Page 47 - 《中国药房》2023年11期
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度、深Ⅱ度、Ⅲ度,其中深Ⅱ度烧伤最为常见,创面不及                          有限公司(批号分别为 20211024、20211024);RIPA高效
          时处理会导致修复周期延长、留下疤痕等问题 。创面                           裂 解 液 购 自 上 海 碧 云 天 生 物 技 术 有 限 公 司(批 号
                                                  [2]
          局部微循环障碍、炎症发生、新生血管形成等均与创面                           P0013B);苏木素-伊红(HE)染色试剂盒、增强型DAB显
          的愈合程度密切相关         [3―4] 。创面愈合与修复是一个复杂              色试剂盒均购自北京索莱宝生物科技有限公司(批号分
          的生物学过程,由多种细胞因子参与,其中与血管新生                           别为20220427、20220111)。
          相关的细胞因子[如血管内皮细胞生长因子(vascular                       1.3 实验动物
          endothelial growth factor,VEGF)、血小板内皮细胞黏附              本研究所用健康清洁级SD大鼠共60只,雌雄各半,
          分子1(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,CD31)]  体质量(200±20) g,购自长沙市天勤生物技术有限公
          具有刺激细胞增殖的特点,可促进肉芽组织形成(包括                           司,动物生产许可证号为 SCXK(湘)2019-0014;所有大
          成纤维细胞增殖、胞外基质产生及血管新生等)及创面                           鼠饲养期间均自由摄食、饮水。本实验方案已经通过贵
          再上皮化    [5―6] 。皮肤烧伤往往还伴随着炎症的产生,减缓                  州 中 医 药 大 学 动 物 管 理 委 员 会 批 准(批 准 号 为
                             [7]
          了烧伤皮肤的愈合进程 。因此,调控血管新生相关细胞                          20210123)。
          因子和炎症因子水平对促进创面愈合具有重要意义。                            2 方法
              栀续烫伤膏是贵州中医药大学第一附属医院药剂                          2.1 分组、造模与给药
          科根据多年临床经验研制的医院制剂,主要由栀子、续                               采用控温烫伤仪(2.5 cm 烫头)构建深Ⅱ度烧伤模
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          断、烫骨碎补、虎杖、冰片等药物组成,具有活血化瘀、消                         型大鼠,具体方法如下:大鼠腹腔注射 3% 戊巴比妥钠
          肿止痛的功效,在临床上已广泛应用于烧伤、擦伤的治                          (30 mL/kg)进行麻醉,在背部距离肩胛骨 2 cm 处脱毛
          疗等,疗效确切,但其治疗机制仍缺乏基础研究支持。                          (3 cm×3 cm)并消毒,采用烫伤仪(加压刻度 500 g、温
          因此,本研究以栀续烫伤膏为治疗药物,以深Ⅱ度烧伤                           度 105 ℃,持续 18 s)进行造模,当大鼠脱毛部位皮肤发
          模型大鼠为研究对象,观察其烧伤皮肤组织病理形态学                           白,且次日可见烧伤区域皮肤硬化、结痂,表明造模成
          改变,并检测其烧伤皮肤组织中血管新生相关细胞因子                           功。造模成功后,将大鼠分为模型组、京万红软膏组(给
          和炎症因子水平,从血管新生及抗炎的角度探讨栀续烫                           药时用棉签蘸取约2 mg均匀涂抹于受损皮肤)和栀续烫
          伤膏对深Ⅱ度烧伤模型大鼠皮肤的修复作用,以期为该                           伤膏高、中、低剂量组(规格分别为 20 g 药芯+20 mL 润
          药的进一步研究和应用提供参考。                                    湿剂、10 g药芯+20 mL润湿剂、5 g药芯+20 mL润湿剂,
          1 材料                                               给药时将润湿剂均匀涂于药芯袋表面,润湿后直接敷于
          1.1 主要仪器                                           患处,中剂量为临床等效剂量);另设空白对照组(只进
              本研究所用主要仪器有YLS-5Q型台式超级控温烫                       行脱毛处理,不造模),每组10只。各给药组大鼠分别给
          伤仪(天津科技发展有限公司)、Infinite M200 型酶标仪                  予相应药物,空白对照组大鼠不作任何处理,模型组大
         (美国 Thermo Fisher Scientific 公司)、JJ224BF 型精密分       鼠给予生理盐水,每天1次,连续21 d。
          析天平(常熟市双杰测试仪器厂)、RM2265型切片机(北                       2.2 大鼠烧伤创面愈合情况观察及愈合率计算
          京莱博瑞杰科技有限公司)、XK-400 型高速离心机(江                           实验过程中,模型大鼠于每天给药前用生理盐水清
          苏新康医疗器械有限公司)、Ⅳ-73P1F 型显微镜(日本                       洗伤口处,观察并拍照记录各组大鼠烧伤创面的愈合情
          Olympus公司)。                                        况(包括颜色和软硬程度)。采用Photoshop软件分析烧
          1.2 主要药品与试剂                                        伤创面愈合情况 ,并计算烧伤创面愈合率[创面愈合
                                                                            [8]
              栀续烫伤膏(批准文号 Z20220014000)由贵州中医                  率=(初始烧伤面积-未愈合创面面积)/初始烧伤面
          药大学第一附属医院提供,本品由药芯和润湿剂两部分                           积×100%]。
          组成,药芯为褐色至棕褐色固体,气微香;润湿剂为棕黄                          2.3 取材及处理
          色至棕色澄清液体,气微香;临床使用规格为 2.5 g 药                           末次给药后次日,采用戊巴比妥钠麻醉大鼠,每组
          芯+5 mL润湿剂,用法为外用——将润湿剂均匀涂于药                         随机取6只大鼠的烧伤皮肤组织(约2.5 cm),以生理盐
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          芯袋表面,润湿后直接敷于患处。                                    水清洗干净,置于-80 ℃条件下保存,用于ELISA检测。
              京万红软膏(批号 2020440,规格 50 g/支)购自天津                取各组剩余4只大鼠的烧伤皮肤组织置于4%多聚甲醛
          达仁堂京万红药业有限公司;VEGF、白细胞介素 1β                         溶液中固定,用于病理形态学观察和免疫组化检测。
         (interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子 α(tumor necrosis      2.4 大鼠烧伤皮肤组织病理形态学观察
          factor-α,TNF-α)、IL-6 酶联免疫吸附测定(ELISA)试                  取“2.3”项下各组大鼠经 4% 多聚甲醛溶液固定的
          剂盒均购自杭州联科生物技术股份有限公司(批号分                            皮肤组织,常规制作HE染色切片,部分进行免疫组化染
          别 为 20210824、20210810、20210810、 20210810);兔源       色,部分采用显微镜观察并拍照记录大鼠烧伤皮肤组织
          VEGF、CD31单克隆抗体均购自武汉爱博泰克生物科技                        的病理形态学变化。


          中国药房  2023年第34卷第11期                                              China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 11    · 1321 ·
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