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ALT,  AST,  TNF-α,  IL-6  and  IL-1β  were  0.602-0.757,  0.585-0.833,  0.593-0.795,  0.618-0.820,  0.607-0.804,  respectively;  the
          peaks  with  high  correlation  were  peaks  11,  9  and  8  in  order.  CONCLUSIONS  Ten  batches  of  total  saponins  from  M.  pubescens
          have  similar  components,  and  the  average  contents  of  mussaendoside  H,  mussaendoside  U,  mussaglaoside  C,  mussaendoside  G
          and  mussaendoside  O  are  different.  The  batches  of  samples  have  a  certain  degree  of  hepatoprotective  effect;  mussaendoside  O,
          mussaendoside G and mussaglaoside C may be its main active components.
          KEYWORDS     Mussaenda  pubescens;  total  saponins;  fingerprint;  content  determination;  hepatoprotective  activity;  spectrum-
          effect relationship



              玉叶金花是广西特色瑶药,为茜草科植物玉叶金花                          1.2 主要药品与试剂
          Mussaenda pubescens Ait. f. 的干燥茎和根,具有清热解                mussaendoside  H、mussaendoside  U、mussaglaoside
          毒、利湿消肿、化痰止咳、凉血解暑、生津、拔异物的功                           C、mussaendoside G、mussaendoside O 对照品(纯度均大
          效,主要用于治疗胃肠感冒、气管炎、肝炎、小儿疳积、肾                          于 95.0%)均由本实验室自制;D101 型大孔树脂购自上
          炎水肿、咽喉肿痛等症 。由于该药具有较好的清热解                            海麦克林生化科技有限公司;联苯双酯滴丸(批号
                              [1]
          毒作用,被广泛应用于中成药制剂(如玉叶解毒颗粒、玉                           19J200607,规格1.5 mg)购自万邦德制药集团有限公司;
                         [2]
          叶清火片等)领域 。现代研究表明,玉叶金花主要含有                           丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)试剂盒、
                                                              天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)试剂
          三萜及其皂苷、单萜、环烯醚萜、有机酚酸等成分,以及
                                                              盒均购自南京建成生物工程研究所;小鼠肿瘤坏死因子
                              [3]
          钙、镁、铁等微量元素 。其中,mussaendoside G、mus‐
                                                              α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素 6(inter‐
          saendoside U 可调节机体促炎因子的分泌,具有一定的
                                                              leukin-6,IL-6)、IL-1β 酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂
                       [4]
          体外抗炎活性 ;mussaendoside O 为 M 胆碱受体拮抗
                                                              盒均购自凡科维(上海)科技有限公司;乙腈为色谱纯,
          剂,可减弱核因子κB受体激活蛋白配体(receptor activa‐
                                                              乙醇为分析纯,水为超纯水。
          tor of NF-κB ligand,RANKL)诱导的破骨细胞生成,抑
                                                                  10 批玉叶金花药材(编号 S1~S10)采自广西不同
                               [5]
          制脂多糖诱导的骨丢失 ,可显著抑制加兰他敏引起的
                                                              地区,经广西壮族自治区中医药研究院黄云峰副研究员
                                                        [6]
          泪腺、唾液腺分泌和卡巴胆碱诱导的豚鼠回肠肌收缩 ;
                                                              鉴定为玉叶金花 M. pubescens Ait. f. 的干燥茎和根。10
          mussaendoside U能抑制M胆碱能神经兴奋,可降低回肠
                                                              批玉叶金花药材的来源信息见表1。
          平滑肌收缩力,抑制唾液腺分泌 。研究指出,玉叶金花                                   表1 10批玉叶金花药材的来源信息
                                     [7]
          总皂苷具有肝保护作用,但具体药效成分尚不清楚 。                            编号    采集地区      采收时间    编号     采集地区      采收时间
                                                        [8]
          此外,现有研究对玉叶金花的质量控制多限于化学分                             S1   玉林市博白县     2021年7月  S6   柳州市黄冕镇     2021年8月
                                                              S2   钦州市贵台镇     2021年7月  S7   来宾市金秀县     2021年8月
          析,与药效结合的整体性探索有限               [4,9] 。鉴于此,本研究        S3   桂林市临桂区     2021年7月  S8   防城港市       2021年9月
          拟采用高效液相色谱(HPLC)法,建立不同产地玉叶金                          S4   来宾市忻城县     2021年8月  S9   柳州市洛满镇     2021年9月
                                                              S5   桂林市荔浦市     2021年8月  S10  河池市凤山县    2021年11月
          花总皂苷的指纹图谱并测定其中 5 种三萜皂苷类成分
                                                              1.3 实验动物
         (mussaendoside  H、mussaendoside  U、mussaglaoside  C、
                                                                  SPF级雄性昆明小鼠,体重18~20 g,购自长沙市天
          mussaendoside G、mussaendoside O)的含量;拟采用四氯
                                                              勤生物技术有限公司,生产许可证号为SCXK(湘)2019-
          化碳(CCl4 )致小鼠肝损伤模型评价总皂苷的肝保护作
                                                              0014。本研究动物实验方案已通过广西壮族自治区中
          用,并结合灰色关联度分析法进行谱效关系研究,以期
                                                              医药研究院实验动物伦理委员会审核,审查受理号为
          为更好地开发利用玉叶金花资源提供参考。
                                                              2023030101。
          1 材料
                                                              2 方法与结果
          1.1 主要仪器
                                                              2.1 玉叶金花总皂苷的制备
              本研究所用主要仪器包括 Agilent 1260 型 HPLC 仪                   取 10 批玉叶金花药材各 100 g,粉碎,置圆底烧瓶
         (美国Agilent公司)、Multiskan GO型全波长全自动多功                  中,以75%乙醇加热回流提取2 h×2次,合并提取液,回
          能酶标仪(美国 Thermo Fisher Scientific 公司)、DHG 型          收溶剂得浸膏,加水分散至 30 mL;取上述分散物,经
          干燥箱(余姚市金电仪表有限公司)、XS-205型电子天平                        D101 型大孔树脂柱,依次用水、40% 乙醇、95% 乙醇洗
         (瑞士Mettler Toledo公司)、Milli-Q型超纯水系统(美国                脱,收集95%乙醇洗脱部分,回收溶剂,即得玉叶金花总
          Millipore公司)等。                                      皂苷(每克总皂苷相当于生药320~385 g)。


          · 2716 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 22                            中国药房  2023年第34卷第22期
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