Page 43 - 《中国药房》2022年4期
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2 方法                                               于－20 ℃保存，采用全自动生化分析仪分别检测尿液
        2.1 了哥王药材不同部位的制备                                   中 NAG、尿蛋白的水平；留取的血样静置 40 min 后，以
            取了哥王药材 7.9 kg，用 12 倍量的 70％乙醇以 3                12 000 r/min 离心 15 min，分离血清，于－20 ℃保存，采
        mL/（min·kg）的流速渗漉提取，提取液回收乙醇至无醇                      用全自动生化分析仪检测血清中 NAG、BUN、Cr 的水
        味，浓缩、真空干燥后，粉碎成细粉，得了哥王乙醇总提                          平；取肾（双侧）组织称定质量，计算脏器指数（脏器指
        取物796.32 g（1 g相当于了哥王药材9.92 g）。取乙醇总                 数＝脏器质量/体质量×100％）后，以10％中性甲醛溶液固
        提取物药粉 408.0 g，用水分散，依次用等体积的石油醚                      定，常规石蜡包埋、切片，经苏木精-伊红（hematoxylin-
       （沸程60～90 ℃）、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次萃取1                      eosin staining，HE）染色后，于光学显微镜下观察组织的
        h，分别合并石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取液，挥干溶剂，                        病理变化。
        干燥后，粉碎成细粉，得到石油醚部位14.49 g（1 g相当于                    2.5 统计学方法
        了哥王药材408.87 g）、乙酸乙酯部位147.70 g（1 g相当于                   采用SPSS 23.0软件对数据进行统计分析。满足正
        了哥王药材40.12 g）、正丁醇部位101.20 g（1 g相当于了                态分布的计量资料以 x±s 表示，采用单因素方差分析，
        哥王药材58.55 g）。剩余的水溶液浓缩、干燥后，粉碎成                      进一步两两比较采用LSD-t检验。检验水准α＝0.05。
        细粉，得水部位144.00 g（1 g相当于了哥王药材41.15 g）。               3 结果
        2.2 药液的配制                                          3.1 大鼠一般情况变化
            分别精密称取乙醇总提取物 0.794 g、石油醚部位                         整个观察期，空白组大鼠精神状态良好，活动正常，
        0.020 g、乙酸乙酯部位0.196 g、正丁醇部位0.135 g、水部              饮食量大，毛发光滑，大便正常。给药期间，乙醇总提取
        位 0.191 g，分别加入 1.0％羧甲基纤维素钠（sodium car-             物组和乙酸乙酯部位组大鼠精神比较萎靡，活动少且卷
        boxymethyl cellulose，CMC-Na）溶液配制成 50 mL 的样         缩成团，饮食量减少，大便稀薄；停药后以上症状逐渐好
        品混悬液，备用。                                           转，精神状态有明显改善，活动量和饮食量增加，大便趋
        2.3  分组与给药                                         于正常。给药期间，石油醚部位组、正丁醇部位组和水
            取SD大鼠72只，常规饲养适应1周后，随机分为乙                       部位组大鼠精神状态较空白组稍差，活动量有所减少，
        醇总提取物组、石油醚部位组、乙酸乙酯部位组、正丁醇                          饮食量减少，大便稀薄；停药后以上症状较快好转，精神
        部位组、水部位组和空白组，每组12只（雌雄各半）。给                         状态有明显改善，活动量和饮食量增加，大便很快趋于
        药组大鼠灌胃相应剂量的药物，每天 1 次，连续给药 2                        正常。实验过程中，空白组、水部位组、正丁醇部位组均
        周，再停药恢复 2 周；空白组灌胃等体积 1.0％CMC-Na                    无大鼠死亡，乙醇总提取物组和乙酸乙酯部位组在给药
        溶液，每天 1 次，连续 2 周。给药期间，所有大鼠均正常                      第 2 周各有 3 只大鼠死亡，石油醚部位组有 1 只大鼠
        摄食、饮水。给药剂量分别为：乙醇总提取物 317.520                       死亡。
        mg/kg、石油醚部位 7.875 mg/kg、乙酸乙酯部位 78.435              3.2  大鼠体质量、肛温变化
        mg/kg、正丁醇部位 53.865 mg/kg、水部位 76.545 mg/kg，             给药期间，空白组大鼠体质量增长快，乙醇总提取
        剂量参考笔者前期预实验和文献[15]设置。大鼠灌胃体                         物组、乙酸乙酯部位组大鼠给药第 7、9、11、13 天时的体
        积为20 mL/kg。                                        质量均较同期空白组显著下降（P＜0.05或P＜0.01）；停
        2.4  观察指标和检测方法                                     药后，上述组别大鼠的体质量停止下降，逐渐增长，但其
            实验期间，观察大鼠的一般情况，包括精神状态、活                        体质量仍显著低于同期空白组（P＜0.05 或 P＜0.01）。
        动情况、毛色变化、饮食量、饮水量等，并每隔2天称定大                         给药期间，石油醚部位组、正丁醇部位组、水部位组大鼠
        鼠体质量，测量其肛温。于第14天给药后，每组随机取                          的体质量增长缓慢，且石油醚部位组、正丁醇部位组大
        6 只大鼠，用代谢笼收集 24 h 尿液，留尿期间动物不摄                      鼠给药第13天时的体质量均显著低于同期空白组（P＜
        食，自由饮水。将代谢笼集尿器置于冰上，加入1％叠氮                          0.05）；停药后，上述组别大鼠的体质量增长迅速，但石油
        钠溶液作为防腐剂。于第 15 天腹腔注射 3％戊巴比妥                        醚组大鼠第 15 天和正丁醇组大鼠第 15、17 天时的体质
        钠溶液（每100 g腹腔注射0.1 mL）麻醉后于腹主动脉取                     量均显著低于同期空白组（P＜0.05）。实验过程中，各
        血，解剖大鼠，取双肾组织，称其质量，计算脏器指数，并                         组大鼠的肛温比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。
        留取肾组织作病理学检查。每组余下的6只大鼠，于第                           了哥王不同提取物对大鼠体质量的影响见表1。
        15天正常供给饲料与水，于第28天同法收集24 h尿液，                       3.3 大鼠肾脏指数变化
        于第29天同法取血、取双肾组织，计算脏器指数，并留取                             给药2周后，与空白组比较，乙醇总提取物组大鼠的
        肾组织作病理学检查。                                         肾脏指数显著增加（P＜0.05）；乙酸乙酯部位组大鼠的
            收集的尿液以 12 000 r/min 离心 5 min，取上清液              肾脏指数有所降低，石油醚部位组、正丁醇部位组、水部


        中国药房    2022年第33卷第4期                                               China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 4  ·421 ·
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