Page 81 - 《中国药房》2022年18期

为参照，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。 2.4 聚类分析
结果显示，各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD 以 7 个已指认共有峰峰面积与取样量的比值为变
均小于 3%（n＝6），表明供试品溶液在 4 ℃下放置 24 h 量，以夹角余弦为距离，采用SPSS 28.0软件对11批文冠
内稳定。 木样品进行聚类分析，结果（图3）显示，当以距离2为判
2.3.3 重复性试验 取文冠木样品（编号 S3），共 6 份， 别条件时，11 批文冠木被分为 4 类，S5～S7、S9 为一类，
各约 0.5 g，精密称定，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶 S8、S11为一类，S10为一类，S1～S4为一类。
距离
液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以 0 5 10 15 20 25
表没食子儿茶素峰为参照，计算各共有峰的相对保留时 S6
间和相对峰面积。结果显示，各共有峰相对保留时间和 S7
S5
相对峰面积的 RSD 均小于 3%（n＝6），说明方法重复性
S9
良好。
S8
2.3.4 指纹图谱建立及相似度评价 分别取 11 批文冠 样品编号 S11
木样品（编号 S1～S11），按“2.2.2”项下方法制备供试品
S10
溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图并 S1
将色谱信息导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统 S2
（2004A 版）》，以 S1 样品图谱（色谱信息相对丰富）为参 S3
照，经多点校正、全峰匹配后，得11批样品的对照指纹图 S4
谱（R）和叠加指纹图谱（图1）。通过比对混合对照品溶 图3 11批文冠木样品的聚类分析树状图
液Ⅰ的色谱图（图 2），共指认了 7 个成分，其中峰 1 为没 2.5 主成分分析
食子儿茶素，峰2为表没食子儿茶素，峰3为儿茶素，峰5 将 11 批文冠木中 7 个已指认共有峰的峰面积导入
为表儿茶素，峰6为二氢杨梅素，峰14为花旗松素，峰15 SPSS 28.0 软件，经标准化处理后进行主成分分析。本
[11]
为杨梅素（虽有文献指出文冠木药材中含有槲皮苷 ， 研究提取对应特征值排名前3位的主成分，其累计方差
但本文并未指认出该成分）。11批样品指纹图谱与对照 贡献率达99.24%，提示其包含了大部分的色谱信息。这
指纹图谱的相似度分别为 1.000、0.999、0.998、0.998、 3 个主成分的特征值分别为 6.438、0.399、0.110，方差贡
0.912、0.923、0.928、0.919、0.957、0.926、0.910，均 大 献率分别为 91.97%、5.70%、1.57%。以这 3 个主成分为
于0.9。 坐标系构建得分图（图4），结果显示，11批文冠木可分为
4 类，S5～S7 为一类，S8～S11 一类，S3、S4 为一类，S1、
5
183.29
2 S2为一类。
6
137.47
U/mV 91.65 1 3 4 7 89 10 13 14 15 R 2
11
12
S11 1
S10
S9
S8
45.82 S7 S6 1
S5
S4
S3
S2 PCA1 0
S1
0
0 8.67 17.34 26.00 34.67 43.34 52.01 0
t/min
－1
图1 11批文冠木样品的对照指纹图谱（R）和叠加指纹
－2
图谱 －1 －2
－1 0 1 1 0
PCA2 2 2 PCA3
图4 11批文冠木样品的主成分分析得分图
91.65
2.6 黄酮类成分定量分析的方法学考察
3
U/mV 45.82 1 2 5 6 14 a 15 采用同一HPLC法测定文冠木中没食子儿茶素等7
种已指认黄酮类成分的含量。方法学考察内容如下：
0
0 8.67 17.34 26.00 34.67 43.34 52.01 2.6.1 专属性考察 取“2.2.1”项下混合对照品溶液Ⅰ、
t/min
“2.2.2”项下供试品溶液（编号 S8）和空白溶剂（甲醇）各
1：没食子儿茶素；2：表没食子儿茶素；3：儿茶素；5：表儿茶素；6：
二氢杨梅素；14：花旗松素；15：杨梅素；a：未指认成分（槲皮苷） 适量，按“2.1”项下色谱条件进样测定并记录色谱图（图
图2 混合对照品溶液Ⅰ的色谱图 略）。结果显示，上述7种成分色谱峰与相邻色谱峰的分
中国药房 2022年第33卷第18期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 18 ·2247·