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藤黄健骨胶囊的组方药材包括骨碎补、淫羊藿、鹿                              藤 黄 健 骨 胶 囊（批 号 分 别 为 170401、170901、
          衔草、肉苁蓉、熟地黄、鸡血藤和莱菔子，是在中医药理                           170802、180108、180504、180106、170703、170407、170408、
          论的指导下经现代工艺提取加工而成的中药复方制                              170103、170505、170702、170902、180408、170701、170201、
          剂 ，具有补肾、活血、止痛等功效，常用于临床治疗骨质                          180107、170202、170903、180104，编号为 S1～S20，规格
            [1]
          疏松、关节炎等骨质性疾病以及风湿类疾病，疗效确切
                                                              为每粒装0.25 g）均购自丽彩甘肃西峰制药有限公司。
          且应用广泛     [2―4] 。
                                                              2 方法与结果
              质量稳定性是中药应用安全、有效的前提，然而大
                                                              2.1 质控成分的定量分析
          多数标准仅对中药及其复方中个别含量较大的成分进
                                                              2.1.1 混合对照品储备液的制备 分别精密称取琥珀
          行了规定，忽略了其他成分对质量的影响，致使无法从
                                                              酸、金丝桃苷、没食子酸、山柰酚、柚皮苷、柚皮素、原儿
          整体上有效控制中药及复方的质量                [5―7] 。本课题组前期
          采用指纹图谱结合化学计量学方法对 20 批藤黄健骨胶                          茶酸对照品适量，分别置于 10 mL 容量瓶中，加甲醇溶
          囊的质量稳定性进行了考察，经主成分分析发现，其整                            解并定容，制得琥珀酸、金丝桃苷、没食子酸、原儿茶酸
          体质量较为稳定，但存在明显的批间差异；进一步的偏                            质量浓度均为100 μg/mL，山柰酚、柚皮素质量浓度均为
          最小二乘法-判别分析结果表明，对药物质量差异影响                            20 μg/mL，柚皮苷质量浓度为 1 000 μg/mL 的单一对照
          较大的差异性成分有琥珀酸、金丝桃苷、没食子酸、山柰                           品母液。量取各单一对照品母液适量，加甲醇定容至 1
          酚、柚皮苷、柚皮素和原儿茶酸。前期研究虽为藤黄健                            mL，制得琥珀酸、金丝桃苷、没食子酸、山柰酚、柚皮苷、
          骨胶囊的质控提升奠定了基础，但并未对上述差异性成                            柚皮素、原儿茶酸质量浓度分别为 20.45、6.07、10.93、
          分的含量进行准确测定，无法实现质控标准的整体量                             0.55、52.66、0.50、19.47 μg/mL的混合对照品储备液。
          化。此外，在藤黄健骨胶囊治疗疾病时，上述差异性成                            2.1.2 供试品溶液的制备 取藤黄健骨胶囊内容物1.0
          分是如何相互配合以及通过哪些重要通路治疗相关疾
                                                              g，置于锥形瓶中，加入甲醇50 mL，密塞，称定质量，超声
          病的，也是当前尚未解决的问题。
                                                             （功率 200 W，频率 50 kHz）辅助溶解 20 min，放冷后，再
              因此，为解决以上关键科学问题，本研究拟采用超
                                                              次称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，经
          高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱
                                                              0.22 μm微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。
         （UHPLC-Q-Orbitrap HRMS）法建立快速、科学、准确的
                                                              2.1.3  色 谱 条 件 与 质 谱 条 件 （1）色 谱 条 件 ：以
          一级全扫描定量分析方法，对藤黄健骨胶囊中的7种主
                                                                            ®
                                                              ACQUITY UPLC  BEH C18 （50 mm×2.1 mm，1.7 μm）为
          要差异性成分（以下称“质控成分”）进行含量测定；同
          时，结合网络药理学对各质控成分的关键作用靶点和信                            色谱柱，乙腈（A）-0.1%甲酸溶液（B）为流动相进行梯度
          号通路进行分析，挖掘各成分在骨质疏松、关节炎等骨                            洗 脱（0～1.5  min，5%A；1.5～3.0  min，5%A～20%A；
          质性疾病以及风湿类疾病治疗中的潜在作用，为全面阐                            3.0～7.0 min，20%A～100%A；7.0～10.0 min，100%A）；
          明藤黄健骨胶囊质控成分的科学内涵提供新思路，同时                            流速为0.3 mL/min；柱温为40 ℃；进样量为5 μL。
          为进一步提升其质控标准奠定基础。                                       （2）质谱条件：离子源为加热电喷雾离子源，离子传
          1 材料                                                输管温度为320 ℃；辅助气温度为300 ℃，辅助气流速为
          1.1 主要仪器                                            10 μL/min；正离子模式下的鞘气流速为 40 μL/min，
              本研究所用主要仪器有Q-Exactive型超高效液相色                     喷雾电压为 3.50 kV；负离子模式下的鞘气流速为 38
          谱-质谱联用系统（美国 Thermo Fisher Scientific 公司）、           μL/min，喷 雾 电 压 为 2.80  kV；扫 描 范 围 为 m/z  80～
          New Classic MS 型十万分之一分析天平（瑞士 Mettler
                                                              1 200，一级扫描分辨率为70 000。琥珀酸、金丝桃苷、没
          Toledo 公司）、BX7200HP 型台式超声波清洗器（上海新
                                                              食子酸、山柰酚、柚皮苷、柚皮素、原儿茶酸用于定量的
          苗医疗器械制造有限公司）等。
                                                              一级质谱信息为m/z 117.019、463.088、169.014、287.055、
          1.2 主要药品与试剂
                                                              579.171、273.075、153.019。
              对照品琥珀酸（批号 MUST-17030502）、金丝桃苷
                                                              2.1.4 方法学考察 （1）专属性考察：取“2.1.1”项下混
         （批 号 MUST-16032113）、没 食 子 酸（批 号 MUST-
                                                              合对照品储备液、“2.1.2”项下供试品溶液（编号 S20）和
          18032801）、山柰酚（批号 MUST-16032801）、柚皮苷（批
          号 MUST-18050808）、柚皮素（批号 MUST-16032406）和             空白溶液（甲醇），按“2.1.3”项下条件进样测定。结果显
          原儿茶酸（批号 MUST-16032112）均购自成都曼思特生                     示，空白溶液对待测成分无干扰，且供试品溶液中7种质
          物科技有限公司，纯度均大于99%。甲酸、乙腈、甲醇为                          控成分的出峰时间与各对照品的出峰时间基本一致，说
          色谱纯，水为纯净水，其余试剂均为分析纯。                                明方法专属性较好（见图1，空白溶液图略）。


          · 2744 ·    China Pharmacy  2022 Vol. 33  No. 22                            中国药房  2022年第33卷第22期
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