Page 77 - 《中国药房》2021年第4期

min，35％A），检测波长为 350 nm，流速为 1 mL/min，柱 11
30
温为30 ℃，进样量为10 μL。 25 7
2.1.4 精密度试验 取“2.1.1”项下供试品溶液（编号 20 5
S1）适量，按“2.1.3”项下色谱条件连续进样测定6次，以 mAU 15 8
秦皮乙素为参照，记录各共有峰的相对保留时间和相对 10 1 9
10
峰面积。结果，11 个共有峰相对保留时间的 RSD 均小 5 2 4
3 6
于 1.0％（n＝6），相对峰面积的 RSD 均小于 2.0％（n＝ 0 R
0 10 20 30 40 50 60
6），表明方法精密度良好。 t，min
2.1.5 重复性试验 取藏药二十五味驴血丸（编号 S1） 图2 藏药二十五味驴血丸的对照指纹图谱
0.5 g，共 6 份，按“2.1.1”项下方法制备供试品溶液，再按 Fig 2 Control fingerprint of Tibetan medicine Ershi-
“2.1.3”项下色谱条件进样测定，以秦皮乙素为参照，记 wuwei luxue pills
录各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果，11个
共有 11 个共有峰，通过与混合对照品溶液的保留时间
共有峰相对保留时间的RSD均小于1.0％（n＝6），相对峰
（按相同色谱条件分析所得，见图3A）进行对比，共指认
面积的RSD均小于2.0％（n＝6），表明方法重复性良好。
出其中5个共有峰，分别为秦皮乙素（5号峰）、荭草苷（8
2.1.6 稳定性试验 取“2.1.1”项下供试品溶液（编号
号峰）、异牡荆素（9号峰）、异金雀花素（10号峰）、鞣花酸
S1）适量，分别于室温下放置 0、2、4、6、8、10、12、24 h时， （11 号峰）。由于秦皮乙素含量相对较高、分离度较好，
按“2.1.3”项下色谱条件进样测定，以秦皮乙素为参照，
且出峰稳定，故以其为参照计算其他共有峰的相对保留
记录各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果，11 时间和相对峰面积。结果，10批藏药二十五味驴血丸样
个共有峰相对保留时间的 RSD 均小于 1.0％（n＝8），相
品相对保留时间的 RSD 为 0～0.84％，相对峰面积的
对峰面积的 RSD 均小于 2.0％（n＝8），表明供试品溶液
RSD为0～67.19％，详见表2、表3。
于室温下放置24 h内稳定性良好。
60
2.1.7 指纹图谱的建立 取10批藏药二十五味驴血丸， 50 11
按“2.1.1”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.3”项下色 mAU 40
30
谱条件进样测定，记录色谱图。将所得色谱数据导入 20
5 8
《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》，生成指 10 9 10
0
纹图谱的共有模式，并以此作为对照指纹图谱（R），同时 0 10 20 30 40 50 60
生成叠加指纹图谱，详见图1、图2。 t，min
A.混合对照品溶液
11
30
70 11
7
60 5 8 20 5
1 2 3 4 6 9 10
50 R mAU 8
S10 10
40
S9
mAU 30 S8 9 10
S7
S6
20 S5 0
S4
10 S3 0 10 20 30 40 50 60
S2
0 S1 t，min
B.供试品溶液（编号S1）
0 10 20 30 40 50 60
t，min 40
图1 10批藏药二十五味驴血丸样品的HPLC叠加指纹 30
图谱 mAU 20
Fig1 HPLC superimposed fingerprint of 10 batches 10
of Tibetan medicine Ershiwuwei luxue pills 0
0 10 20 30 40 50 60
2.1.8 相似度评价 将 10 批藏药二十五味驴血丸样品 t，min
C.空白溶液
的色谱图导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统
注：5.秦皮乙素；8.荭草苷；9.异牡荆素；10.异金雀花素；11.鞣花酸
（2012 版）》进行相似度评价。结果，10 批藏药二十五味 Note：5. aesculetin；7. orientin；8. isovitexin；10. isoscoparin；11.
驴血丸样品的相似度分别为 0.999、0.995、0.994、0.998、 ellagic acid
0.999、0.997、0.994、0.984、0.988、0.983，均大于 0.98。这 图3 藏药二十五味驴血丸样品以及5种成分混合对照
提示，10批藏药二十五味驴血丸样品的图谱与对照指纹 品溶液、空白溶液的高效液相色谱图
图谱具有较高的相似度，即各批样品的化学成分一致性 Fig 3 HPLC chromatograms of Tibetan medicine Er-
较好。 shiwuwei luxue pills，five components mixed
2.1.9 共有峰的指认 10 批藏药二十五味驴血丸样品 reference and blank control

中国药房 2021年第32卷第4期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 4 ·455 ·