Page 51 - 《中国药房》2023年16期
P. 51

凋亡              DAPI           叠加
                                                                 EPO                                   21 kDa

          Ⅰ
                                                                EPOR                                   55 kDa
                      100 μm          100 μm         100 μm
                                                                 JAK2                                  130 kDa
          Ⅱ
                                                               p-STAT3                                 88 kDa
                      100 μm          100 μm         100 μm
                                                                STAT3                                  88 kDa
          Ⅲ
                                                                β-actin                                43 kDa
                      100 μm          100 μm         100 μm
                                                                       Ⅰ     Ⅱ      Ⅲ      Ⅳ      Ⅴ
                                                                 Ⅰ:假手术组;Ⅱ:模型组;Ⅲ:阳性对照组;Ⅳ:贯叶金丝桃高剂
                                                             量组;Ⅴ:贯叶金丝桃低剂量组。
          Ⅳ
                      100 μm          100 μm         100 μm
                                                             图6 各组大鼠脑组织中EPO、EPOR、JAK2、p-STAT3、
                                                                  STAT3蛋白表达的电泳图
          Ⅴ
                                                             表4 各组大鼠脑组织中EPO、EPOR、JAK2、p-STAT3、
                      100 μm          100 μm         100 μm
                                                                  STAT3蛋白表达水平比较(x±s,n=5)
             Ⅰ:假手术组;Ⅱ:模型组;Ⅲ:阳性对照组;Ⅳ:贯叶金丝桃高剂量
                                                              组别        EPO/β-actin  EPOR/β-actin  JAK2/β-actin p-STAT3/β-actin STAT3/β-actin
         组;Ⅴ:贯叶金丝桃低剂量组。
                                                              假手术组        1       1      1       1       1
         图4 各组大鼠脑皮层组织中神经细胞凋亡的荧光显微                             模型组       0.20±0.02 a  0.30±0.07 a  11.70±0.78 a  13.93±0.52 a  8.77±0.45 a
               图(TUNEL染色)                                     阳性对照组     0.54±0.05 b  0.92±0.13 b  3.40±0.21 b  6.63±0.46  b  8.41±0.17
                                                              贯叶金丝桃高剂量组 0.92±0.11 b  0.75±0.10 b  3.66±0.06 b  1.97±0.44 b  6.65±0.11 b
                 凋亡              DAPI           叠加            贯叶金丝桃低剂量组 0.42±0.08 b  0.73±0.07 b  4.47±0.09 b  2.56±0.66 b  7.21±0.45 b
                                                                a:与假手术组比较,P<0.01;b:与模型组比较,P<0.01。
                                                             表5 各组大鼠脑组织中 EPO、EPOR、JAK2、STAT3
          Ⅰ
                      100 μm         100 μm          100 μm       mRNA表达水平比较(x±s,n=5)
                                                              组别         EPO mRNA  EPOR mRNA  JAK2 mRNA  STAT3 mRNA
                                                              假手术组         1        1         1         1
          Ⅱ
                      100 μm         100 μm          100 μm   模型组        0.16±0.03 a  0.19±0.08 a  15.48±2.72 a  27.04±6.61 a
                                                              阳性对照组      0.83±0.21 b  0.64±0.15 b  6.73±1.02 b  13.90±3.60 c
                                                              贯叶金丝桃高剂量组  0.91±0.11 b  0.62±0.17 b  9.56±1.30 c  8.16±1.74 b
          Ⅲ
                                                              贯叶金丝桃低剂量组  0.62±0.16 b  0.53±0.28 c  9.79±1.97 c  12.25±2.57 c
                      100 μm         100 μm          100 μm
                                                                a:与假手术组比较,P<0.01;b:与模型组比较,P<0.01;c:与模型
                                                             组比较,P<0.05。
          Ⅳ
                                                             4 讨论
                      100 μm         100 μm          100 μm
                                                                 脑缺血再灌注损伤是由缺血区血液供应恢复引起
                                                                                                          [11]
                                                             的继发损伤,也是缺血性卒中治疗后的严重并发症 。
          Ⅴ
                                                             本研究选择尼莫地平为阳性对照药,该药为二氢吡啶类
                      100 μm         100 μm          100 μm
                                                             钙通道阻滞剂,可用于缺血性脑血管疾病的临床治疗。
             Ⅰ:假手术组;Ⅱ:模型组;Ⅲ:阳性对照组;Ⅳ:贯叶金丝桃高剂量
                                                             本课题组前期研究证实了尼莫地平对缺血性脑损伤有
         组;Ⅴ:贯叶金丝桃低剂量组。
                                                             较好的干预效果 。本研究所用线栓与大鼠体重相配,
                                                                           [12]
         图5 各组大鼠海马组织中神经细胞凋亡的荧光显微图
                                                             有固定长度标记且粗细一致,能够保证造模大鼠脑缺血
              (TUNEL染色)
                                                             程度的一致性。同时,本课题组前期比较了药物干预 3
         表3 各组大鼠脑皮层和海马组织中神经细胞的凋亡率                            d和7 d的效果,结果显示,贯叶金丝桃干预3 d的效果不
               比较(x±s,n=5,%%)                                明显,可能与干预时间偏短有关,故最终选用了药物干
                                                             预 7 d 的方案。本研究结果显示,模型组大鼠的神经功
          组别                  脑皮层组织              海马组织
          假手术组                1.47±1.65          0.44±0.53   能评分和脑梗死比例均较假手术组显著升高,缺血再灌
          模型组                 29.84±2.30 a      32.61±1.89 a  注侧脑皮层和海马组织明显受损,凋亡的神经细胞明显
          阳性对照组               3.00±1.42 b        4.80±1.66 b  增多且凋亡率显著升高;而高、低剂量的贯叶金丝桃均
          贯叶金丝桃高剂量组           9.37±1.57 b        6.78±1.41 b  能不同程度地降低模型大鼠的神经功能评分和脑梗死
          贯叶金丝桃低剂量组           12.03±1.62 b      11.49±2.11 b  比例,改善其缺血再灌注侧脑皮层和海马组织的受损情
             a:与假手术组比较,P<0.01;b:与模型组比较,P<0.01。               况,减少其凋亡神经细胞数量并降低凋亡率,提示贯叶


          中国药房  2023年第34卷第16期                                              China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 16    · 1965 ·
   46   47   48   49   50   51   52   53   54   55   56