Page 51 - 《中国药房》2024年13期
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支气管哮喘（简称“哮喘”）是一种以可逆性气道阻                        自北京索莱宝科技有限公司；地塞米松磷酸钠注射液
          塞和支气管高反应性为主要特征的慢性炎症性变应性                           （批号1709012）购自河南润弘制药股份有限公司；甲醇、
          疾病，其发病率逐渐增加，全世界现已有超过3.5亿人受                         乙腈、甲酸均为色谱纯，水为娃哈哈纯净水。
                [1]
          到影响 。哮喘属中医“喘病”范畴，《伤寒论》中多种平                         1.3 动物
          喘方剂皆以麻黄、杏仁配伍，其中麻黄具有“峻烈之性”，                             本研究所用动物为 SPF 级雄性 SD 大鼠，体质量为
          可宣畅肺气而平喘利水；杏仁具有润燥止咳的功效，可                           180～200 g，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司，实
          宣降肺气而止咳平喘；两药一畅一降、一刚一柔，互制其                          验动物生产许可证号为 SCXK（湘）2019-0004。本实验
          偏，平喘止咳之力益显，故素有“麻黄以杏仁为臂助”的                          经江西中医药大学实验动物伦理委员会批准（伦理批号
          说法  [2―3] 。                                        为JZLLSC2019-0308）。
              相关研究发现，麻黄主要成分麻黄碱的平喘作用与                         2 方法与结果
          中枢作用相关，可促使支气管平滑肌松弛、黏膜毛细血                           2.1 色谱与质谱条件
                [4]
          管收缩 ；另外，麻黄碱还可通过作用于外周系统，激动                          2.1.1 色谱条件
                                                [5]
          肺组织中 β2受体，进而使支气管平滑肌舒张 。苦杏仁                             采用 ACQUITY UPLC BEH C18 色谱柱（2.1 mm×
          苷经代谢水解后的产物氢氰酸可抑制呼吸中枢，从而达                           100 mm，1.7 μm），以 0.02% 甲酸溶液（A）-乙腈（B）为流
          到止咳平喘的功效；其还可通过外周系统抑制肺组织炎                           动 相 进 行 梯 度 洗 脱（0～0.5  min，90%A；0.5～3  min，
          症反应，减少黏蛋白分泌及肺间质内炎症细胞浸润以达                           80%A；3～4.5 min，60%A；4.5～5.1 min，5%A；5.1～5.5
                          [2]
          到止咳平喘的作用 。这提示麻黄、杏仁配伍后，可能通                          min，90%A），流速为 0.25 mL/min，柱温为 40 ℃，进样量
          过中枢和外周系统发挥平喘作用。研究表明，麻黄、杏                           为1 μL。
                                               [6]
          仁配伍比例为 2∶1 时具备较优的平喘效果 。基于此，                        2.1.2 质谱条件
          本文采用液相色谱-串联质谱法，从外周和中枢两个系                               采用多反应监测模式（multiple reaction monitoring，
          统研究麻黄与杏仁配伍（比例为2∶1）后在哮喘模型大鼠                         MRM），正离子模式扫描，离子源喷射电压为10 V，解簇
          血浆和脑脊液中的药动学变化，以期为麻黄-杏仁药对                           电压为76 V，碰撞池出口电压为6 V，碰撞能为19 eV，气
          的临床应用提供参考。                                         帘气压力为 25 psi，碰撞气压力为 6 psi，温度为 550 ℃。
          1 材料                                               目标化合物定量分析MRM参数见表1。
          1.1 主要仪器                                                  表1 目标化合物和内标的MRM参数
              本研究所用主要仪器有LC-30A型超高效液相色谱                        目标化合物/内标  相对分子  分子离子峰  母离子m/z 子离子m/z  毛细管出口  碰撞能/eV
                                                                        质量/Da                     电压/V
          仪（日本Shimadzu公司）、TRIPLE QUAD 4500型三重四                麻黄碱       165.2  [M+H] +  166.1  133.2  40  21
          极杆质谱仪（美国AB Sciex公司）、BSA224S型十万分之                    伪麻黄碱      165.2  [M+H] +  166.0  117.0  60  26
                                                              甲基麻黄碱     179.2  [M+H] +  180.1  162.1  76  19
          一分析天平（德国Sartorius公司）、TGL-16.5M型高速低
                                                              苦杏仁苷      457.4  [M+NH 4] +  480.3  346.9  129  38
          温冷冻离心机（上海卢湘仪离心机仪器有限公司）、S25                          葛根素       416.3  [M+H] +  416.9  297.0  108  35
          型涡旋振荡仪（德国 Lab Dancer 公司）、402AI 型超声雾                2.2 溶液的配制
          化器（上海鱼跃医疗设备有限公司）。                                  2.2.1 标准溶液的配制
          1.2 主要药品与试剂                                            精密称定麻黄碱、伪麻黄碱、甲基麻黄碱、苦杏仁苷
              麻黄、苦杏仁药材（批号分别为 210309、211217）均                 对照品各10.00 mg，分别置于不同的10 mL容量瓶中，其
          购自江西江中中药饮片有限公司，经江西中医药大学药                           中各麻黄生物碱采用甲醇溶解，苦杏仁苷采用50%甲醇
          学院付小梅教授鉴定均为真品；盐酸麻黄碱、盐酸伪麻                           溶解，最后得各成分质量浓度均为 1 mg/mL 的储备液。

          黄碱、盐酸甲基麻黄碱、苦杏仁苷对照品（批号分别为                           同法制备麻黄碱/伪麻黄碱质量浓度均分别为0.4、2 000、
          171241-201809、171237-201510、171247-201502、110820-   9 600 ng/mL，甲基麻黄碱质量浓度分别为 0.8、400、720
          201808，纯度均大于99.6%）均购自中国食品药品检定研                     ng/mL，苦杏仁苷质量浓度分别为1.6、600、900 ng/mL的
          究院；葛根素对照品（内标，批号 wkq22012601，纯度                     质控（QC）工作溶液①和麻黄碱/伪麻黄碱质量浓度均分
          99.8%）购自四川维克奇生物技术有限公司；磷酸组胺对                        别为0.4、200、1 200 ng/mL，甲基麻黄碱质量浓度分别为
          照品（批号 101516525，纯度 99.0%）购自美国 Sigma 公              0.8、30、75 ng/mL，苦杏仁苷质量浓度分别为 1.6、200、
          司；氯化乙酰胆碱对照品（批号313G011，纯度99.0%）购                    450 ng/mL的QC工作溶液②。


          中国药房  2024年第35卷第13期                                              China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 13    · 1589 ·
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