Page 56 - 《中国药房》2024年6期
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were  more  significant  in  the  high-dose  group （P＜0.05）；  EX527  could  reverse  the  improvement  effect  of  high-dose  sodium
          aescinate （P＜0.05）.  CONCLUSIONS  Sodium  aescinate  can  inhibit  the  activation  of  NF-κB  signal  by  up-regulating  the  protein
          expression of SIRT1， thereby reducing the neuroinflammation of rats with Parkinson’s disease， improving the motor and cognitive
          dysfunctions， and finally playing a neuroprotective role.
          KEYWORDS     sodium  aescinate；  Parkinson’s  disease；  SIRT1/NF- κB  signaling  pathway；  motor  function；  cognitive  function；
          inflammatory response； neuroprotection


              帕金森病是由黑质多巴胺神经元丢失引起的神经                          （tyrosine hydroxylase，TH）、α-Syn 一抗，鼠源 SIRT1、磷
          退行性疾病，其主要特征包括震颤麻痹、认知异常、学习                           酸化 NF-κB p65（phosphorylated NF-κB p65，p-NF-κB
                       [1]
          记忆能力下降 。α 突触核蛋白（α-synuclein，α-Syn）的                 p65）、NF-κB p65、β-肌动蛋白（β-actin）一抗和辣根过氧
          积累和小胶质细胞的过度激活是帕金森病发生的重要                             化物酶标记的羊抗鼠IgG二抗、羊抗兔IgG二抗（批号分
                                            [2]
          病理因素，神经炎症反应是其关键环节 。沉默信息调                            别 为 DN59101、 DN53902、 DN42950、 DN17593、
          节因子 1（silent information regulator 1，SIRT1）在炎症、     DN54920、DN58191、DN27581、DN28159）均购自西安迪
          细胞代谢及凋亡等过程中发挥调节作用，并对减轻帕金                            诺生物科技有限公司。
                                  [3]
          森病病理改变具有积极作用 。SIRT1可减轻核因子κB                         1.3 实验动物
         （nuclear factor-κB，NF-κB）信号激活引发的神经元损伤                    SPF 级雄性 SD 大鼠，10 周龄，体重 339～351 g，购
          及神经炎症，减少帕金森病模型动物多巴胺能神经元死                            自武汉市万千佳兴生物科技有限公司，动物生产许可证
          亡 [4―5] 。由此本课题组推测，SIRT1/NF-κB信号通路可能
                                                              号为 SCXK（鄂）2021-0011。所有大鼠均饲养于温度
          是帕金森病治疗的潜在靶点。                                       22～24 ℃、相对湿度 50%～60%、光照周期 12 h 的环境
              七叶皂苷钠是一种脑血管扩张药，具有清除自由
                                                              中，自由取食和饮水。本研究经本院伦理委员会批准，
          基、消炎去肿、改善微循环、保护血管壁等药理作用，可
                                                              批准编号为儋医2022LS038。
          下调NF-κB蛋白及促炎因子的表达，减少脑缺血再灌注                          2 方法
                              [6]
          损伤大鼠的神经元凋亡 ；临床上，其可联合氯吡格雷治
                                                              2.1 造模、分组与给药
                                                [7]
          疗急性缺血性脑卒中以改善患者的神经功能 。基于现
                                                                              [8]
                                                                  参考文献方法 建立帕金森病大鼠模型：大鼠腹腔
          有证据，本课题组推测七叶皂苷钠可能通过调控SIRT1/
                                                              注射2%戊巴比妥钠溶液（2 mL/kg）麻醉后，固定于脑立
          NF-κB信号通路发挥神经保护作用，故本研究以帕金森
                                                              体定位仪上，剃毛消毒，暴露颅骨，并定位脑纹状体（前
          病大鼠为对象开展了相关实验，旨在为七叶皂苷钠的临
                                                              囟后 1 mm，中线左 3 mm，硬膜下 5 mm），用微量注射器
          床应用及帕金森病的药物治疗提供参考。
                                                              于脑纹状体内注入 1 μg/μL 的 6-羟基多巴胺溶液（用生
          1 材料
                                                              理盐水配制）8 μL，缝合。2 周后，腹腔注射 0.5 mg/mL
          1.1 主要仪器
                                                              的阿扑吗啡溶液（用生理盐水配制）5 mg/kg 诱导旋转，
              DW-2000D 型脑立体定位仪、NIB 400 型显微镜、
                                                              若大鼠30 min内转圈超过210次则判定为帕金森病模型
          DRW-200Bc型酶标仪、GelView 1500型凝胶成像系统均
                                                              建立成功。将建模成功的 48 只帕金森病大鼠按照随机
          购自济南庆元医疗器械有限公司。
                                                              数表法分为模型组，七叶皂苷钠低、高剂量组，七叶皂苷
          1.2 主要药品与试剂
                                                              钠+EX527组，每组12只。另取12只健康大鼠作为假手
              注射用七叶皂苷钠（批号20220117，规格5 mg）购自
          山东绿叶制药有限公司；EX527 原料药（SIRT1 抑制剂，                     术组（手术过程同模型大鼠，用微量注射器于脑纹状体
          纯度 99.85%），多巴胺（dopamine，DA）、白细胞介素 6                 内注入等体积生理盐水）。
         （interleukin-6，IL-6）、IL-18、IL-10 酶联免疫吸附测定                建模结束后，七叶皂苷钠低、高剂量组大鼠分别腹
         （ELISA）试剂盒和 BCA 试剂盒（批号分别为 KM29401、                   腔注射七叶皂苷钠1.8、3.6 mg/kg（将七叶皂苷钠用生理
          KM25041、KM12095、KM49530、KM30632、KM59200）            盐水溶解，分别得质量浓度为 0.18、0.36 mg/mL 的混悬
                                                                                   [9]
          均购自西安凯萌生物技术有限公司；6-羟基多巴胺对照                           液，注射体积为10 mL/kg ）；七叶皂苷钠+EX527组大鼠
          品（纯度≥98%）、阿扑吗啡原料药（纯度≥99.45%）、苏                      同时腹腔注射七叶皂苷钠 3.6 mg/kg 和 EX527 5 mg/kg
          木精-伊红（HE）染色试剂盒、SP 免疫组织化学试剂盒、                       （将EX527用生理盐水溶解，得质量浓度为0.5 mg/mL的
                                                                                               [10]
          蛋 白 裂 解 液 、ECL 试 剂（批 号 分 别 为 TM39171、               混悬液，两药的注射体积均为10 mL/kg ）；假手术组和
          TM20491、TM24905、TM25901、TM53950、TM43985）均           模型组大鼠腹腔注射生理盐水 10 mL/kg。各组大鼠每
          购自云南淘谜生物科技有限公司；兔源酪氨酸羟化酶                             天注射1次，持续21 d。


          · 690 ·    China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 6                               中国药房  2024年第35卷第6期
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