Page 50 - 《中国药房》2024年6期
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鼠曲草为菊科植物鼠曲草Gnaphalium affine D. Don             ncbi.nlm.nih.gov/)数据库获取鼠曲草成分,并以口服药
          的干燥全草,别名佛耳草、清明菜等,最早记载于《名医                           物利用度(oral bioavailability,OB)≥30%、类药性(drug-
          别录》,曾收载于1977年版《中国药典》,具有化痰止咳、                        like properties,DL)≥0.18 为条件进行筛选 ,得到鼠曲
                                                                                                   [8]
          祛风平喘的功效。作为药食两用资源,鼠曲草的民间食                            草的活性成分。通过活性成分获取其对应的药物靶点。
          用历史悠久,如川渝地区的“清明粑”,以及福建三明、永                          将所得药物靶点输入到UniProtKB(https://www.uniprot.
                             [1]
          泰等地区的“鼠粬饼”。现代研究发现,鼠曲草主要成
                                                              org/)数据库中寻找其对应的基因简称,方便后续分析;
          分为黄酮类、有机酸、挥发油等 ,具有较好的抗炎、抗氧
                                    [2]
                                                              在 OMIM(https://omim.org/)、GeneCards(https://www.
                          [3]
          化、抗痛风等作用 ,尤其对呼吸系统疾病,如慢性阻塞
                                                              genecards.org/)数据库中以“chronic obstructive pulmo‐
          性 肺 疾 病(chronic  obstructive  pulmonary  disease,
                                                              nary disease”为关键词进行检索,设置 relevance score≥
          COPD),疗效显著     [4―5] 。
                                                              20,得到抗COPD的相应靶点。使用Venny 2.1.0找出药
                                                     [6]
              世界上鼠曲草属品种多样,其中我国有 19 种 ,已
                                                              物-疾病共同靶点。结果显示,鼠曲草的主要活性成分
          有的研究主要集中在鼠曲草化学成分提取分析、药效活
          性评价等方面 。然而上述研究均忽略了不同产地来源                            有贝壳杉烯酸、2-(3S)-3-羟基-3-甲基戊-4-烯基、4-胆甾
                      [7]
          鼠曲草的质量差异,目前尚未见较为全面的基于中药质                            烯-3-酮等(表 1);扣除重复靶点后得到共同靶点 91 个。
          量标志物理念的鼠曲草质量标准。本研究运用网络药                             已有研究表明,黄酮类及有机酸类成分可通过调节氧化
                                                                                            [9]
          理学方法,分析预测鼠曲草抗 COPD 的有效成分及靶                          应激相关通路起到抗COPD的作用 ,因此,本课题组综
          点;在此基础上采用高效液相色谱(HPLC)法以10批不                         合现有文献及网络药理学结果以原儿茶酸、绿原酸、咖
          同产地的鼠曲草为研究对象,建立 HPLC 指纹图谱,借                         啡酸、1,3-O-二咖啡酰基奎尼酸、金丝桃苷、异毛蕊花糖
          助化学模式识别分析探究鼠曲草的质量标志物并测定                             苷、芹菜素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素、芹菜素为对
          其含量,以期为全面进行鼠曲草质量评价和质量标志物                            照,开展进一步研究。
          的量化辨识提供参考。                                          表1 鼠曲草抗COPD的活性成分(OB值排名前10位)
          1 材料                                                TCMSP ID信息 中文名称(英文名称)                    OB/% DL
          1.1 主要仪器                                            MOL013110  贝壳杉烯酸(kaurenoic acid)         59.52 0.34
                                                              MOL013111  2-(3S)-3-羟基-3-甲基戊-4-烯基)(SBB005938)  49.48 0.21
              e2695 型 HPLC 仪购自美国 Waters 公司;Mettler To‐
                                                              MOL013112  4-胆甾烯-3-酮(4-cholesten-3-one)  37.18 0.68
          ledo XS105 型分析天平购自梅特勒托利多科技(中国)                      MOL002372  6Z,10E,14E,18E-2,6,10,15,19,23-六甲基二十四烷-2,6,10,14,18,22-六 33.55 0.42
          有限公司;KQ-500DE 型数控超声波清洗器购自昆山舒                                烯(6Z,10E,14E,18E-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,
                                                                      18,22-hexaene)
          美超声仪器有限公司。
                                                              MOL000358  β-谷甾醇(beta-sitosterol)        36.91 0.75
          1.2 主要药品与试剂                                         MOL000359  谷甾醇(sitosterol)               36.91 0.75
              原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、1,3-O-二咖啡酰基奎尼                      MOL000422  山柰酚(kaempferol)               41.88 0.24
                                                              MOL000449  豆甾醇(stigmasterol)             43.83 0.76
          酸、金丝桃苷、异毛蕊花糖苷、芹菜素7-O-β-D-吡喃葡萄
                                                              MOL000006  木犀草素(luteolin)                36.16 0.25
          糖苷、槲皮素、芹菜素对照品(批号分别为W10B104178、                      MOL000098  槲皮素(quercetin)                46.43 0.28
          MUST-17030620、M27GB143417、M04HB177048、MUST-         2.2 鼠曲草HPLC指纹图谱的建立
          11122003、W17J10C90785、O20GB164741、100081-200406、    2.2.1 色谱条件
          111901-202004,纯度均不低于 98%)均购自上海源叶生
                                                                  采 用 Diamonsil  C18 色 谱 柱(250  mm×4.6  mm,5
          物科技有限公司;10批不同产地鼠曲草药材经福建中医
                                                              μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸(B)为流动相进行梯度洗脱
          药大学药学院刘小芬副教授鉴定均为菊科植物鼠曲草
                                                             (0~10 min,10%A→30%A;10~20 min,30%A→35%A;
          G. affine D. Don 的干燥全草,产地包括广东潮汕、广西
                                                              20~28 min,35%A→45%A;28~35 min,45%A→70%A;
          桂林、湖南衡阳、江西吉安、广东梅州、湖南邵阳、福建闽
                                                              35~40 min,70%A→10%A);流速为1.0 mL/min;检测波
          侯、江西宜春、四川达州、福建三明(编号依次为 S1~
                                                              长为310 nm;柱温为30 ℃;进样量为10 μL。
          S10);乙醇(分析纯)购自西陇科学股份有限公司;磷酸
         (色谱纯)、乙腈(色谱纯)均购自上海麦克林生化科技股                           2.2.2 供试品溶液的制备
          份有限公司。                                                  称取鼠曲草粉末 1.00 g,置于锥形瓶中,精密加入
          2 方法与结果                                             50% 乙醇 40 mL,超声(功率 400 W)提取 2 次,每次 30
          2.1 鼠曲草抗COPD的有效成分及靶点预测                              min,过滤,滤液蒸干后置于 10 mL 容量瓶中,加 50% 甲
              检索 TCMSP(https://old.tcmsp-e.com/tcmsp.php)、    醇定容,摇匀,提取液通过 0.22 μm 微孔滤膜,即得供试
          CNKI(https://www.cnki.net/)、PubMed(https://pubmed.  品溶液。


          · 684 ·    China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 6                               中国药房  2024年第35卷第6期
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