Page 79 - 《中国药房》2021年10期
P. 79

水冬瓜叶又称大接骨丹叶，为山茱萸科植物有齿鞘                         剂均为分析纯或实验室常用规格，水为纯净水。
        柄木 Toricellia Angulata Oliv. var. intermedia（Harms）Hu       表1 10批水冬瓜叶药材来源信息
        的干燥叶 。为贵州省少数民族用药，在黔南布依族苗                           Tab 1 Source information of 10 batches of the leaves
                [1]
        族自治州辖区的苗族聚集地用作“苗药”，在水族聚集地                                 of T. angulata
        用作“水药”。目前，该药暂未收载于2020版《中国药典》                        样品编号    采集地      经度      纬度      海拔，m    采集时间
        及2003年版《贵州省中药材、民族药材质量标准》中。据                         Y1     贵州沿河县    28.841111°  108.299722°  674  2020－08－30
                                                            Y2     贵州丹寨县    26.274722°  107.831389°  814  2020－08－28
       《贵州省中药材、民族药材质量标准》《湖北中草药志》等
                                                            Y3     贵州绥阳县    28.114545°  107.176743°  940  2020－08－13
        标准记载，有齿鞘柄木是以根皮入药                [1－2] ；但《中华本草       Y4     贵州福泉市    26.721893°  107.582513°  981  2020－10－05
       （苗药卷）》中却指出，有齿鞘柄木是以根、根皮、树皮和                           Y5     贵州荔波县    25.510634°  107.839798°  911  2020－09－28
                                                            Y6     贵州都匀市    26.262822°  107.514536°  807  2020－07－06
        叶入药 。据调研，依据有齿鞘柄木植物体生长期内冬
              [3]
                                                            Y7     贵州都匀市    26.229444°  107.642500°  675  2020－06－01
        季落叶与早春萌芽（通常3月中旬）的特性，有齿鞘柄木                           Y8     贵州都匀市    26.229444°  107.642500°  675  2020－07－01
        在少数民族聚集地民间或民族医疗机构临床应用时，呈                            Y9     贵州都匀市    26.229444°  107.642500°  675  2020－08－01
                                                            Y10    贵州凤冈县    27.728841°  107.680490°  876  2020－08－19
        现出春、夏、秋季用“叶”，而冬季、初春用根皮的习药特
        点，且水冬瓜叶为部分民族医疗机构治疗骨折或摔伤愈                           2 方法与结果
        合院内制剂的重要组成成分之一，这提示有齿鞘柄木的                           2.1 色谱条件
        地上部位——水冬瓜叶具有一定的药用开发研究价值。                               色谱柱为 Agela Promosil C 18 （250 mm×4.6 mm，5
            当前针对有齿鞘柄木的研究主要集中在其不同用                          μm）；流动相为 0.2％磷酸水溶液（A）-乙腈（C），梯度洗
        药部位中紫丁香苷、总黄酮含量的经时变化特征分析和                           脱（0～20 min，10％ C→13％ C；20～25 min，13％ C→
        根皮部位的化学成分、生物活性、工艺优化、质量控制以                          19％C；25～40 min，19％C→25％C；40～50 min，25％C→
        及树皮部位的抗炎、镇痛活性上             [4－14] ，本课题组前期也建        45％ C；50～65 min，45％ C→70％ C；65～65.1 min，
        立了有齿鞘柄木根皮和树皮部位成分分析的高效液相                            70％C→10％C；65.1～70 min，10％C）；检测波长为 210
        色谱（HPLC）指纹图谱        [15－17] ，但目前关于有齿鞘柄木地           nm；柱温为 35 ℃；流速为 1.0 mL/min；进样量为 10 μL；
        上部分——水冬瓜叶成分分析的报道仍较少。鉴于此，                           运行时间为70 min。
        本研究拟在前期研究的方法基础上，以不同产地的水冬                           2.2  水冬瓜叶HPLC指纹图谱的建立与分析
        瓜叶为研究对象，建立其 HPLC 指纹图谱；利用化学模                        2.2.1  混合对照品溶液         分别取金丝桃苷、异槲皮苷对
        式识别法对其进行质量差异性评价，筛选出质量差异标                           照品适量，精密称定，置于10 mL量瓶中，先加适量甲醇
        志物；并同时测定指认出的主要成分的含量，以期为水                           超声（功率 500 W，频率 40 kHz）处理 2 min，再加甲醇稀
        冬瓜叶药材的质量控制、质量标准制订及民间、临床安                           释到刻度，摇匀，即得金丝桃苷、异槲皮苷质量浓度分别
        全用药提供参考。                                           为0.089 0、0.083 0 mg/mL的混合对照品溶液。
        1 材料                                               2.2.2  供试品溶液       称取药材粉末 1.0 g，精密称定，置
        1.1  主要仪器                                          于250 mL具塞锥形瓶中，加甲醇100 mL，加热回流提取
            1260型HPLC仪购自美国Agilent公司；FA1004B型               60 min，放冷，过滤；收集滤液于 100 mL 棕色量瓶中，用
        万 分 之 一 电 子 天 平 购 自 温 州 瑞 昕 仪 器 有 限 公 司 ；          甲醇稀释至刻度，摇匀。用0.45 μm微孔滤膜过滤，收集
        PX125DZH 型十万分之一电子天平购自成都川弘科生                        滤液，即得。
        物技术有限公司；KQ3200 型超声仪购自昆山市超声仪                        2.2.3  精密度试验       取同一份样品（编号 Y9）粉末适
        器有限公司；WK-1000A型高速粉碎机购自潍坊市北方                        量，按照“2.2.2”项下方法制成供试品溶液，再按照“2.1”
        制药设备制造有限公司。                                        项下色谱条件连续进样6次，记录色谱图。以4号峰（该
        1.2 主要药品与试剂                                        峰保留时间居中、峰形较好且峰面积稳定）为参照，分别
            10 批水冬瓜叶药材均于 2020 年 6－10 月由本课题                 计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果，各
        组自行采集（其来源信息见表 1），经黔南民族医学高等                         共有峰相对保留时间的RSD均不高于1.56％、相对峰面
        专科学校药学系韩忠耀副教授鉴定均为山茱萸科植物                            积的 RSD 均不高于 2.17％（n＝6），表明该方法精密度
        有齿鞘柄木 T. Angulata Oliv. var. intermedia（Harms）Hu   良好。
        的叶。所有药材均于 58 ℃下烘干，粉碎后过四号筛，                         2.2.4  重复性试验       取同一份样品（编号 Y9）粉末适
        备用。                                                量，精密称取6份，分别按照“2.2.2”项下方法制成供试品
            金丝桃苷对照品（批号 CHB180214，纯度≥98％）、                  溶液，再按照“2.1”项下色谱条件进样检测，记录色谱
        异槲皮苷对照品（批号CHB180628，纯度≥98％）均购自                     图。以4号峰为参照，分别计算各共有峰的相对保留时
        成都克洛玛生物科技有限公司；乙腈为色谱纯，其余试                           间和相对峰面积。结果，各共有峰相对保留时间的RSD


        中国药房    2021年第32卷第10期                                            China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 10  ·1225 ·
   74   75   76   77   78   79   80   81   82   83   84