Page 52 - 《中国药房》2024年6期
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材指纹图谱共有峰中大部分的信息。旋转后的成分载                             2.4.1 色谱条件
          荷矩阵反映了各变量对主成分的贡献大小，结果显示，                                色谱条件同“2.2.1”项。
          2、3、6、8、9号峰对第1主成分的贡献较大，即绿原酸、咖                       2.4.2 混合对照品溶液的制备
          啡酸、异毛蕊花糖苷、槲皮素、芹菜素对第1主成分影响                               取绿原酸、咖啡酸、1，3-O-二咖啡酰基奎尼酸、芹菜
          较大；5、6、8 号峰对第 2 主成分的贡献较大，即金丝桃                       素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对照品各适量，按“2.2.3”项下
          苷、异毛蕊花糖苷、槲皮素对第 2 主成分影响较大；1、7                        方法制成质量浓度分别为 1.88、0.48、0.65、4.86 mg/mL
          号峰对第 3 主成分贡献较大，即原儿茶酸、芹菜素 7-O-                       的混合对照品溶液。
          β-D-吡喃葡萄糖苷对第3主成分影响较大。                               2.4.3 供试品溶液的制备
              将 9 个共有峰峰面积导入 SIMCA 14.0 软件进行主                      制备方法同“2.2.2”项。
          成分分析，得到得分散点图（图4），其集中程度与聚类分                          2.4.4 专属性试验
          析结果相符。                                                  取“2.4.2”“2.4.3”项下混合对照品溶液及供试品溶
                                                              液，按“2.4.1”项下色谱条件进样分析，记录色谱图（图
                   4
                   3
                   2                                          略）。结果显示，各成分色谱峰分离良好，提示该方法专
                   1                                          属性良好。
                 t[2]  －1 0
                  －2                                          2.4.5 线性关系考察
                  －3
                  －4                                              精密吸取“2.4.2”项下混合对照品溶液 0.1、0.2、0.3、
                  －5
                    －8       －6       －4      －2          0           2           4            6  0.4、0.5 mL，分别置于1 mL容量瓶中，用甲醇定容，摇匀
                                     t[1]
             图4 10批鼠曲草药材的主成分分析得分散点图                           制得系列混合溶液。按“2.4.1”项下色谱条件进样分析，
                                                              以各差异性成分进样质量浓度为横坐标（X，mg/mL），峰
          2.3.3 正交偏最小二乘-判别分析
                                                              面积为纵坐标（Y）进行线性回归，结果见表2。
              运用 SIMCA 14.0 软件对 10 批鼠曲草药材的 9 个共
                                                                   表2 4种差异性成分的线性关系考察结果
          有峰峰面积进行正交偏最小二乘-判别分析，得正交偏
                                                              成分                回归方程          R  2  线性范围/（mg/mL）
          最小二乘-判别分析模型（图5）。结果显示，模型拟合度                          绿原酸            Y＝1.674×10 X+6.485×10 4  0.999  0.188～0.940
                                                                                  6
                                    2
          R Y为0.751，模型预测能力Q 为0.624，二者均高于0.5，                  咖啡酸            Y＝4.746×10 X-3.005×10 4  0.999  0.048～0.240
            2
                                                                                  7
                                                                                  7
                                                              1，3-O-二咖啡酰基奎尼酸  Y＝3.632×10 X+1.183×10 5  0.999  0.065～0.325
          表明模型拟合较好、稳定可靠、预测能力强，可有效判别
                                                              芹菜素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 Y＝1.084×10 X+1.467×10 5  0.999  0.486～2.430
                                                                                  7
          分析 10 批鼠曲草药材的质量差异。变量重要性投影
                                                              2.4.6 精密度试验
         （variable importance projection，VIP）结果显示，9个化学
                                                                  取“2.4.3”项下供试品溶液（编号S1），按“2.4.1”项下
          成分影响程度由大到小依次为：芹菜素7-O-β-D-吡喃葡
                                                              色谱条件连续进样 6 次，记录各差异性成分的峰面积。
          萄糖苷＞1，3-O-二咖啡酰基奎尼酸＞绿原酸＞咖啡
                                                              结果显示，绿原酸、咖啡酸、1，3-O-二咖啡酰基奎尼酸、
          酸＞槲皮素＞异毛蕊花糖苷＞芹菜素＞金丝桃苷＞原
                                                              芹菜素 7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷峰面积的 RSD 分别为
          儿茶酸，其中芹菜素 7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（VIP＝
                                                              2.39%、2.91%、2.56%、1.31%（n＝6），表明方法精密度
          1.460 4）、1，3-O-二咖啡酰基奎尼酸（VIP＝1.247 6）、绿
                                                              良好。
          原酸（VIP＝1.114 3）、咖啡酸（VIP＝1.024 7）是影响鼠曲
                                                              2.4.7 稳定性试验
          草质量的差异性成分（VIP＞1），可作鼠曲草的潜在质量
                                                                  取“2.4.3”项下同一供试品溶液（编号S1），分别于室
          标志物。这提示应关注鼠曲草中上述成分含量，建立其
                                                              温下放置 0、2、4、8、12、24 h 时，按“2.4.1”项下色谱条
          质量控制体系，以提高产品质量的稳定性与一致性。
                                                              件进样分析，记录峰面积。结果显示，绿原酸、咖啡酸、
                   3 2                                        1，3-O-二咖啡酰基奎尼酸、芹菜素7-O-β-D-吡喃葡萄糖
                  1.035 12＊t[2]  －1 1 0                       苷峰面积的 RSD 分别为 2.97%、2.71%、2.89%、0.42%
                  －2
                  －3                                         （n＝6），表明该供试品溶液在室温下放置24 h内稳定性
                  －4                                          良好。
                    －8       －6       －4       －2            0            2              4              6
                                1.005 43＊t[1]                 2.4.8 重复性试验
          图5 10批鼠曲草药材的正交偏最小二乘-判别分析模型                              取同一批鼠曲草药材（编号 S1）6 份，按“2.4.3”项下
          2.4 4种潜在质量标志物的含量测定                                  方法制备供试品溶液，再按“2.4.1”项下色谱条件进样分
              采用HPLC法对“2.3.3”项下所得4种潜在质量标志                     析，记录峰面积并根据标准曲线计算含量。结果显示，
          物（绿原酸、咖啡酸、1，3-O-二咖啡酰基奎尼酸、芹菜素                        绿原酸、咖啡酸、1，3-O-二咖啡酰基奎尼酸、芹菜素7-O-
          7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷）的含量进行测定。                             β-D-吡喃葡萄糖苷含量的 RSD 分别为 2.95%、1.73%、


          · 686 ·    China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 6                               中国药房  2024年第35卷第6期
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