Page 20 - 《中国药房》2021年22期
P. 20

芦荟苦素是一种色酮苷类物质，存在于多种百合科                          大鼠均在温度（22±2）℃、相对湿度40％～70％、12 h明
                                           [1]
        芦荟属植物中，在芦荟中的含量约为3‰ 。芦荟为百合                           暗交替的环境下饲养，自由进食、饮水。
        科植物库拉索芦荟 Aloe barbadensis Miller、好望角芦荟              2 方法与结果
        Aloe ferox Miller 或其他同属近缘植物叶的汁液浓缩干                  2.1 色谱与质谱条件

        燥物，具有泻下通便、清肝泻火、杀虫疗疳之功效                      [2－3] 。     以 Synergi Hydro-RP（2.10 mm×50 mm，4 µm）为色
        相关研究显示，芦荟苦素是芦荟的重要活性物质之一                     [4－5] ，  谱柱，以0.1‰甲酸溶液（A）-甲醇（B）为流动相进行梯度
        其主要功效如下：（1）抑制酪氨酸酶活性，阻止黑色素的                          洗脱（0～0.50 min，5％B；0.51～3.00 min，5％B→90％B；
                          [6]
        合成，具有美白功效 ；（2）调节细胞炎症因子和生长因                          3.01～4.00 min，90％B；4.01～5.00 min，5％B）；流速为
                              [7]
        子的释放，具有抗炎作用 ；（3）诱导Sam蛋白、Mad蛋白                       0.50 mL/min；柱温为30 ℃；进样量为5 µL。采用电喷雾
        及其类似蛋白（Smad）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）                        离子源（ESI），以多反应监测模式（MRM）进行负离子检
        的激活，促进伤口愈合 ；（4）激活 Wnt 信号通路，下调                       测；喷雾电压为 4 500 V；离子源气体 1（氮气）压力为 50
                             [7]
        Notch信号通路，调节消化系统功能，改善结肠炎模型大                         psi；离子源气体2（氮气）压力为50 psi；气帘气（氮气）压
        鼠的病理状态       [8－9] ；（5）促进脂联素分泌，调节糖脂代谢，              力为30 psi；喷雾温度为550 ℃；碰撞气压力为2 psi。芦
                         [10]
        具有抗糖尿病作用 。毒理学研究表明，芦荟苦素基本                            荟苦素及内标的质谱参数见表 1，二级质谱图及化学结
        无毒副作用 。药动学属性是评估活性化合物成药性                             构式见图1。
                   [11]
                                                                     表1 芦荟苦素及内标的质谱参数
        的重要指标，然而，针对芦荟苦素的药动学研究很少，
                                                            Tab 1 Mass spectrum parameters of aloesin and inter-
        有关报道仅采用二维液相色谱法测定了芦荟苦素的含
                                                                   nal standard
        量，并没有提供其具体的药动学参数，所用分析技术相
                                                             待测成分 母离子m/z 子离子m/z 去簇电压，V 碰撞能量，eV 碰撞室射出电压，V 碰撞室射入电压，V
        对落后且操作繁琐 。本文拟采用液相色谱-串联质
                          [12]
                                                             芦荟苦素  393.1  272.9  －90  －29    －10      －10
        谱（LC-MS/MS）法测定大鼠血浆中芦荟苦素的浓度，                          内标    555.3  144.9  －115  －41   －11      －10
        并考察其药动学特征，为芦荟苦素的成药性研究提供                                                       272.9        [M－H] －
                                                              2.5×10 6
        参考。
                                                              2.0×10 6
        1 材料                                                  cps
        1.1  主要仪器                                             intensity，  1.5×10 6 6
                                                              1.0×10
            本研究所用主要仪器包括Nexera XR型超高效液相                                             244.9
                                                              5.0×10 5            230.9          393.1
        色谱（UHPLC）仪（日本 Shimadzu 公司）、AB-SCIEX API                                         302.7
        4000+型串联四极杆质谱仪及配备的 Analyst 1.6.3 数据                       0   100      200      300      400
                                                                                    m/z
        处理软件（美国Applied Biosystem公司）、5922型冷冻离                                     A.芦荟苦素
                                                                                               511.2  [M－H] －
        心机（日本 Kubota 公司）、XS105DU 型十万分之一电子                     2.0×10 7
        分析天平（瑞士 Mettler Toledo 公司）、LabTower EDI15             cps  1.5×10 7
        型超纯水一体机（美国 Thermo Fisher Scientific 公司）、              intensity，  1.0×10 7  144.9        537.2
        Vibrax型圆周振荡器（德国Ika公司）等。
                                                                      162.8                       555.3
                                                              5.0×10 6
        1.2 主要药品与试剂
                                                                   118.9   225.1
            芦荟苦素对照品（批号20190530，纯度≥98％）购自                         0
                                                                  100    200    300    400     500    600
        昊睿化学（上海）有限公司；芦荟新苷D对照品（内标，批                                                  m/z
                                                                                   B.内标
        号 19072605，纯度≥98％）购自成都普菲德生物技术有                        图1 芦荟苦素及内标的二级质谱图与化学结构式
        限公司；异氟烷（批号 2018/08）购自北京吉安得尔科技                       Fig 1 MS/MS spectra and chemical structures of aloe-
        有限公司；甲醇（色谱级）购自德国 Merck 公司；其余试                             sin and internal standard
        剂均为分析纯或实验室常用规格，水为超纯水。                               2.2 溶液的配制
        1.3 实验动物                                            2.2.1  芦荟苦素贮备液        取芦荟苦素对照品适量，精密
            本研究所用动物为7周龄SPF级SD雄性大鼠，共6                        称定，加甲醇溶解、稀释，制成质量浓度为 0.1 mg/mL 的
        只，体质量为 243～300 g，由长沙市天勤生物技术有限                       贮备液，于4 ℃下保存，备用。临用时，用甲醇稀释至所
        公司提供，生产许可证号为SCXK（湘）2014-0011。所有                     需质量浓度即可。


        ·2702 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 22                                 中国药房    2021年第32卷第22期
   15   16   17   18   19   20   21   22   23   24   25