Page 76 - 《中国药房》2021年第4期
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S5-S10 as one category. Principal component analysis showed that accumulative contribution rate of two principle components was
        89.178％ . CONCLUSIONS：Established fingerprint is stable and feasible，and the method of content determination is simple，
        accurate and reproducible. They combined with chemical pattern recognition can be used for the quality control of the Tibetan
        medicine Ershiwuwei luxue pills.
        KEYWORDS     Tibetan medicine Ershiwuwei luxue pills；HPLC；Fingerprint；Principle component analysis；Cluster analysis；
        Content determination


            藏药二十五味驴血丸（藏药名                     ）是具有国         分之一分析电子天平（上海良平仪器仪表有限公司）、
        家批准文号（国药准字 Z54020070）的藏医经典方剂，始                      BSA124S型十万分之一分析电子天平[赛多利斯科学仪
                       [1]
        载于《四部医典》 ，现收载于《卫生部药品标准：藏药（第                         器（北京）有限公司]、SB-8200DTS 型双频超声仪（宁波
              [2]
        1册）》 。该药具有祛风、除湿、干黄水的作用，可用于治                         新艺超声设备有限公司，功率 400 W，频率 40 kHz）、
        疗关节炎、类风湿性关节炎、痛风、痹病引起的四肢关节                           UPH-I型超纯水机（四川优普超纯科技有限公司）。
                                  [2]
        肿大、疼痛、变形、黄水积聚等 。现代药效学研究发现，                          1.2 主要药品与试剂
        藏药二十五味驴血丸用于治疗类风湿性关节炎的效果                                 秦 皮 乙 素 对 照 品（批 号 110741-201708，纯 度 ≥
        显著 。                                                98％）购自中国食品药品检定研究院，荭草苷对照品（批
            [3]
            藏药二十五味驴血丸由驴血、生等膏、降香、檀香、                         号 H-044-181216，纯度≥98％）、异牡荆素对照品（批号
        毛诃子、诃子、余甘子等 25 味药材组成，主要含有黄酮                         Y-116-180803，纯度≥98％）、异金雀花素对照品（批号
        类、酚酸类、苯丙素类、生物碱类、多糖类等有效成分 。                          Y-077-190517，纯 度 ≥98％）、鞣 花 酸 对 照 品（批 号
                                                      [2]
        其中，秦皮乙素为苯丙素类成分，具有抗炎、抗菌、抗氧                           R-004-190812，纯度≥98％）均购自成都瑞芬思生物科
        化、抗肿瘤等活性        [4－5] ；荭草苷、异牡荆素和异金雀花素               技有限公司；甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为
                                                            超纯水。
        为黄酮类成分，具有抗炎、保肝、抗氧化、抗肿瘤、保护心
        脏、保护神经等活性         [6－9] ；鞣花酸为酚酸类成分，具有抗                  10 批藏药二十五味驴血丸（编号 S1～S10，规格均
                                                            为每丸重0.25 g）样品来源信息见表1。
                               [10]
        炎、抗氧化、抗肿瘤等作用 。目前，《卫生部药品标准：
                                                                表1 10批藏药二十五味驴血丸样品来源信息
        藏药（第1册）》关于该药的质量标准中仅收载了以秦皮
                                                            Tab 1  Sample source information of 10 batches of
        甲素为对照的薄层鉴别，未见含量测定和指纹图谱测定
                                                                   Tibetan medicine Ershiwuwei luxue pills
          [2]
        项 。武嘉庚等 对二十五味驴血丸中的西红花、人工
                      [11]
                                                            编号              来源                       批号
        牛黄进行了薄层鉴别，并以大黄酚为指标成分进行了含
                                                            S1       西藏甘露藏药股份有限公司（甘露）               19103A
        量测定，虽然为该药的质量控制提供了参考，但指标单                            S2       西藏甘露藏药股份有限公司（甘露）               19009A
        一。此外，有研究对二十五味驴血丸中的没食子酸进行                            S3       西藏雄巴拉曲神水藏药厂（雪王山）               2019090101
                                                            S4       西藏雄巴拉曲神水藏药厂（雪王山）               2019100101
        报道  [12－13] ，但未见其他指标成分的定性定量分析。
                                                            S5       青海帝玛尔藏药药业有限公司（藏王天宝）            20190217
            指纹图谱是基于对物质群整体作用的认识，借助于                          S6       青海帝玛尔藏药药业有限公司（藏王天宝）            20190312
        波谱或色谱等技术获得的中药化学成分的波谱或色谱                             S7       青海省格拉丹东药业有限公司（箭康）              1904111
                                                            S8       青海省格拉丹东药业有限公司（箭康）              1904241
        图，是实现鉴别产品真实性、评价质量一致性和产品稳
                                                            S9       青海省格拉丹东药业有限公司（格拉丹东）            1905211
        定性的可靠手段        [14－15] 。化学模式识别技术可对高效液               S10      青海省格拉丹东药业有限公司（格拉丹东）            1901151
        相色谱（HPLC）等数据进行客观分析，既可对多个指标                          2 方法与结果
        进行统计分析，又可将整个图谱信息数量化，进而使其
                                                            2.1 藏药二十五味驴血丸HPLC指纹图谱的建立
        可以被计算机识别与处理，从而更加客观地反映中药的
                                                            2.1.1  供试品溶液的制备          取藏药二十五味驴血丸适
        质量信息，达到全面控制中药质量的目的 。鉴于此，                            量，研碎，精密称取粉末（过二号筛），约 0.5 g，置于具塞
                                             [16]
        本研究建立了藏药二十五味驴血丸的HPLC指纹图谱，                           锥形瓶中，加入80％甲醇30 mL，称定质量，超声处理30
        测定了秦皮乙素、荭草苷、异牡荆素、异金雀花素和鞣花                           min，取出，放冷，再次称定质量，用80％甲醇补足减失的
        酸等5个成分的含量，同时结合化学模式识别技术对该                            质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
        药进行了分析，旨在为全面控制藏药二十五味驴血丸的                            2.1.2  混合对照品溶液的制备           分别取秦皮乙素、荭草
        质量提供参考。                                             苷、异牡荆素、异金雀花素、鞣花酸对照品适量，精密称
        1 材料                                                定，加 80％甲醇制成上述成分质量浓度分别为 0.105、
        1.1  主要仪器                                           0.118、0.101、0.106、0.302 mg/mL的混合对照品溶液。
            实验所用主要仪器有：1260 型 HPLC 仪（包括四元                    2.1.3  色谱条件      以 Chromsil C18 （250 mm×4.6 mm，5
        泵、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器、Chemista-                      μm）为色谱柱，以甲醇（A）-0.1％磷酸水溶液（B）为流动
        tion 04.03 色谱工作站，美国 Agilent 公司）、FA1004 型万           相进行梯度洗脱（0～30 min，25％A→35％A；30～60


        ·454 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 4                                    中国药房    2021年第32卷第4期
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