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按“2.1.1”项下色谱条件进样分析，记录色谱图。采用 阿魏酸
35
《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012 版）》，以 30
25
LGB7 号样品的色谱图为参照图谱，设置时间窗宽度为 mV U， 20
15
0.1 s，采用Mark峰匹配法进行匹配，生成23批不同基原 10
5
藁本药材的叠加指纹图谱，详见图 1。采用平均数法生 0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28
成不同基原藁本药材的对照指纹图谱（R），详见图2。 t，min
5 9 图3 对照品溶液的UPLC图
1 2 3 4 6 7 8 10 12
11 13
550 GB9
GB8 Fig 3 UPLC chromatogram of substance control
500 GB7
GB6
450 GB5 0.312～0.541，新疆藁本药材与藁本药材间的相似度为
GB4
400 GB3 0.324～0.682，藁本药材与辽藁本药材间的相似度为
GB2
350 GB1
LGB11 0.312～0.671，均小于 0.7，表明不同基原藁本药材间存
mV 300 LGB10
LGB9
U， 250 LGB8 在差异，详见表2。
LGB7
200 LGB6 2.2 不同基原藁本药材的化学计量学分析
LGB5
150 LGB4 2.2.1 CA 以5号峰（阿魏酸）为参照峰S，将其余12个
LGB3
100 LGB2
LGB1 特征峰的相对峰面积数据（辽藁本、新疆藁本药材中缺
50 XJGB3
XJGB2 失的6号峰、9号峰的相对峰面积数据均按0计算，下同）
0 XJGB1
[15]
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 导入IBM SPSS 20.0 统计软件，采用组间联接法 ，并选
t，min
取平方欧氏距离为度量标准进行CA，结果见图4。由图
图1 23批不同基原藁本药材的叠加指纹图谱
4 可知，当平方欧氏距离为 10 时，23 批不同基原藁本药
Fig 1 UPLC superimposed fingerprint of 23 batches
材可聚为3类：LGB1～LGB11聚为一类，均为辽藁本药
of Rhizoma Ligustici from different origins
材；XJGB1～XJGB3 聚为一类，均为新疆藁本药材；
230
220 10 GB1～GB9聚为一类，均为藁本药材。
210
200 2.2.2 PCA 以各特征峰的相对峰面积为变量，采用
190
180 5
170 SIMCA 14.1 软件进行无监督模式的 PCA，并绘制 PCA
160
150 模型得分散点图，详见图5。结果显示，PCA模型的R X
2
140 新疆蒿本
130 1 2 3 4 8 12
mV 120 3 7 11 13 （cum）为 0.963，Q（cum）为 0.770，均大于 0.5，表明该模
2
U， 110 9
100 5 型拟合良好 。由图 5 可知，不同基原藁本药材各自聚
[16]
90
80 1 2 6 蒿本
70 4 7 8 10 11 13 为一类，其中新疆藁本药材与辽藁本药材的聚集较为集
12
60
50
40 12 中，而藁本药材的聚集较为分散。
30 3 5
20 辽蒿本 2.2.3 OPLS-DA 以各特征峰的相对峰面积为变量，采
10 1 2 4 7 8 10 11 13
0 用 SIMCA 14.1 统计软件进行有监督模式的 OPLS-DA，
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26
2
t，min 其得分散点图见图 6。结果显示，OPLS-DA 模型的 R X
图2 不同基原藁本药材的对照指纹图谱（R） （cum）为 0.875，R Y（cum）为 0.950，Q（cum）为 0.931，均
2
2
Fig 2 Reference fingerprint（R）of Rhizoma Ligustici 接近1，表明该模型拟合度好、稳定性和预测率高 。由
[17]
from different origins 图 6 可知，23 批藁本药材样品均落在 95％置信区间内
由图 1 和图 2 可知，藁本、辽藁本、新疆藁本药材的 （XJGB2 样品除外），且不同基原藁本药材各自聚在一
UPLC指纹图谱中分别标定了13、11、11个特征峰，由此 起、区分清晰，表明不同基原藁本药材间差异明显。采
[18]
提示不同基原藁本药材所含成分存在差异。 用统计推断方法分析该模型 ，并将该模型随机排列
2.1.8 色谱峰的指认 取“2.1.2”项下对照品溶液，按 200 次进行置换检验，结果见图 7。由图 7 可知，置换检
2
2
“2.1.1”项下色谱条件进样分析，记录色谱图，详见图 3。 验参数 R 和 Q 的截距分别为 0.105、－0.535，OPLS-DA
2
2
由图3和图2比对可知，5号峰为阿魏酸。 模型的原始 R 和 Q（位于图 7 右上方）均大于左边随机
2
2
2.1.9 相似度评价 将 23 批不同基原藁本药材的指纹 排列后的 R 和 Q ，表明建立的 OPLS-DA 模型没有出现
[18]
图谱导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012 过拟合现象 ，可用于不同基原藁本药材的模式识别。
版）》进行相似度评价。结果显示，3 批新疆藁本药材间 进一步提取 OPLS-DA 模型中变量投影重要性（VIP）值
的相似度为 0.940～0.984，11 批辽藁本药材间的相似度 （见图8），并以VIP值大于1筛选不同基原藁本药材的差
为 0.962～0.999，9 批藁本药材间的相似度为 0.730～ 异成分 。由图 8 可知，10 号峰、13 号峰、12 号峰、7 号
[19]
0.997；新 疆 藁 本 药 材 与 辽 藁 本 药 材 间 的 相 似 度 为 峰、6 号峰所代表的化学成分是这 3 种基原藁本药材的
·2360 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 19 中国药房 2021年第32卷第19期