin-1β，IL-1β）试剂盒（批号 27193）购自深圳 免疫吸附测定试剂盒测定IL-6、TNF-α、IL-1β水平。
市科润达生物工程有限公司；内毒素试剂盒（批号 2.3 回肠组织病理学变化观察
SBJR0392）、山羊血清（批号SBJ012）均购自南京森贝伽 对各组大鼠血液收集完毕后，分离其回肠组织，取
生物科技有限公司；D-乳酸试剂盒、D-氨基酸氧化酶（D- 部分组织用 4% 多聚甲醛固定、石蜡包埋，制成切片（5
amino acid oxidase，DAO）试剂盒、鼠源闭锁小带蛋白 μm），经脱蜡、脱水后，行苏木精和伊红染色，用光学显
（zonula occludens-1，ZO-1）抗体、鼠源闭锁蛋白（Occlu‐ 微镜观察回肠组织病理学变化，依据组织学损伤变化进
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din）抗体、鼠源RhoA抗体、鼠源ROCK1抗体（批号依次 行Chiu’s肠黏膜损伤评分 。

中国药房 2025年第36卷第5期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 5 · 575 ·