Page 41 - 《中国药房》2021年第9期
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为普通组(n=12)和造模组(n=68)。普通组小鼠继续 95%乙醇脱水 2 min,以超纯水洗涤 2 次;二甲苯透明 5
给予普通饲料,造模组小鼠则给予高脂饲料,均正常饮 min,以超纯水洗涤2次;以中性树胶封片,并于显微镜下
水。各组小鼠每周测定 1 次体质量,10 周后,测定小鼠 观察小鼠脂肪和肝组织的病理形态学变化。
体质量和血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C、血糖水平。当 2.9 统计学方法
造模组小鼠的体质量超过普通组小鼠的30%,且血清中 采用 GraphPad Prism 8.0 软件进行统计分析。数据
TC、TG、LDL-C、血糖水平均显著高于普通组时,则表明 以x±s表示,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05表
小鼠肥胖模型制备成功 [15-16] 。 示差异有统计学意义。
2.2 分组与给药 3 结果
从“2.1”项下普通组小鼠中随机挑选10只作为正常 3.1 小鼠体质量及腰围的测定结果
组;从“2.1”项下造模组小鼠中随机挑选50只,分为模型 与正常组比较,模型组小鼠体质量和腰围均显著增
组、奥利司他组(阳性对照,15.6 mg/kg,剂量根据临床等 加(P<0.01);与模型组比较,奥利司他组和 23-乙酰泽
效剂量换算而得)和 23-乙酰泽泻醇 B 低、中、高剂量组 泻醇B各剂量组小鼠体质量均显著降低(P<0.01),奥利
(7.5、15、30 mg/kg,剂量根据文献[17]设置),每组 10 司他组和23-乙酰泽泻醇B高剂量组小鼠腰围显著减少
只。正常组和模型组小鼠灌胃水,各给药组小鼠灌胃相 (P<0.01),详见表1。
应药物(临用时均以 0.5%的羧甲基纤维素钠溶解),灌 表 1 23-乙酰泽泻醇 B 对肥胖模型小鼠体质量和腰围
胃体积均为20 mL/kg,每天1次,连续4周。 的影响(x±±s,n=10)
2.3 小鼠体质量及腰围测定 Tab 1 Effects of alisol B 23-acetate on body weight
各组小鼠从开始给药后,于每周二上午9:00定时测 and waist circumference in obesity model mice
定其体质量和腰围(即用卷尺测定小鼠腹部经过剑突与 (x±±s,n=10)
后肢间垂直距离中点一周的长度)。 组别 体质量,g 腰围,cm
正常组 28.84±0.16 7.13±0.06
2.4 小鼠全身脂肪、肌肉及体液质量的测定
模型组 37.26±0.31 ** 8.04±0.06 **
末次给药后,将各组小鼠放入小动物核磁共振全身 奥利司他组 33.22±0.57 ## 6.82±0.07 ##
成分分析仪中并固定,扫描分析小鼠脂肪、肌肉和体液 23-乙酰泽泻醇B低剂量组 34.53±0.49 ## 7.96±0.07
23-乙酰泽泻醇B中剂量组 34.09±0.13 ## 7.83±0.07
质量。 23-乙酰泽泻醇B高剂量组 33.69±0.29 ## 7.12±0.08 ##
2.5 取材及处理 注:与正常组比较, P<0.01;与模型组比较,P<0.01
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末次给药后,各组小鼠禁食不禁水 18 h,然后眼眶 Note:vs. normal group, P<0.01;vs. model group,P<0.01
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静脉窦取血。血样室温放置 1.5 h 后,于 4 ℃条件下以 3.2 小鼠全身脂肪、肌肉和体液质量的测定结果
3 500 r/min离心10 min,取上清液,作为血清样本。取血 与正常组比较,模型组小鼠脂肪和体液质量均显著
后,各组小鼠立即处死,剖取脂肪组织和肝脏。 增加(P<0.01);与模型组比较,奥利司他组和 23-乙酰
2.6 小鼠血清中血脂指标和血糖水平的检测 泽泻醇 B 各剂量组小鼠脂肪和体液质量均显著减少
取“2.5”项下各组小鼠血清样本,采用全自动生化分 (P<0.01),详见表2。
析仪检测血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C和血糖水平。 表2 23-乙酰泽泻醇B对肥胖模型小鼠全身脂肪、肌肉
2.7 小鼠肝组织中 PPAR-γ、NF-κB、IL-6 和血清中 和体液质量的影响(x±±s,n=10)
TNF-α水平的检测 Tab 2 Effect of alisol B 23-acetate on body fat,mu-
取“2.5”项下各组小鼠肝组织适量,加入预冷 RIPA scle and body fluid mass in obesity model mice
裂解液,充分混匀,裂解 20 min 后,研磨成组织匀浆,于 (x±±s,n=10)
4 ℃条件下以 12 000 r/min 离心 10 min,取上清液,作为 组别 脂肪质量,g 体液质量,g 肌肉质量,g
正常组 1.96±0.07 1.47±0.09 18.95±1.89
肝组织样品。取肝组织样品和“2.5”项下血清样本,严格
模型组 12.84±0.21 ** 3.55±0.03 ** 18.85±0.50
按照相应ELISA试剂盒说明书方法操作,测定肝组织中 奥利司他组 6.97±0.43 ## 2.37±0.07 ## 19.38±1.36
PPAR-γ、NF-κB、IL-6和血清中TNF-α的水平。 23-乙酰泽泻醇B低剂量组 10.22±0.58 ## 2.98±0.13 ## 18.54±1.51
23-乙酰泽泻醇B中剂量组 7.74±0.57 ## 2.61±0.02 ## 19.43±1.00
2.8 小鼠脂肪和肝组织的病理形态学观察 23-乙酰泽泻醇B高剂量组 7.68±0.60 ## 2.72±0.19 ## 18.95±1.61
取“2.5”项下各组小鼠的脂肪和肝组织样品适量,以 注:与正常组比较, P<0.01;与模型组比较,P<0.01
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4%多聚甲醛固定24 h,经修剪、乙醇脱水、石蜡包埋、切 Note:vs. normal group, P<0.01;vs. model group,P<0.01
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片(厚度为5 μm)、梯度复水后,以苏木精-伊红染液染色 3.3 小鼠血清中血脂指标和血糖水平测定结果
5 min;在自来水中洗涤 10 min 后,以超纯水洗涤 1 次; 与正常组比较,模型组小鼠血清中TC、TG、LDL-C、
中国药房 2021年第32卷第9期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 9 ·1059 ·