Page 21 - 《中国药房》2024年4期
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表3 山茱萸新苷对 DN 模型小鼠肾皮质中 RAGE、 原沉积，抑制足细胞凋亡 ；同时，本课题组前期也初步
COL-Ⅳ、iNOS蛋白表达的影响（x±s，n＝6） 证实了另一山茱萸环烯醚萜苷类成分山茱萸新苷对
免疫组化实验 Western blot实验
组别 AGEs 的抑制作用。氨基胍是一种非酶糖基化 AGEs 抑
（RAGE） RAGE COL-Ⅳ iNOS
正常组 3.176±0.571 0.172±0.034 0.223±0.010 0.169±0.050 制剂，可通过阻碍AGEs的形成来延缓DN进展，可改善
模型组 10.029±1.813 a 0.457±0.057 a 0.676±0.151 a 0.556±0.106 a DN 模型大鼠肾脏炎症反应和纤维化水平 ，故本研究
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氨基胍组 5.663±0.680 b 0.272±0.047 b 0.386±0.160 b 0.371±0.020 c
山茱萸新苷组 5.380±0.517 b 0.262±0.068 b 0.306±0.139 b 0.344±0.012 c 将其作为阳性对照药物。基于对DN发病机制和山茱萸
a：与正常组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与模型组 新苷抗炎特性的认识，本研究以C57BL/6J小鼠为对照，
比较，P＜0.01。 以 KK-Ay 小鼠（C57BL/6J 小鼠与 KK 轻度肥胖型 2 型糖
3.6 山茱萸新苷对 DN 模型小鼠肾皮质中 RAGE、 尿病小鼠杂交并近亲繁殖所得）构建DN小鼠模型，评价
COL-Ⅳ、iNOS蛋白表达的影响 该成分对小鼠的保护作用。结果显示，山茱萸新苷可下
与正常组比较，模型组小鼠肾皮质中 RAGE、COL- 调模型小鼠体内促炎因子IL-12的分泌和iNOS的表达，
Ⅳ、iNOS 蛋白的表达量均显著升高（P＜0.01）。与模型 上调抗炎因子IL-10的分泌，减轻其肾脏炎症反应；除发
组比较，各药物组小鼠肾皮质中 RAGE、COL-Ⅳ、iNOS 挥抗炎作用外，山茱萸新苷还可显著减少模型小鼠的尿
蛋白的表达量均显著降低（P＜0.05 或 P＜0.01）。结果 蛋白水平和 COL-Ⅳ在肾皮质中的沉积，下调 Scr、BUN
见图5、表3。 水平，缓解肾纤维化，减轻肾病理损伤。
RAGE 46 kDa AGEs/RAGE 信号通路在 DN 的发病机制中具有核
心作用 。其中，RAGE蛋白参与多条通路（磷脂酰肌醇
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COL-Ⅳ 324 kDa
3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素、丝裂原激活蛋白
iNOS 131 kDa
激酶/细胞外信号调节激酶等通路）的信号转导，可通过
β-actin 43 kDa 刺激各种信号级联而促进促炎因子的产生，继而造成肾
正常组 模型组 氨基胍组 山茱萸新苷组
小球肥大、系膜基质积聚、足细胞丢失和蛋白尿发生，促
图5 山茱萸新苷对 DN 模型小鼠肾皮质中 RAGE、
进肾脏炎症和纤维化的发生发展，导致肾结构扭曲，最
COL-Ⅳ、iNOS蛋白表达影响的电泳图
终导致肾功能丧失 。为了进一步探讨山茱萸新苷能
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4 讨论
否通过影响AGEs/RAGE信号通路干预DN，本研究检测
随着生活水平的提高和饮食结构的改变，DN 的发
了DN模型小鼠肾皮质中RAGE蛋白的表达情况。结果
病率逐年增高。DN的典型病理特征是蛋白尿，其发生、
显示，山茱萸新苷可下调 DN 模型小鼠肾皮质中 RAGE
发展与肾小球滤过屏障的结构完整性和肾功能的改变
蛋白的表达，初步验证其对 DN 模型小鼠的保护作用可
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密切相关 。COL-Ⅳ是一种主要分布在基底膜区域内
能是通过抑制AGEs/RAGE信号通路激活实现的。
的胶原蛋白，其在肾小球和系膜沉积中表达增加所导致
综上所述，山茱萸新苷对 DN 模型小鼠具有一定的
的细胞外基质（extracellular matrix，ECM）堆积可能与肾
保护作用，可抑制其体内炎症反应，降低小鼠尿蛋白水
损伤程度呈正相关 [14―15] 。长期高血糖环境会引起肾小
平，缓解肾脏纤维化；上述作用可能与抑制AGEs/RAGE
管细胞、肾小球内皮细胞等发生炎症反应，其表现包括
信号通路有关。
分泌单核细胞趋化蛋白1（monocyte chemotactic protein-1，
参考文献
MCP-1），激活、促进巨噬细胞向肾脏募集，分泌 IL-12、
[ 1 ] KIM Y K，NING X Y，MUNIR K M，et al. Emerging
TNF-α、iNOS 等炎症因子，最终诱发 DN 炎症损伤；同
drugs for the treatment of diabetic nephropathy[J]. Expert
时，肾功能受损与炎症反应共同作用，进一步加速了DN
Opin Emerg Drugs，2022，27（4）：417-430.
的进展 [16―17] 。
[ 2 ] LOPEZ-VARGAS P A，TONG A，HOWELL M，et al.
中医药在DN的治疗中具有悠久的历史和显著的疗
Educational interventions for patients with CKD：a sys‐
效，以滋阴清热、补肾健脾、益气养阴为主要治则。山茱 tematic review[J]. Am J Kidney Dis，2016，68（3）：
萸味酸涩、性微温，具有平补肾阴阳、涩精固脱的功效， 353-370.
在《金匮要略》“肾气丸”、《医学衷中参西录》“滋膵饮”等 [ 3 ] XIONG Y B，ZHOU L L. The signaling of cellular sene-
方中均有使用，可主治“消渴证”。本课题组前期研究发 scence in diabetic nephropathy[J]. Oxid Med Cell Lon‐
现，山茱萸环烯醚萜苷类成分马钱苷可通过抑制AGEs/ gev，2019，2019：7495629.
RAGE信号通路来保护肾功能，并可减少ECM堆积和糖 [ 4 ] HU Q C，QU C Y，XIAO X L，et al. Flavonoids on dia‐
中国药房 2024年第35卷第4期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 4 · 399 ·
