Page 60 - 《中国药房》2021年3期

lung tissue，and lung tissue lesion was obvious. The content of IL-1β and white blood cell count in BALF，relative expression of
NLRP3 and Cleaved caspase-1 protein in lung tissue were increased significantly （P＜0.05 or P＜0.01）. Compared with model
group，FEV0.3/FVC of administration groups were increased significantly（P＜0.05 or P＜0.01）；lung tissue lesion of them were
improved to different extents. The content of IL-1β and white cell count in BALF，relative expression of NLRP3 protein（except
for Qingfei baoyuan capsule low-dose group）and Cleaved caspase-1 protein（except for Qingfei baoyuan capsule medium-dose and
low-dose groups）in lung tissue were decreased significantly（P＜0.05 or P＜0.01）. CONCLUSIONS：Qingfei baoyuan capsule can
relieve lung tissue lesion and improve lung function in COPD model rats，the effects of which may be associated with inhibiting
inflammation reaction by inhibiting NLRP3 signaling pathway.
KEYWORDS Qingfei baoyuan capsule； Chronic obstructive pulmonary disease；Airway inflammation； NLRP3 signaling
pathway；Rat

慢性阻塞性肺疾病（Chronic obstructive pulmonary 限 责 任 公 司），脂 多 糖（美 国 Sigma 公 司 ，批 号
disease，COPD），因其高发病率和病死率，已成为全球重 026M4015V），吉姆萨染色液试剂盒（安徽雷根生物技术
大的健康问题 。吸烟是 COPD 重要的危险因素，由于 有限公司，批号 20190121），生理盐水（贵州鑫源生物科
[1]
吸烟引起的慢性气道炎症进一步加重了小气道异常和 技有限公司，批号 180413），水合氯醛（天津市大茂化学
实质损伤 [2－3] 。近年许多研究表明，NOD 样受体蛋白 3 试剂厂，批号 20180123），大鼠 IL-1β免疫酶联吸附测定
（NLRP3）通路参与了COPD的气道炎症进程 [4－5] ，故其已 法（ELISA）试剂盒、兔抗大鼠 NLRP3 抗体、兔抗大鼠
成为 COPD 治疗的新靶点。清肺保元胶囊处方源于贵 Cleaved caspase- 1 抗体、DAB 显色试剂盒（武汉博士德
州中医药大学第一附属医院呼吸内科使用的中药复方 生 物 工 程 有 限 公 司 ，批 号 分 别 为 12621873002、
“清肺保元汤”，由紫花地丁、茯苓、当归等药材组成，具 12CM405B、12J18、12I16B26），兔β-actin 抗体（英国 Ab-
有清热化痰、宣肺止咳、活血化淤的功效 。为便于患者 cam公司，批号ab8216），生物素标记的山羊抗兔免疫球
[6]
使用，该院将其开发成医院制剂“清肺保元胶囊”，临床 蛋白G（IgG）二抗（上海碧云天生物技术有限公司，批号
[7]
实践证实该药治疗 COPD 的效果较好 ，具有开发成上 12AB512C），微量BCA 蛋白定量试剂盒（北京康为世纪
市药品的潜力，但其抗COPD的药理作用及其具体机制 生物科技有限公司，批号MS190124），苏木精-伊红（HE）
尚不清楚。基于此，本研究拟利用烟熏加脂多糖复制 染色试剂盒（上海碧云天生物技术有限公司，批号
COPD大鼠模型，观察清肺保元胶囊对NLRP3通路相关 201812017），十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
蛋白[NLRP3、剪切的胱天蛋白酶1（Cleaved caspase-1）]、 （SDS-PAGE）制备试剂盒（北京索莱宝生物科技有限公
白细胞介素 1β（IL-1β）等表达的影响从而探讨其对 司，批号 20181125）；甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析
COPD 模型大鼠气道炎症的改善作用机制，为该药治疗 纯或实验室常用规格，水为蒸馏水。
COPD提供实验依据。 1.3 动物
1 材料 实验用 SPF 级 SD 大鼠 60 只，雄性，体质量 180～
1.1 主要仪器 220 g，购自长沙市天勤生物技术有限公司，动物生产许
实验用主要仪器包括动物熏烟箱（自制，60 cm×50 可证号为 SCXK（湘）2014-0011。所有大鼠均于温度
cm×40 cm）、AniRes 2005 型动物肺功能分析系统（北京 21～24 ℃、湿度50％～55％、12 h光照/12 h黑暗交替的
贝兰博科技有限公司）、RM2245型石蜡切片机（德国Lei- 环境下进行饲养。
ca公司）、DYCZ-40型电泳仪（北京六一仪器厂）、BX51T- 2 方法
PHD-J11型显微镜（日本Olympus公司）、MK3型全功能 2.1 分组、造模与给药
酶标仪（美国Thermo Fisher Scientific公司）、S10型高速 大鼠适应性喂养1周后，将其随机分成空白对照组、
均质器（上海利闻科学仪器有限公司）、Tanno 5200型化 模型组、地塞米松组（0.2 mg/kg，按临床用量的7倍折算）
学发光凝胶成像仪（上海天能科技有限公司）。 和清肺保元胶囊高、中、低剂量组（1 232.0、616.0、308.0
1.2 主要药品与试剂 mg/kg，分别按临床用量的 14、7、3.5 倍折算），每组 10
实验用主要药品与试剂有：清肺保元胶囊（贵州中 只。采用气管内滴注脂多糖生理盐水溶液（200 μg/μL）
医药大学第一附属医院药剂科生产，批号 20181108，规 联合烟熏法制作 COPD 大鼠模型 [8－9] ：分别于实验第 1、
格每粒装0.44 g；用法用量为口服，每次4粒，每日3次）， 14天时在大鼠气管内滴注上述溶液（空白对照组大鼠气
醋酸地塞米松片（浙江仙琚制药股份有限公司，批号 管内滴注生理盐水）；于实验第2～28天（除第14天外），
180316，规格0.75 mg），黄果树牌香烟（贵州中烟工业有 使其被动吸烟 30 min，1 支/只（空白对照组大鼠不作处

·310 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 3 中国药房 2021年第32卷第3期