Page 35 - 《中国药房》2025年5期
P. 35

KEYWORDS    Qixiong zuogui granule； tortoiseshell glue； antler glue； content determination； LC-MS/MS



              芪芎左归颗粒由补阳还五汤和左归丸化裁而成，处                         2 方法与结果
          方包括黄芪、熟地黄、川芎、枸杞子、龟甲胶、鹿角胶、山                         2.1 溶液的制备
          药、桃仁、红花、菟丝子、山茱萸、茯苓、牛膝共13味中药，                       2.1.1 芪芎左归颗粒供试品溶液的制备
          临床用于治疗脑卒中，疗效较好              [1―2] 。但该颗粒剂目前             取芪芎左归颗粒适量，研细，精密称取药粉2.0 g，加
          缺乏相关质量标准，因此，有必要进行该颗粒剂的质量                           甲醇50 mL回流提取1 h，放至室温；取药液适量，离心后
          标准研究。                                              取上清液作为母液，冷藏备用；取母液1 mL置于5 mL容
              基于传统方剂的有效性、方剂中化学成分的药理作                         量瓶中，加甲醇定容，即得芪芎左归颗粒供试品溶液。
          用及其代表性，本研究拟定黄芪甲苷、毛蕊异黄酮苷、毛                          2.1.2 龟甲胶、鹿角胶供试品溶液的制备
          蕊异黄酮、绿原酸、阿魏酸、甜菜碱、苦杏仁苷、芦丁、羟                             取芪芎左归颗粒适量，研细，精密称取药粉4.0 g（约
          基红花黄色素A、金丝桃苷、马钱苷、杯苋甾酮这12个化                         含龟甲胶、鹿角胶各0.1 g）置于锥形瓶中，加入1 mg/mL
          学成分为芪芎左归颗粒的指标成分                [3―5] 。另外，芪芎左
                                                             的碳酸氢铵溶液 50 mL，超声（频率 40 kHz，功率 400
          归颗粒处方中龟甲胶、鹿角胶的生产原料稀缺、价格高
                                                             W），冷却至室温后补足减失的质量，过滤；取续滤液 1
          昂，假品屡见不鲜，因此，有必要对这两种药材进行鉴
                                                             mL，加入胰蛋白酶溶液0.1 mL（临用时用1 mg/mL的碳
          别。基于此，本研究采用液相色谱串联质谱（LC-MS/
                                                             酸氢铵溶液配制），混匀，再水浴水解12 h，过滤，取续滤
          MS）法建立芪芎左归颗粒中 12 种化学成分的含量测定
                                                             液，即得龟甲胶、鹿角胶供试品溶液。
          方法，并对制剂中贵重药材龟甲胶、鹿角胶进行鉴别，以
                                                             2.1.3 对照品溶液的制备
          期为该制剂的质量控制提供参考依据。
                                                                 分别取黄芪甲苷、毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮、绿原
          1 材料
                                                             酸、阿魏酸、甜菜碱、苦杏仁苷、芦丁、羟基红花黄色素
          1.1 主要仪器
                                                             A、金丝桃苷、马钱苷、杯苋甾酮对照品适量，置于不同容
              本研究所用主要仪器有Vanquish-Orbitrap Fusion型
                                                             量瓶中，加甲醇定容，即得各成分质量浓度依次为
          液质联用仪、Ultimate 3000-Orbitrap Exploris 240 型液质
                                                             1.730、1.750、1.540、2.115、2.185、2.175、1.640、1.795、
          联用仪（美国 Thermo Fisher Scientific 公司），HW.SY11-
                                                             1.645、1.915、3.400、1.885 mg/mL 的单一对照品母液。
          DP2 型智能恒温水浴锅（北京市长风仪器仪表公司），
                                                             取上述单一对照品母液各适量，置于同一50 mL容量瓶
          22331  Hamburg 型 小 型 台 式 高 速 冷 冻 离 心 机（德 国
                                                             中，以甲醇定容，混匀，即得各成分质量浓度依次为
          Eppendorf公司），AE240型十万分之一天平（瑞士Mettler
                                                             346.0、700.0、308.0、1  692.0、437.0、500.0、14  760.0、
          Toledo公司）。
                                                             718.0、5 264.0、766.0、2 720.0、377.0 ng/mL的混合对照品
          1.2 主要药品与试剂
                                                             溶液。
              芪芎左归颗粒（共 3 批，编号 S1～S3，批号分别为
                                                             2.2 芪芎左归颗粒中龟甲胶、鹿角胶的鉴别
          20230527、20230528、20230529）由河南中医药大学药剂
                                                             2.2.1 色谱条件
          学实验室自制；龟甲胶、鹿角胶对照药材（批号分别为
                                                                 色 谱 柱 为 Hypersil  GOLD（100  mm×2.1  mm，1.9
          121693-201702、121694-201702）购自中国食品药品检定
          研究院；绿原酸、黄芪甲苷、甜菜碱、毛蕊异黄酮苷、毛蕊                         μm）；流动相为乙腈（A）-0.1% 甲酸溶液（B），梯度洗脱
          异黄酮、苦杏仁苷、羟基红花黄色素A、马钱苷、阿魏酸、                        （0～1  min，5%A；1～5  min，5%A→20%A；5～8  min，
          杯苋甾酮、金丝桃苷对照品（批号分别为J01HB186721、                     20%A→50%A；8～10 min，50%A→95%A；10～12 min，
          Y08010K96808、J02GB153190、J16GB143379、Y16O11-       95%A；12～12.1 min，95%A→5%A；12.1～14 min，5%A），
          H127829、A22GB158496、G1311L124423、C17D10C1059       流速为0.2 mL/min；进样量为2 μL；柱温为35 ℃。
          77、A27GB158923、DJ0615YA13、Y05J11H115098，纯度         2.2.2 质谱条件
          均大于 98%）均购自上海源叶生物科技有限公司；芦丁                             采用 Ultimate 3000-Orbitrap Exploris 240 型液质联
          对照品（批号wkq180509C9，纯度大于98%）购自四川维                    用仪进行测定。采用电喷雾离子源，以正离子多反应检
          克奇生物科技有限公司；甲醇（批号 70104405152，色谱                    测模式扫描；载气为 N2，喷雾电压为 3.5 kV（+）、3.0 kV
          纯）购自天津四友精细化学品有限公司；胰蛋白酶（批号                         （－），气化温度为 350 ℃；以质荷比（m/z）631.3→546.4、
          20230913）购自北京索莱宝生物科技有限公司；碳酸氢                       631.3→921.4 作为龟甲胶的检测离子对，m/z 765.4→
                                                                                                    [6]
          铵（批号 6971978981681，分析纯）购自天津市大茂化学                   554.0、765.4→733.0作为鹿角胶的检测离子对 ；信噪比
          试剂厂。                                               大于3∶1。


          中国药房  2025年第36卷第5期                                                 China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 5    · 541 ·
   30   31   32   33   34   35   36   37   38   39   40