Page 66 - 《中国药房》2023年9期

[11]方法计算阿魏酸、染料木苷、槲皮素的相对校正因 围内，表明2种方法所得结果无明显差异，结果见表4。
子，平行3次，计算平均值，结果见表3。 2.7 15批马齿苋药材样品的CA
以 15 批马齿苋药材样品 17 个共有峰的峰面积为
表 3 各成分相对校正因子及相对保留时间（n＝3）
变量，导入 SPSS 26.0 软件，以平方欧氏距离作为测
相对校正因子 相对保留时间
进样量/μL
阿魏酸 染料木苷 槲皮素 阿魏酸 染料木苷 槲皮素 度，利用组间连接法对样品进行 CA，结果见图 3。由
1 1.494 5.049 0.168 0.619 0.487 0.323 图 3 可知，当平方欧氏距离为 10 时，15 批马齿苋药材
3 1.601 5.287 0.177 0.615 0.483 0.321
5 1.545 5.397 0.179 0.615 0.483 0.321 样 品 可 被 聚 为 2 类 ：S1～S10 为 一 类 ，S11～S15 为
10 1.531 5.481 0.175 0.615 0.482 0.321 一类。
15 1.520 5.279 0.172 0.615 0.481 0.320 平方欧氏距离
20 1.515 5.319 0.170 0.615 0.481 0.320 0 5 10 15 20 25
平均值 1.534 5.302 0.174 0.616 0.483 0.321 S2
S4
RSD/% 2.400 2.748 2.432 0.265 0.461 0.341 S5
S1
S3
2.5.2 色谱峰的定位 采用相对保留时间法对待测成 S8
S10
分进行色谱峰定位。取“2.1.1”项下混合对照品溶液，按 S6
S7
“2.2”项下色谱条件分别进样1、3、5、10、15、20 μL，记录 S9
S13
峰面积。以咖啡酸为内标物，计算阿魏酸、染料木苷、槲 S15
S12
皮素的相对保留时间[相对保留时间＝tRi/tRs （式中，tRi为 S14
S11
待测成分的保留时间，tRs为内标物的保留时间）]，平行3 图3 15批马齿苋药材样品的CA树状图
次，计算平均值，结果见表3。 2.8 15批马齿苋药材样品的PCA
2.5.3 各因素对相对校正因子和相对保留时间的影响 按 将15批马齿苋药材样品的共有峰峰面积导入SPSS
“2.2”项下色谱条件和上述方法，测定不同流速（0.9、1.0、 26.0软件并进行标准化处理，以特征值和累计方差贡献
1.1 mL/min）、柱 温（25、30、35 ℃）、HPLC 仪（Waters 率作为依据对数据进行PCA，结果见表5。以特征值＞1
e2695、Agilent 1260 Infinity、Agilent 1260 Infinity Ⅱ）、色 筛选指标，得到 2 个主成分因子，其累计方差贡献率为
谱 柱（Eclipse XDB-C18、ZORBAX SB-C18、Eclipse Plus 92.502%，表明这 2 个主成分可以反映 15 批马齿苋药材
C18 ）对各成分相对校正因子和相对保留时间的影响。结 样品中的大部分成分信息。此外，旋转后的因子载荷矩
果显示，RSD均小于5%，表明各因素对相对校正因子和 阵能反映各成分对主成分的影响，其绝对值越大，则对
相对保留时间均无明显影响。 主成分的影响越大 。结果显示，峰 1、2（咖啡酸）、6、
[13]
2.6 样品含量测定 10～15（槲皮素）、16～17 在主成分 1 上有较高载荷（以
取15批药材样品，分别按“2.1.2”项下方法制成供试 载荷绝对值＞0.8计，下同）；峰3～5（阿魏酸）、8（染料木
品溶液，按“2.2”项下色谱条件进样测定，记录峰面积，分 苷）、9 在主成分 2 上有较高载荷。由 PCA 得分图（图 4）
别采用外标法和一测多评法计算阿魏酸等4种成分的含 可知，15批马齿苋药材样品中S1～S10相聚较近，S11～
量并进行比较，计算相对误差（RE） ，平行3次，计算平 S15相聚较近，所得结果与CA结果一致，表明不同产地
[12]
均值。结果显示，2 种方法计算结果的 RE 均在±1％范 马齿苋的质量有差异。
表 4 15批马齿苋药材样品中阿魏酸等4种成分的含量测定结果（n＝3）
咖啡酸（外标法）/ 阿魏酸 染料木苷 槲皮素 总含量（外标
编号
（μg/g） 外标法/（μg/g） 一测多评法/（μg/g） RE/% 外标法/（μg/g） 一测多评法/（μg/g） RE/% 外标法/（μg/g） 一测多评法/（μg/g） RE/% 法）/（μg/g）
S1 26.892 45.185 45.258 0.162 41.987 42.193 0.491 0.964 0.969 0.519 115.028
S2 22.988 39.015 39.065 0.128 44.781 44.788 0.016 0.926 0.932 0.648 107.710
S3 26.880 34.882 34.999 0.335 48.143 48.190 0.098 0.959 0.964 0.521 110.864
S4 26.550 35.785 35.931 0.408 46.256 46.659 0.871 0.935 0.931 －0.428 109.526
S5 20.998 36.725 36.739 0.038 49.148 49.321 0.352 0.969 0.976 0.722 107.840
S6 19.303 67.271 67.426 0.230 22.221 22.230 0.041 0.636 0.638 0.314 109.431
S7 17.757 69.318 69.539 0.319 22.591 22.601 0.044 0.618 0.619 0.162 110.284
S8 19.304 66.391 66.518 0.191 21.852 22.001 0.682 0.611 0.612 0.164 108.158
S9 17.733 69.281 69.500 0.316 21.547 21.653 0.492 0.600 0.602 0.333 109.161
S10 16.961 68.863 68.875 0.017 21.209 21.203 －0.028 0.627 0.628 0.159 107.660
S11 25.512 76.100 76.538 0.576 5.446 5.470 0.441 1.305 1.316 0.843 108.363
S12 24.001 74.813 74.814 0.001 5.690 5.690 0 1.419 1.426 0.493 105.923
S13 23.729 73.749 73.759 0.014 5.756 5.785 0.504 1.294 1.295 0.077 104.528
S14 25.820 74.679 74.714 0.047 5.423 5.448 0.461 1.286 1.294 0.622 107.208
S15 25.121 74.526 74.913 0.519 5.899 5.904 0.085 1.395 1.396 0.072 106.941

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