Page 42 - 《中国药房》2024年7期

0.05）. There were no significant differences in the above indexes between proanthocyanidins 200 mg/kg group and benazepril
hydrochloride 5 mg/kg group （P＞0.05）. CONCLUSIONS The improvement effect of proanthocyanidins on AKI rats may be
related to the activation of SIRT1/AMPK signaling pathway to inhibit oxidative stress.
KEYWORDS proanthocyanidins； SIRT1/AMPK signaling pathway； acute kidney injury； oxidative stress

急性肾损伤（acute kidney injury，AKI）是一种临床 酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒（批号分别为 QY-
综合征，其主要特征是肾小球滤过率降低导致新陈代谢 WN1921、QY-WR1922、QY-PD7238）均购自北京寰宇科
废物积聚、血清肌酐（serum creatinine，SCr）水平升高，主 创生物科技发展有限公司；苏木精-伊红（HE）染色试剂
要并发症有电解质紊乱、药物毒性和尿毒症等 [1―2] 。近 盒（批号 AR1180-100）购自上海恒斐生物科技有限公
年来，AKI发生率逐年上涨，其病死率高达60%，目前以 司；TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒（批号 3152）购自上海
庆大霉素为代表的抗生素等药物大剂量使用已成为诱 中乔新舟生物科技有限公司；蛋白提取试剂盒、BCA 蛋

[3]
发AKI的主要因素之一 。因此有效防治庆大霉素等药 白检测试剂盒（批号分别为 BC3711-50T、PC0020-500）
物造成的药源性AKI至关重要。 均购自上海吉至生化科技有限公司；兔抗胱天蛋白酶-3
葡萄籽提取物原花青素作为一种天然抗氧化剂，能 （Caspase-3）、B 细胞淋巴瘤 2 基因相关 X 蛋白（Bcl-2
有效清除机体氧自由基，对黄曲霉毒素B1诱导的AKI具 associated X protein，Bax）、SIRT1、磷酸化 SIRT1（phos‐
[4]
有明显的保护作用 ，能改善脓毒症相关 AKI 的肾组织 phorylated AMPK，p-SIRT1）、AMPK、p-AMPK、β-肌动蛋
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结构、减轻肾损伤 ，但其作用机制尚不明确。沉默信息 白（β-actin）抗体和羊抗鼠IgG二抗（批号分别为C2603、
调节因子1（silent information regulator of transcription 1， C2531、C4970、C9661、C2772、C9011、C4075、C0012）均
SIRT1）/AMP 活化蛋白激酶（AMP-activated protein ki‐ 购自美国CST公司。
nase，AMPK）在维持细胞能量稳态、衰老、炎症和氧化应 1.3 实验动物
[6]
激中具有重要作用，激活该通路可有效改善AKI程度 。 SPF 级雄性 SD 大鼠，10 周龄，体质量 334～352 g，
因此本研究基于SIRT1/AMPK信号通路，探讨原花青素 购自江苏汉煌农业科技有限公司，动物生产许可证号为
对庆大霉素致大鼠AKI的改善机制，以期为AKI防治药 SCXK（苏）2021-0014。大鼠适应性饲养于温度 21～
物的寻找提供数据参考。 25 ℃、相对湿度 45%～55%、12 h 明暗交替的环境中 1
1 材料 周，自由饮水及摄食，实验前禁食 12 h。动物实验经儋
1.1 主要仪器 州市人民医院伦理委员会批准，批准编号为 LS2022-
BS-280 型全自动生化分析仪购自深圳迈瑞生物医 034号。

疗电子股份有限公司；RT2100C型全自动酶标仪购自德 2 方法
国IFP公司；SZX16-6141型显微镜购自日本Olympus公 2.1 造模、分组与给药
司；Gel Ⅸ Imager 型凝胶成像仪购自德国 Royal Intas 参考相关文献 方法建立 AKI 大鼠模型：大鼠连续
[7]
公司。 7 d腹腔注射硫酸庆大霉素（140 mg/kg），若血清中SCr、
1.2 主要药品与试剂 BUN及24 h尿液中UP水平同时不低于造模前2倍则表
原花青素原料药（纯度99%，批号D1724-20）购自上 明造模成功。将造模成功的大鼠随机分为模型对照
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海宝曼生物科技有限公司；盐酸贝那普利片（规格5 mg， 组、盐酸贝那普利5 mg/kg组（阳性对照） 、原花青素50
批号 20200711）购自深圳信立泰药业股份有限公司；硫 mg/kg 组、原花青素 100 mg/kg 组、原花青素 200 mg/kg
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酸庆大霉素注射液（规格 2 mL，批号 20220619）购自武 组 ，每组 10 只；另取 10 只正常大鼠作为正常对照组。
汉爱民制药股份有限公司；SCr、尿素氮（blood urea nitro‐ 各给药组大鼠灌胃相应药液（生理盐水为溶剂），给药体
gen，BUN）、尿蛋白（urinary protein，UP）检测试剂盒（批 积为10 mL/kg，正常对照组和模型对照组大鼠灌胃等体

号分别为 SYIN-167、SYIN-179、SYIN-507）均购自上海 积生理盐水。所有大鼠每天给药1次，连续28 d。
双 赢 生 物 科 技 有 限 公 司 ；丙 二 醛（malondialdehyde， 2.2 大鼠血清和尿液中生化指标及血清氧化应激指标
MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、 检测
谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px） 末次给药后，取各组大鼠腹主动脉血3 mL，以3 000

· 808 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 7 中国药房 2024年第35卷第7期