Page 37 - 《中国药房》2021年23期
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body weight，serum levels of GSH-Px and SOD，protein expression of Bcl-2 in myocardium were decreased significantly in model
        group（P＜0.01）；while fasting blood glucose，area under blood glucose curve，serum levels of biochemical indexes（GSP，TC，
        TG，MDA，CK-MB，cTn Ⅰ），cardiomyocyte apoptosis index，protein expression of Bax and caspase-3 in myocardium were
        increased significantly（P＜0.05 or P＜0.01）. The arrangement of myocardium was relatively irregular，and some muscle fibers
        were broken. Compared with model group，except for body weight，serum levels of SOD and MDA，the protein expression of Bax
        in myocardium in PF low-dose group， above indexes of PF groups were reversed significantly （P＜0.05 or P＜0.01）.
        CONCLUSIONS：PF can regulate glycolipid metabolism，enhance antioxidant ability，inhibit cardiomyocyte apoptosis and improve
        myocardial injury in T2DM model rats；the mechanism may be associated with increasing the protein expression of Bcl-2 and
        down-regulating the protein expression of Bax and caspase-3 in myocardium.
        KEYWORDS    Paeoniflorin；Type 2 diabetes mellitus；Myocardial injury；Apoptosis


            糖尿病是以慢性高血糖为特征的代谢性疾病，其中                         TMC XRS+型凝胶成像系统（美国Bio-Rad公司），TP1020
        2 型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）作为最常见         型组织脱水机、RM2245 型组织切片机（德国 Leica 公
                                               [1]
        的糖尿病类型，占所有糖尿病病例的90％以上 。目前，                         司），M200PR0 型酶标仪（瑞士 Tecan 公司），BX53 型显
        糖尿病引发的各种并发症（如糖尿病诱发的心血管疾                            微镜、SZX71 型荧光体式显微成像系统（日本 Olympus
                                           [2]
        病）已成为糖尿病患者的主要死亡原因 。研究表明，                           公司）。
        T2DM可造成心肌胰岛素敏感性下降、心肌细胞氧化损                          1.2 主要药品与试剂
                            [3]
        伤，进而威胁心脏功能 ；同时，T2DM 也会加剧左心室                            芍药苷原料药（批号 D1016A，纯度＞98％）购自大
        肥厚的发展，增加心脏对缺血性损伤的易感性 。由于                           连美仑生物技术有限公司；盐酸二甲双胍片（批号
                                                [4]
        心肌损伤是许多心脏疾病的共同基础，故研发出可以防                           H20023370，规格为 0.5 g/片）购自中美上海施贵宝制药
        治 T2DM 诱导的心肌损伤的药物对于减缓 T2DM 相关                      有限公司；高糖高脂饲料（批号 21031004）、链脲佐菌素
        心脏疾病的进展具有重要意义。                                     （STZ，批号 18883-66-4）均购自北京博爱港生物技术有
            芍药苷是从芍药根中提取得到的一种单萜糖苷类                          限公司；糖化血清蛋白（GSP）、总胆固醇（TC）、三酰甘油
        化合物，是芍药根的主要活性成分之一                 [5－6] 。其分子式      （TG）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）、
        为 C23H28O11，为无定形类白色粉末，具有吸湿性，熔点为                    超 氧 化 物 歧 化 酶（SOD）检 测 试 剂 盒（批 号 分 别 为
        196 ℃ 。药动学研究显示，芍药苷具有易吸收、口服生                        20210402、20200110、20200110、20210528、20210601、
             [7]
        物利用度高等特点 。药理学研究发现，芍药苷具有抗                           20210602）均购自南京建成生物工程研究所；肌酸激酶
                        [8]
        氧化、抗炎、免疫调节、扩张血管等药理作用 。此外，芍                         同工酶MB（CK-MB）酶联免疫吸附检测（ELISA）试剂盒
                                             [9]
        药苷被证明可以减轻心肌缺血再灌注损伤模型大鼠心                            （批号202104）购自江苏酶标生物科技有限公司；大鼠心
        脏的水肿、降低其心肌梗死发生率等                [10－12] ，具有较好的     肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）ELISA 试剂盒（批号 05/2021）购
        心肌保护作用。                                            自厦门仑昌硕生物科技有限公司；苏木精、伊红染色试
            T2DM诱导心肌损伤的机制尚未完全阐明，目前认                        剂盒（批号分别为 C210302、C201102）均购自珠海贝索
        为可能的损伤机制有氧化应激、内质网应激、炎症                             生物技术有限公司；通用型免疫组化 SP 试剂盒（批号
        等 。有研究表明，在高血糖状态下促凋亡蛋白——B                           2131C0804）购自北京中杉金桥生物技术有限公司；
          [13]
        细胞淋巴瘤 2（Bcl-2）相关 X 蛋白（Bax）可被活化，并且                  TUNEL细胞凋亡检测试剂盒、BCA蛋白检测试剂盒（批
        Bax/Bcl-2 的比值会降低，从而促进心肌细胞的凋亡 。                     号分别为 110919201008、092820210207）均购自上海碧
                                                     [14]
        另有研究表明，在糖尿病状态下线粒体细胞色素C会被                           云天生物技术有限公司；兔源β-肌动蛋白（β-actin）多克
        诱导释放，进而促使胱天蛋白酶3（caspase-3）激活，最终                    隆抗体（批号 9100026001）购自武汉三鹰生物技术有限
        导致心肌细胞凋亡 。因此，本研究拟考察芍药苷对                            公司；兔源Bax单克隆抗体、兔源Bcl-2单克隆抗体、兔源
                         [15]
        T2DM 模型大鼠心肌损伤的保护作用，并从 Bax/Bcl-2/                   caspase-3 多 克 隆 抗 体（批 号 分 别 为 GR3325129-1、
        caspase-3 信号通路角度初步研究芍药苷改善 T2DM 模                   GR3275117-8、GR224831-1）均购自美国Abcam公司；辣
        型大鼠心肌损伤的分子机制，为芍药苷的进一步开发利                           根过氧化物酶（HRP）标记的山羊抗兔/小鼠免疫球蛋白
        用提供实验依据。                                           G（IgG）二抗（批号 BST13J17B16G56）购自武汉博士德
        1 材料                                               生物工程有限公司；其余试剂均为实验室常用规格，水
        1.1  主要仪器                                          为双蒸水。
            本研究所用主要仪器有 GA-3 型稳益血糖仪（三诺                      1.3 动物
        生物传感股份有限公司），PowerEase Touch 350W 型电                    本研究所用的动物为 SPF 级健康 SD 雄性大鼠，共
        泳仪（美国 Thermo Fisher Scientific 公司）、ChemiDoc        60 只，鼠龄为 4 周龄，体质量为 115～125 g，购自北京华


        中国药房    2021年第32卷第23期                                             China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 23  ·2847 ·
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