Page 59 - 《中国药房》2024年19期
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inflammatory role， and improving skin inflammation in eczema rats.
          KEYWORDS    Runzao zhiyang capsule； eczema； gut microbiota； short-chain fatty acid



              润燥止痒胶囊（Runzao zhiyang capsule，RZZY）具           g，购自南方医科大学实验动物中心，动物生产许可证号
          有养血滋阴、祛风止痒、润肠通便的功效，是治疗皮肤病                          为SCXK（粤）2021-0041。大鼠饲养于温度为25 ℃的标
          常用药物，对慢性湿疹等皮肤瘙痒症有良好治疗效                             准笼中，循环照明 12 h，自由饮水摄食。本实验经南方

          果 [1—2] ，但具体作用机制尚不清楚。近年来研究发现，湿                     医科大学实验动物伦理委员会审查批准（决议编号为
                              [3]
          疹与肠道菌群失调相关 ，如特应性湿疹婴儿的肠道富                           L2021189）。
          集大肠杆菌和肺炎克雷伯菌，且粪便相关毒力因子基因                           2 方法
                  [4]
          表达增强 ；短链脂肪酸（short-chain fatty acid，SCFA）作          2.1 分组、造模与给药
                                [5]
          为肠道菌群的重要代谢物 ，在湿疹患者体内含量显著                               取 30 只 SD 大鼠随机分为正常组（NC 组）、模型组
              [6]
          降低 ，可见肠道菌群失调是湿疹发生发展的重要环节。                         （MC组）、地氯雷他定组（DEXA组，阳性对照，1.5 mg/kg，
          信号转导及转录激活因子 3（signal transduction and acti‐        剂量根据临床等效剂量换算而得）和 RZZY 低剂量组

          vator of transcription 3，STAT3）是湿疹致病信号通路          （RZZY-L 组，0.6 g/kg，剂量根据临床等效剂量换算而
                                                     [7]
          Janus 激酶（Janus kinase，JAK）/STAT 中的关键靶点 ，且          得）、高剂量组（RZZY-H组，1.2 g/kg），每组6只。各组大
                                        [8]
          STAT3 的激活与肠道菌群失调相关 ，这提示调整肠道                        鼠选取背部 2 cm×2 cm 皮肤脱毛后，NC 组涂抹基质溶
          菌群可能有助于下调 STAT3 表达，从而改善湿疹症状。                       液（将丙酮和橄榄油按体积比4∶1配制而成），其余组在
          基于此，本研究拟构建湿疹大鼠模型，采用16S rDNA测                       第 1、2、3 天用 200 µL 1%DNCB 溶液（用基质溶液配制）
          序探讨 RZZY 对大鼠肠道菌群及 SCFA 的影响，并基于                     涂抹致敏，每天 1 次。第 4 天 DEXA 组、RZZY-L 组和

          湿疹靶点STAT3初步研究RZZY的作用机制，以期为该                        RZZY-H组大鼠开始灌胃给药，MC组和NC组大鼠灌胃
          药的临床应用提供实验依据。                                      等体积生理盐水，每天 1 次，连续 2 周（即给药至第 18
          1 材料                                               天）。其间，在第7、10、13、16天加用100 µL 0.5%DNCB
          1.1 主要仪器                                           溶液涂抹脱毛区皮肤，促进造模，当皮肤出现红斑、水肿
              本研究所用主要仪器有TRACE1300-ISQ型气相色                    等症状时，提示湿疹模型构建成功              [1， 9] 。
          谱-质谱联用仪（美国 Thermo Fisher Scientific 公司）、           2.2 样品收集

          Leica RM2125 RTS型石蜡切片机（上海徕卡仪器有限公                       给药完成后，参考湿疹面积及严重度指数（eczema
          司）、HC-3018R 型高速冷冻离心机（安徽中科中佳科学                      area and severity index，EASI）评分法 [10―11] ，对干预前后的
          仪器有限公司）、BP211D型十万分之一天平（德国Sarto‐                    皮肤厚度和症状进行评价。收集各组大鼠粪便进行肠
          rius公司）等。                                          道菌群及其代谢物 SCFA 分析，然后处死大鼠收集结肠
          1.2 主要药品与试剂                                        和皮肤组织，取一部分进行苏木精-伊红（HE）染色，以观
                                                                                           [9]
              RZZY（批号 210601，规格 0.5g/粒）购自国药集团同               察皮肤病理学形态变化并进行评分 。
          济 堂（贵 州）制 药 有 限 公 司 ；地 氯 雷 他 定 片（批 号               2.3 大鼠肠道菌群组成分析
          B220822，规格 5 mg/片）购自深圳信立泰药业股份有限                        鉴于高剂量的RZZY对湿疹具有良好药效，因此笔
          公司；兔源STAT3抗体（批号S28221020703）和辣根过氧                  者进一步通过肠道菌群探讨其改善湿疹的作用机制。
          化物酶标记的山羊抗兔二抗（批号 AC2407181）购自武                      采 用 338F/806R（5′-ACTCCTACGGGAGGCAGCA-3′
          汉 赛 维 尔 生 物 科 技 有 限 公 司 ；2- 乙 基 丁 酸（批 号            和 5′-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3′）引物提取大
          2630538）购自上海麦克林生化科技股份有限公司；2，4-                     鼠粪便样本总DNA，然后提取、纯化和定量扩增子。使
          二硝基氯苯（2，4-dinitrochlorobenzene，DNCB）、丙酮均           用 Illumina MiSeq2500 测序平台进行测序反应，在 97%

          购自上海吉至生化科技有限公司。                                    截断点处将干净序列划分为多个操作分类单位（opera‐
          1.3 实验动物                                           tional taxonomic units，OTUs），用于生物信息学分析，通
              本研究所用动物为SPF级SD大鼠，体重（200±20）                    过韦恩图、ACE 指数、Sobs 指数和 Shannon 指数进行肠


          中国药房  2024年第35卷第19期                                              China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 19    · 2373 ·
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