Page 84 - 《中国药房》2023年17期
P. 84

biosynthesis， sphingomyelin metabolism， pyruvate metabolism， etc.）. CONCLUSIONS Kuaisong yin can play a role in improving
          constipation  by  regulating  different  metabolites  such  as  hemolytic  phosphatidylcholine，  phosphatidylcholine，  prostaglandin  A2，  L-
          valine， proline， and regulating metabolic pathways such as multiple amino acid metabolism， sphingomyelin metabolism， etc.
          KEYWORDS     Kuaisong yin； constipation； pharmacodynamics； metabolomics； slow transit constipation



              便秘是一种影响患者健康和生活质量的常见慢性                           1.3 实验动物
          疾病，在人群中的发病率为 2%～28%。随着年龄的增                              本研究所用动物有 SPF 级 ICR 雄性小鼠 120 只（体
          长，便秘的患病率明显升高，老年人群中有 15%～20%                         重 20～24 g）和 SPF 级 SD 雄性大鼠 39 只（体重 180～
          为便秘患者，其中女性要多于男性               [1―2] 。长期的便秘不         200 g），均由南通大学实验动物中心提供，动物生产许可
          仅会造成患者生活质量下降，同时还会危害患者的身体                            证 号 为 SCXK（苏）2019-0001。 动 物 均 于 温 度（22±
          健康，如诱发心脑血管疾病、引起胃肠功能紊乱、引起或                           4） ℃、相对湿度（55±15）%的条件下饲养。本动物实验
          加重直肠肛门疾病或结肠癌等              [3―4] 。化学药物针对便秘          经南京中医药大学附属医院实验动物伦理委员会批准
          的治疗虽然可以有效缓解症状，但是从长期来看会引起                            后实施（批件号为2021DW-13-01）。
          很多副作用，产生药物依赖。而中医药治疗便秘已有上                            2 方法
          千年历史，近年来中医药治疗慢性功能性便秘的报道逐                            2.1 小鼠药效实验
          渐增多。循证医学研究证实，中医药在治疗功能性便秘                            2.1.1 小鼠肠推进实验
          方面安全、有效，能改善功能性便秘患者的临床症状，在                               将 60 只小鼠随机分为空白组，模型组，阳性对照组
                                          [5]
          总体疗效方面较化学药具有明显优势 。                                 （麻仁软胶囊 0.64 g/kg，相当于 10.6 倍临床等效剂量），
              快松饮（原麻仁通颗粒）由火麻仁、郁李仁、莱菔子、                        快松饮低、中、高剂量组（3.2、6.4、12.8 g/kg，分别为 2.7、
          黑芝麻4味中药组方而成，是江苏省中医院全国名中医                            5.3、10.6 倍临床等效剂量），每组 10 只。空白组和模型
                                                              组小鼠灌胃等体积水，各给药组小鼠灌胃相应药物（均
          刘沈林教授在从医 40 余年的经验中总结而得的用于治
                                                              以蒸馏水为溶剂配制药液）；每天给药 1 次，连续 14 d。
          疗便秘的经验方。该方临床疗效确切，但成分与作用机
                                                              实验期间小鼠自由饮食、摄水，每周记录其体重。第 14
          制尚不清楚。代谢组学可以通过定性、定量方法分析生
                                                              天灌胃结束后，各组小鼠禁食不禁水 24 h。在第 15 天，
          物体受外界刺激或扰动后体内所有代谢物的变化 ，这
                                                     [6]
                                                              以墨汁为溶剂配制各组药液，空白组小鼠灌胃等体积
          与中医药治疗疾病的“整体观”相符。本研究拟采用慢
                                                              水，其余各组小鼠均先灌胃复方地芬诺酯片（4 mg/kg，以
          传输型便秘（slow transit constipation，STC）动物模型来
                                                              水为溶剂） ，建立 STC 小鼠模型。30 min 后，各给药组
                                                                       [7]
          研究快松饮改善便秘的效果，然后利用超高效液相色
                                                              小鼠再次灌胃相应药物（以墨汁为溶剂），模型组和空白
          谱-飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS/MS）技术对大鼠血
                                                              组小鼠灌胃等体积墨汁。25 min 后立即脱颈椎处死小
          清、尿液进行代谢组学分析，探讨快松饮改善便秘的作
                                                              鼠，打开腹腔分离肠系膜，剪取上端自幽门下端至回盲
          用机制，为其后续研究提供科学的实验依据。
                                                              部的肠管，置于托盘上，轻轻将小肠拉成直线，测量肠管
          1 材料
                                                              长度并记为小肠总长度；从幽门至墨汁前沿的距离为墨
          1.1 主要仪器
                                                              汁推进长度。计算墨汁推进率：墨汁推进率（%）＝墨汁
              本研究所用主要仪器有：ExionLC 型 UPLC 仪、Q-                  推进长度（cm）/小肠总长度（cm）×100%。
          Tof 5600+型高分辨质谱仪（美国 AB SCIEX 公司），
                                                              2.1.2 小鼠排便实验
          Heraeus Megafuge 8R 型高速冷冻离心机（美国 Thermo                  另取 60 只小鼠按“2.1.1”项下方法分组、造模、给药
          Fisher Scientific 公司），CPA225D 型电子天平（德国 Sar‐         和灌胃墨汁。每只小鼠单独放在笼内饲养，笼底放置 1
          torius公司）等。                                         张白纸。从灌胃墨汁时开始计时，记录每只小鼠首次排便
          1.2 主要药品与试剂                                         时间，并记录和观察小鼠5 h内的粪便质量和粪便数量。
              本研究所用的主要药品与试剂有：快松饮（江阴天                          2.2 大鼠代谢组学研究
          江药业有限公司，批号20210321，规格6 g/包），麻仁软胶                    2.2.1 分组、造模与给药
          囊（佛山手心制药有限公司，批号2101524，规格0.6 g/粒），                      将 39 只大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组
          复 方 地 芬 诺 酯 片（常 州 康 普 药 业 有 限 公 司 ，批 号             （麻仁软胶囊 0.36 g/kg，相当于 6 倍临床等效剂量）和快
          2005020，规格为每克含盐酸地芬诺酯2.5 mg、硫酸阿托                     松饮低、高剂量组（快松饮2.4、4.8 g/kg，分别为3、6倍临
          品0.025 mg）；乙腈、甲醇均为质谱级，甲酸为分析级，水                      床等效剂量）。空白组大鼠为7只，其余各组大鼠均为8
          为屈臣氏蒸馏水。                                            只。适应性喂养3 d后，空白组大鼠灌胃水，其余各组大


          · 2122 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 17                            中国药房  2023年第34卷第17期
   79   80   81   82   83   84   85   86   87   88   89