Page 70 - 《中国药房》2023年16期
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癫痫是神经系统常见疾病之一，影响着全球各年龄                          液相色谱仪（日本 Shimadzu 公司）、MS105DU 型半微量
                           [1]
          阶段约5 000万人群 。目前，癫痫的临床治疗包括药物                         分析天平（瑞士Mettler Toledo公司）、Purelab Felx 3型超
          治疗、手术治疗、物理治疗、心理治疗及基因治疗等。其                           纯水机（英国Elga公司）等。
          中，药物治疗是临床癫痫治疗的首选，但仍约有1/3的患                          1.2 主要药品与试剂

                               [2]
          者癫痫发作时难以控制 ，因此寻找新的抗癫痫药备受                                拉考沙胺片（国药准字 H20223128，批号 23030010，
          学者关注。第三代抗癫痫药主要为 2008 年及以后获批                         规格50 mg）由山东百诺医药股份有限公司生产；吡仑帕
          上市的癫痫治疗药物，包括拉考沙胺、吡仑帕奈、卢非酰                           奈片（国药准字HJ20210062，批号220185，规格2 mg）由
          胺、瑞替加滨、醋酸艾司利卡西平、布瓦西坦等，其中拉                           日本Eisai Co.，Ltd.生产；拉考沙胺对照品（批号171323-
          考沙胺、吡仑帕奈和卢非酰胺具有新的作用机制，如吡                            202101，纯度 99.7%）购自中国食品药品检定研究院；吡
                                                              仑帕奈对照品（批号 C12625539，纯度 98%）购自上海麦
          仑帕奈对α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异 恶唑丙酸受体具有
                                                              克林生化科技有限公司；氯氮平对照品（内标，批号
          独特的作用模式，拉考沙胺可通过选择性地增强电压门
                                                              A1805046，纯度96%）购自上海阿拉丁试剂有限公司；甲
                                     [3]
          控钠通道的慢失活来发挥作用 。目前，在我国获批上
                                                              酸铵、甲醇、乙腈均为色谱纯，水为超纯水。
          市的仅有拉考沙胺和吡仑帕奈。
                                                              1.3 空白血浆
              拉考沙胺于 2008 年获美国 FDA 批准上市，现被美
                                                                  健康受试者空白血浆由我院Ⅰ期临床试验研究中
          国FDA和欧盟药品管理局（European Medicines Agency，
                                                              心提供。
          EMA）批准用于 1 个月以上患者的部分性癫痫发作和 4
                                                              2 方法和结果
          岁及以上患者的全面性强直-阵挛性癫痫发作的辅助治
                                                              2.1 色谱条件
          疗；该药于 2018 年 11 月在我国上市 ，现被国家药品监
                                         [4]
                                                                  以 Welch  Ultimate  XB-C18（50  mm×2.1  mm，5.0
          督 管 理 局（National  Medical  Products  Administration，
                                                              μm）为色谱柱，以10 mmol/L甲酸铵溶液为流动相A、甲
          NMPA）批准用于 4 岁及以上癫痫患者部分性发作的联
                                                              醇-乙腈-异丙醇（0.2%甲酸）混合溶液（7∶1.5∶1.5，V/V/V）
          合治疗。吡仑帕奈于 2012 年在美国上市，现被美国                          为流动相 B 进行梯度洗脱（0～0.2 min，20%B；0.2～1.3
          FDA批准用于治疗4岁及以上患者的部分性癫痫发作；                           min，20%B→88%B；1.3～1.8 min，88%B→98%B；1.8～2.4
                                     [5]
          该药于 2021 年 9 月在我国上市 ，现被 NMPA 批准用于                   min，98%B；2.4～2.5  min，98%B→20%B；2.5～3.5  min，
          成人、青少年和4岁及以上儿童的部分性癫痫发作。                             20%B）；流速为0.4 mL/min；柱温为40 ℃；自动进样器温
              研究指出，不同抗癫痫药的药动学特征各有不同，                          度为4 ℃；进样量为5 μL。
          且即使相同剂量的同种抗癫痫药在不同患者体内的血                             2.2 质谱条件
          浆浓度也存在较大差异，因此治疗药物监测（therapeutic                         采 用 电 喷 雾 离 子 源 以 多 反 应 监 测 模 式（multi-
          drug monitoring，TDM）在癫痫个体化治疗中具有重要意                  reaction monitoring，MRM）进行正离子扫描；离子源电
          义 。液相色谱-串联质谱（liquid chromatography-tandem           压为 4.5 kV，离子源温度为 500 ℃；雾化气压力为 276
            [6]
          mass spectrometry，LC-MS/MS）技术结合了液相色谱良               kPa，辅助气压力为 276 kPa，气帘气压力为 69 kPa，碰撞
          好的分离性能和串联质谱高灵敏、高特异性的检测优                             气 压 力 为 41  kPa。 各 待 测 成 分 和 内 标 的 质 谱 参 数
          势，已成为生物样本分析实验室的标准配置。考虑到目                            见表1。
          前关于拉考沙胺、吡仑帕奈等第三代抗癫痫药的 TDM                                   表1 各待测成分和内标的质谱参数
          临床证据和有效浓度范围研究相对不足，同时结合医                             待测成分/内标  母离子m/z  子离子m/z  入口电压/V 出口电压/V 去簇电压/V 碰撞电压/V
                                                              拉考沙胺      251.2  144.1  10    10     60    13
          疗机构临床研究和个体化治疗的需要，本研究拟开发
                                                              吡仑帕奈      350.2  219.2  10    10     75    46
          同时测定拉考沙胺和吡仑帕奈血浆药物浓度的 LC-                            内标        327.2  270.0  10     8     100   55
          MS/MS法，并应用于临床样本检测，旨在为个体化用药
                                                              2.3 标准溶液、质控溶液和内标溶液的配制
          提供参考。                                                   分别精密称取拉考沙胺、吡仑帕奈对照品 12.7、
          1 材料                                                13.3 mg，用甲醇溶解并定容于 10 mL 容量瓶中，得质量

          1.1 主要仪器                                            浓度分别为 1.27、1.33 mg/mL 的单一对照品储备液，
              本研究所用的主要仪器有 Qtrap 5500 型质谱仪（上                   于－80 ℃下保存。取上述单一储备液适量，混合，用甲
          海爱博才思分析仪器贸易有限公司）、LC-20AD 型高效                        醇稀释，得拉考沙胺质量浓度依次为50、40、25、12.5、5、


          · 1980 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 16                            中国药房  2023年第34卷第16期
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