Page 33 - 《中国药房》2023年6期
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不明确，故本研究拟采用超高效液相色谱-四极杆/静电                         （simplified  molecular  input  line  entry  system，SMILES）
          场轨道阱高分辨质谱技术分别在正、负离子模式下对                            号 、国 际 化 合 物 标 识（international  chemical  identifier
          SQTS进行系统分析，同时比对相关文献及自建数据库，                         key，InChIKey）号、分子式、相对分子量、名称、分子结构
          初步鉴定 SQTS 的化学成分，为进一步揭示该方药效物                        式（mol格式）等，建立SQTS化学成分数据库。
          质基础提供科学依据。                                         2.3 供试品溶液的制备
          1 材料                                                   称取人参 10 g、炙黄芪 20 g、益智仁 10 g、玉竹 6 g、
          1.1 主要仪器                                           陈皮6 g、肉桂3 g、山茱萸12 g、桃仁10 g、白芥子6 g，混
              本研究所用主要仪器包括 Vanquish 型超高液相色                    合，加10倍量水，回流提取2 h后滤过；药渣加8倍量水，
          谱仪、Orbitrap Exploris 120 型高分辨质谱仪、Heraeus           回流提取 1 h 后滤过；合并两次滤液，于 60 ℃下减压浓
          Fresco17型离心机（美国Thermo Fisher Scientific公司），        缩至每 1 mL 含生药 1.494 g。取上述浓缩液，真空冷冻
          明澈 D24 UV 型纯水仪（美国 Merck Millipore 公司），             干燥36 h，得蓬松干燥物。取该干燥物，研磨成细粉，精
          YM-080S型超声仪（深圳市方奥微电子有限公司）等。                        密称取 1.0 g，置具塞锥形瓶中，精密加入 50% 甲醇 25
          1.2 主要药品与试剂                                        mL，密塞，称定质量，超声（功率 240 W，频率 45 kHz）处
              人参饮片（批号 2012310122）购自亳州市沪谯药业                   理15 min，冷却至室温后，用50%甲醇补足减失的质量，
          有限公司；肉桂（批号2201131）、益智仁（批号2201112）、                 摇匀滤过后，取续滤液过0.22 μm微孔滤膜即得。
          炙黄芪[豆科植物蒙古黄芪 Astragalus membranaceus               2.4 成分归属与鉴定分析
         （Fisch.） Bge. var. mongholicus （Bge.） Hsiao 干燥根的加       取“2.3”项下供试品溶液适量，按“2.1”项下检测条
          工炮制品，批号 2204172]、陈皮（批号 2112223）、山茱萸                件进样测定，得SQTS的总离子流图（图1）。将正、负离
         （批号2109073）、白芥子（十字花科植物白芥Sinapis alba                子模式下检测到的质谱信息导入Xcalibur软件进行数据
          L. 的 干 燥 成 熟 种 子 ，批 号 2201193）、玉 竹（批 号             处理，收集各色谱峰的相对分子量、碎片离子信息、保留
          2112272）、桃 仁 [ 蔷 薇 科 植 物 桃 Prunus  persica （L.）    时间等，通过比对参考文献             [3―12] 和“2.2”项下自建数据
          Batsch 的干燥成熟种子，批号 2202251]饮片均购自安徽                  库，以实际测定的相对分子量与理论值之间的偏差小于
          普仁中药饮片有限公司；上述饮片经安徽中医药大学第                           10 ppm为标准，对各色谱峰对应成分进行指认。结果显
          一附属医院药剂科主任中药师韩燕全鉴定，均为真品。                           示，共鉴定出131个成分，包括23个萜类成分、22个黄酮
          甲醇、乙腈（液质联用级）均购自德国CNW Technologies                  类成分、21 个苯丙素类成分、12 个生物碱类成分、11 个
          公司；甲酸（液质联用级）购自美国 Sigma 公司；水为超                      酚类成分、9个氨基酸衍生物、4个脂肪酰类成分、3个有
          纯水。                                                机酸类成分、2个脂肪酸类成分、2个羧酸及其衍生物、1
          2 方法与结果                                            个糖类及其衍生物、1 个酯类成分和 20 个其他成分，具
          2.1 检测条件                                           体见表1。
          2.1.1  色 谱 条 件  以 ACQUITY  UPLC  BEH  C18 （2.1     2.4.1 黄酮类成分 黄酮类化合物是一类含有 2-苯基
          mm×100 mm，1.7 μm）为色谱柱，0.1% 甲酸溶液（A）-                色原酮结构的化合物，具有止咳、祛痰、平喘及抗菌的活
          0.1% 甲酸乙腈溶液（B）为流动相进行梯度洗脱（0～3.5                     性 [13―14] 。本研究从SQTS供试品溶液中共鉴定出黄酮类
          min，5%B→15%B；3.5～6  min，15%B→30%B；6～6.5            成分22个，包括芦丁、川陈皮素、山柰酚、刺芒柄花素、金
          min，30%B；6.5～12.5 min，30%B→70%B；12.5～18 min，       丝桃苷等。以化合物11为例，其在正离子模式下的准分
                                                                                          +
          70%B→100%B；18～25  min，100%B；25～30  min，            子 离 子 为 m/z  611.161  4[M+H] ，推 断 其 分 子 式 为
          100%B→5%B）；流速为 0.4 mL/min；柱温为 40 ℃；进样              C27H30O16；该准分子离子分别脱去1分子葡萄糖和1分子
          量为5 μL。                                            鼠李糖后产生碎片离子 m/z 465.098 2、301.047 4。结合
                                                                     [3]
          2.1.2 质谱条件 采用电喷雾电离源，在正、负离子模                        相关文献 ，确定该化合物为芦丁，其可能的质谱裂解过
          式下进行检测。雾化气压力为 55 psi；辅助气压力为 55                     程见图2。
          psi；气帘气压力为 35 psi；离子传输管温度为 350 ℃；气                     多甲氧基黄酮类成分的母核上通常连有多个甲氧
          化器温度为 350 ℃；喷雾电压为 5.5 kV（正离子模式）                    基或羟基，因此在正离子模式下其特征碎片离子峰显示
                                                                                                   +[4]
                                                                             +
          或－4 kV（负离子模式）；轰击能量为40 eV；碰撞能量为                     为[M+H－（CH3 ） n] 和[M+H－（CH3 ） n－H2O] 。以化合
          20 eV；扫描模式为全扫描，扫描范围为m/z 100～1 500。                 物 33 为例，其在正离子模式下的准分子离子为 m/z
                                                                           +
          2.2 SQTS化学成分数据库的建立                                 403.137 6[M+H] ，推测其分子式为C21H22O8；该准分子离
              利用 TCMSP、PubChem、SciFinder、ChemicalBook、       子脱去若干分子 OCH3、1 分子 CH3和 1 分子 H2O 后得到
          中国知网和 BioTree 中药数据库等检索 SQTS 各单味药                   碎片离子m/z 388.114 3、372.095 2、354.784 4、341.107 4。
          材的化学成分信息，整理各成分的化学文摘社（Chemi‐                        结合相关文献 ，确定该化合物为川陈皮素，其可能的质
                                                                         [5]
          cal Abstracts Service，CAS）号、简化分子线性输入系统             谱裂解过程见图3。


          中国药房  2023年第34卷第6期                                                 China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 6    · 667 ·
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