Page 41 - 《中国药房》2021年第9期
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为普通组(n=12)和造模组(n=68)。普通组小鼠继续                       95%乙醇脱水 2 min,以超纯水洗涤 2 次;二甲苯透明 5
        给予普通饲料,造模组小鼠则给予高脂饲料,均正常饮                           min,以超纯水洗涤2次;以中性树胶封片,并于显微镜下
        水。各组小鼠每周测定 1 次体质量,10 周后,测定小鼠                       观察小鼠脂肪和肝组织的病理形态学变化。
        体质量和血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C、血糖水平。当                    2.9 统计学方法
        造模组小鼠的体质量超过普通组小鼠的30%,且血清中                              采用 GraphPad Prism 8.0 软件进行统计分析。数据
        TC、TG、LDL-C、血糖水平均显著高于普通组时,则表明                      以x±s表示,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05表
        小鼠肥胖模型制备成功          [15-16] 。                      示差异有统计学意义。
        2.2 分组与给药                                          3 结果
            从“2.1”项下普通组小鼠中随机挑选10只作为正常                      3.1 小鼠体质量及腰围的测定结果
        组;从“2.1”项下造模组小鼠中随机挑选50只,分为模型                           与正常组比较,模型组小鼠体质量和腰围均显著增
        组、奥利司他组(阳性对照,15.6 mg/kg,剂量根据临床等                    加(P<0.01);与模型组比较,奥利司他组和 23-乙酰泽
        效剂量换算而得)和 23-乙酰泽泻醇 B 低、中、高剂量组                      泻醇B各剂量组小鼠体质量均显著降低(P<0.01),奥利
       (7.5、15、30 mg/kg,剂量根据文献[17]设置),每组 10                司他组和23-乙酰泽泻醇B高剂量组小鼠腰围显著减少
        只。正常组和模型组小鼠灌胃水,各给药组小鼠灌胃相                           (P<0.01),详见表1。
        应药物(临用时均以 0.5%的羧甲基纤维素钠溶解),灌                        表 1 23-乙酰泽泻醇 B 对肥胖模型小鼠体质量和腰围
        胃体积均为20 mL/kg,每天1次,连续4周。                                 的影响(x±±s,n=10)
        2.3 小鼠体质量及腰围测定                                     Tab 1 Effects of alisol B 23-acetate on body weight
            各组小鼠从开始给药后,于每周二上午9:00定时测                               and waist circumference in obesity model mice
        定其体质量和腰围(即用卷尺测定小鼠腹部经过剑突与                                  (x±±s,n=10)
        后肢间垂直距离中点一周的长度)。                                    组别                    体质量,g           腰围,cm
                                                            正常组                  28.84±0.16      7.13±0.06
        2.4  小鼠全身脂肪、肌肉及体液质量的测定
                                                            模型组                  37.26±0.31 **   8.04±0.06 **
            末次给药后,将各组小鼠放入小动物核磁共振全身                          奥利司他组                33.22±0.57 ##   6.82±0.07 ##
        成分分析仪中并固定,扫描分析小鼠脂肪、肌肉和体液                            23-乙酰泽泻醇B低剂量组        34.53±0.49 ##   7.96±0.07
                                                            23-乙酰泽泻醇B中剂量组        34.09±0.13 ##   7.83±0.07
        质量。                                                 23-乙酰泽泻醇B高剂量组        33.69±0.29 ##   7.12±0.08 ##
        2.5  取材及处理                                             注:与正常组比较, P<0.01;与模型组比较,P<0.01
                                                                                              ##
                                                                           **
            末次给药后,各组小鼠禁食不禁水 18 h,然后眼眶                          Note:vs. normal group, P<0.01;vs. model group,P<0.01
                                                                              **
                                                                                                 ##
        静脉窦取血。血样室温放置 1.5 h 后,于 4 ℃条件下以                     3.2  小鼠全身脂肪、肌肉和体液质量的测定结果
        3 500 r/min离心10 min,取上清液,作为血清样本。取血                     与正常组比较,模型组小鼠脂肪和体液质量均显著
        后,各组小鼠立即处死,剖取脂肪组织和肝脏。                              增加(P<0.01);与模型组比较,奥利司他组和 23-乙酰
        2.6  小鼠血清中血脂指标和血糖水平的检测                             泽泻醇 B 各剂量组小鼠脂肪和体液质量均显著减少
            取“2.5”项下各组小鼠血清样本,采用全自动生化分                      (P<0.01),详见表2。
        析仪检测血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C和血糖水平。                     表2    23-乙酰泽泻醇B对肥胖模型小鼠全身脂肪、肌肉
        2.7  小鼠肝组织中 PPAR-γ、NF-κB、IL-6 和血清中                       和体液质量的影响(x±±s,n=10)
        TNF-α水平的检测                                         Tab 2 Effect of alisol B 23-acetate on body fat,mu-
            取“2.5”项下各组小鼠肝组织适量,加入预冷 RIPA                           scle and body fluid mass in obesity model mice
        裂解液,充分混匀,裂解 20 min 后,研磨成组织匀浆,于                            (x±±s,n=10)
        4 ℃条件下以 12 000 r/min 离心 10 min,取上清液,作为              组别              脂肪质量,g      体液质量,g    肌肉质量,g
                                                            正常组              1.96±0.07  1.47±0.09  18.95±1.89
        肝组织样品。取肝组织样品和“2.5”项下血清样本,严格
                                                            模型组             12.84±0.21 **  3.55±0.03 **  18.85±0.50
        按照相应ELISA试剂盒说明书方法操作,测定肝组织中                          奥利司他组            6.97±0.43 ##  2.37±0.07 ##  19.38±1.36
        PPAR-γ、NF-κB、IL-6和血清中TNF-α的水平。                      23-乙酰泽泻醇B低剂量组   10.22±0.58 ##  2.98±0.13 ##  18.54±1.51
                                                            23-乙酰泽泻醇B中剂量组    7.74±0.57 ##  2.61±0.02 ##  19.43±1.00
        2.8 小鼠脂肪和肝组织的病理形态学观察                                23-乙酰泽泻醇B高剂量组    7.68±0.60 ##  2.72±0.19 ##  18.95±1.61
            取“2.5”项下各组小鼠的脂肪和肝组织样品适量,以                          注:与正常组比较, P<0.01;与模型组比较,P<0.01
                                                                                              ##
                                                                           **
        4%多聚甲醛固定24 h,经修剪、乙醇脱水、石蜡包埋、切                           Note:vs. normal group, P<0.01;vs. model group,P<0.01
                                                                                                 ##
                                                                              **
        片(厚度为5 μm)、梯度复水后,以苏木精-伊红染液染色                       3.3 小鼠血清中血脂指标和血糖水平测定结果
        5 min;在自来水中洗涤 10 min 后,以超纯水洗涤 1 次;                     与正常组比较,模型组小鼠血清中TC、TG、LDL-C、

        中国药房    2021年第32卷第9期                                              China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 9  ·1059 ·
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