Page 50 - 《中国药房》2024年6期
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鼠曲草为菊科植物鼠曲草Gnaphalium affine D. Don ncbi.nlm.nih.gov/)数据库获取鼠曲草成分,并以口服药
的干燥全草,别名佛耳草、清明菜等,最早记载于《名医 物利用度(oral bioavailability,OB)≥30%、类药性(drug-
别录》,曾收载于1977年版《中国药典》,具有化痰止咳、 like properties,DL)≥0.18 为条件进行筛选 ,得到鼠曲
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祛风平喘的功效。作为药食两用资源,鼠曲草的民间食 草的活性成分。通过活性成分获取其对应的药物靶点。
用历史悠久,如川渝地区的“清明粑”,以及福建三明、永 将所得药物靶点输入到UniProtKB(https://www.uniprot.
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泰等地区的“鼠粬饼”。现代研究发现,鼠曲草主要成
org/)数据库中寻找其对应的基因简称,方便后续分析;
分为黄酮类、有机酸、挥发油等 ,具有较好的抗炎、抗氧
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在 OMIM(https://omim.org/)、GeneCards(https://www.
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化、抗痛风等作用 ,尤其对呼吸系统疾病,如慢性阻塞
genecards.org/)数据库中以“chronic obstructive pulmo‐
性 肺 疾 病(chronic obstructive pulmonary disease,
nary disease”为关键词进行检索,设置 relevance score≥
COPD),疗效显著 [4―5] 。
20,得到抗COPD的相应靶点。使用Venny 2.1.0找出药
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世界上鼠曲草属品种多样,其中我国有 19 种 ,已
物-疾病共同靶点。结果显示,鼠曲草的主要活性成分
有的研究主要集中在鼠曲草化学成分提取分析、药效活
性评价等方面 。然而上述研究均忽略了不同产地来源 有贝壳杉烯酸、2-(3S)-3-羟基-3-甲基戊-4-烯基、4-胆甾
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鼠曲草的质量差异,目前尚未见较为全面的基于中药质 烯-3-酮等(表 1);扣除重复靶点后得到共同靶点 91 个。
量标志物理念的鼠曲草质量标准。本研究运用网络药 已有研究表明,黄酮类及有机酸类成分可通过调节氧化
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理学方法,分析预测鼠曲草抗 COPD 的有效成分及靶 应激相关通路起到抗COPD的作用 ,因此,本课题组综
点;在此基础上采用高效液相色谱(HPLC)法以10批不 合现有文献及网络药理学结果以原儿茶酸、绿原酸、咖
同产地的鼠曲草为研究对象,建立 HPLC 指纹图谱,借 啡酸、1,3-O-二咖啡酰基奎尼酸、金丝桃苷、异毛蕊花糖
助化学模式识别分析探究鼠曲草的质量标志物并测定 苷、芹菜素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素、芹菜素为对
其含量,以期为全面进行鼠曲草质量评价和质量标志物 照,开展进一步研究。
的量化辨识提供参考。 表1 鼠曲草抗COPD的活性成分(OB值排名前10位)
1 材料 TCMSP ID信息 中文名称(英文名称) OB/% DL
1.1 主要仪器 MOL013110 贝壳杉烯酸(kaurenoic acid) 59.52 0.34
MOL013111 2-(3S)-3-羟基-3-甲基戊-4-烯基)(SBB005938) 49.48 0.21
e2695 型 HPLC 仪购自美国 Waters 公司;Mettler To‐
MOL013112 4-胆甾烯-3-酮(4-cholesten-3-one) 37.18 0.68
ledo XS105 型分析天平购自梅特勒托利多科技(中国) MOL002372 6Z,10E,14E,18E-2,6,10,15,19,23-六甲基二十四烷-2,6,10,14,18,22-六 33.55 0.42
有限公司;KQ-500DE 型数控超声波清洗器购自昆山舒 烯(6Z,10E,14E,18E-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,
18,22-hexaene)
美超声仪器有限公司。
MOL000358 β-谷甾醇(beta-sitosterol) 36.91 0.75
1.2 主要药品与试剂 MOL000359 谷甾醇(sitosterol) 36.91 0.75
原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、1,3-O-二咖啡酰基奎尼 MOL000422 山柰酚(kaempferol) 41.88 0.24
MOL000449 豆甾醇(stigmasterol) 43.83 0.76
酸、金丝桃苷、异毛蕊花糖苷、芹菜素7-O-β-D-吡喃葡萄
MOL000006 木犀草素(luteolin) 36.16 0.25
糖苷、槲皮素、芹菜素对照品(批号分别为W10B104178、 MOL000098 槲皮素(quercetin) 46.43 0.28
MUST-17030620、M27GB143417、M04HB177048、MUST- 2.2 鼠曲草HPLC指纹图谱的建立
11122003、W17J10C90785、O20GB164741、100081-200406、 2.2.1 色谱条件
111901-202004,纯度均不低于 98%)均购自上海源叶生
采 用 Diamonsil C18 色 谱 柱(250 mm×4.6 mm,5
物科技有限公司;10批不同产地鼠曲草药材经福建中医
μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸(B)为流动相进行梯度洗脱
药大学药学院刘小芬副教授鉴定均为菊科植物鼠曲草
(0~10 min,10%A→30%A;10~20 min,30%A→35%A;
G. affine D. Don 的干燥全草,产地包括广东潮汕、广西
20~28 min,35%A→45%A;28~35 min,45%A→70%A;
桂林、湖南衡阳、江西吉安、广东梅州、湖南邵阳、福建闽
35~40 min,70%A→10%A);流速为1.0 mL/min;检测波
侯、江西宜春、四川达州、福建三明(编号依次为 S1~
长为310 nm;柱温为30 ℃;进样量为10 μL。
S10);乙醇(分析纯)购自西陇科学股份有限公司;磷酸
(色谱纯)、乙腈(色谱纯)均购自上海麦克林生化科技股 2.2.2 供试品溶液的制备
份有限公司。 称取鼠曲草粉末 1.00 g,置于锥形瓶中,精密加入
2 方法与结果 50% 乙醇 40 mL,超声(功率 400 W)提取 2 次,每次 30
2.1 鼠曲草抗COPD的有效成分及靶点预测 min,过滤,滤液蒸干后置于 10 mL 容量瓶中,加 50% 甲
检索 TCMSP(https://old.tcmsp-e.com/tcmsp.php)、 醇定容,摇匀,提取液通过 0.22 μm 微孔滤膜,即得供试
CNKI(https://www.cnki.net/)、PubMed(https://pubmed. 品溶液。
· 684 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 6 中国药房 2024年第35卷第6期