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为超纯水。                                               24 h内稳定性良好。
            10批金钱草药材（编号：M1～M10）均于产地购买，                      2.1.6  重复性试验       取金钱草样品粉末（编号：S1）约
        经广东一方制药有限公司魏梅主任中药师鉴定为报春                             1.0 g，精密称定，共 6 份，按“2.1.3”项下方法制备供试品
        花科植物过路黄 L. christinae Hance 的干燥全草。将每                溶液，再按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，以槲皮素为
        批药材分为两份，其中一份取全草粉碎、过筛，备用（依                           参照，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结
        次编号为 S1～S10），另一份则将茎、叶分别粉碎、过筛，                       果，7个共有峰相对保留时间的RSD≤0.49％（n＝6），相
        备用（依次编号为 J1～J10、Y1～Y10）。药材样品来源                      对 峰 面 积 的 RSD≤1.98％（n＝6），表 明 方 法 重 复 性
        信息见表1。                                              良好。
                      表1 药材样品来源信息                           2.1.7  特征指纹图谱的建立           取金钱草全草及不同部
                Tab 1 Source information of sample          位样品各 10 批，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再
        编号             产地        编号           产地            按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图，采用《中
        M1           四川省中江县      M6         四川省双流县
        M2           四川省中江县      M7         四川省双流县          药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》建立特征指
        M3           四川省中江县      M8         重庆市石柱县          纹图谱。分别以 S1、J1、Y1 样品色谱图为参照图谱，设
        M4           四川省双流县      M9         重庆市石柱县          置时间窗宽度为 0.1 min，通过多点校正、全谱峰匹配分
        M5           四川省双流县      M10        重庆市石柱县
                                                            别生成共有特征指纹图谱，同时采用中位数法分别生成
        2 方法与结果
                                                            对照特征指纹图谱。结果，每批金钱草全草及不同部位
        2.1 UPLC特征指纹图谱的建立
                                                            样品均有7个共有峰，不同批次的金钱草相同部位间的
        2.1.1  色谱条件      色谱柱：Waters CORTECS UPLC T3
                                                            色谱峰相似，化学成分整体差异较小，详见图1。
        （100 mm×2.1 mm，1.6 μm）；流动相：乙腈（A）-0.2％磷酸
                                                            2.1.8  共有峰的指认        取“2.1.2”项下混合对照品溶液
        水溶液（B），梯度洗脱（0～15 min，12％A→15％A；15～
                                                            适量，按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。
        30 min，15％A→35％A；30～30.1 min，35％A→12％A；
                                                            通过与混合对照品图谱比对，共指认3个共有峰，分别为
        30.1～40 min，12％A）；检测波长：364 nm；柱温：30 ℃；
                                                            山柰酚-3-O-芸香糖苷（5号峰）、槲皮素（6号峰）、山柰素
        流速：0.2 mL/min；进样量：1 µL。
                                                           （7号峰）。因6号峰槲皮素的分离度较优、峰形较好，故
        2.1.2  混合对照品溶液的制备            精密称取山柰酚-3-O-
                                                            以其为参照，计算其他各共有峰的相对保留时间和相对
        芸香糖苷、槲皮素、山柰素对照品适量，加入 80％甲醇，
                                                            峰面积，详见图2。
        制 成 上 述 成 分 质 量 浓 度 分 别 为 39.197 0、39.703 4、
                                                            2.1.9  相似度评价      采用《中药色谱指纹图谱相似度评
        38.093 0 μg/mL的混合对照品溶液。
                                                            价系统（2012 版）》进行相似度评价，结果见表 2、表 3。
        2.1.3  供试品溶液的制备          取金钱草样品粉末（过三号
                                                            由图1、表2可知，同一部位不同批次金钱草的特征图谱
        筛，下同），约 1.0 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加入
        80％甲醇10 mL，称定质量，超声（功率：500 W，频率：40                   基本相似，与其对照特征指纹图谱一致性较好，相似度
        kHz）处理20 min，放冷，再次称定质量，用80％甲醇补足                     均不低于 0.830，表明同一部位各批次间金钱草的化学
        减失的质量，摇匀，经0.22 µm 微孔滤膜滤过，取续滤液，                      成分差异较小。由表3可知，同一批次金钱草茎与叶的
        即得。                                                 相似度为 0.504～0.859，全草与茎的相似度为 0.593～
        2.1.4  精密度试验       取“2.1.3”项下供试品溶液（编号：              0.904，全草与叶的相似度为 0.885～0.995，表明同一批
        S1）适量，按“2.1.1”项下色谱条件连续进样测定6次，以                      次不同部位间金钱草的化学成分含量存在较大差异，其
        槲皮素为参照，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰                            中金钱草全草与茎的相似度较低，而全草与叶的相似度
        面积。结果，7 个共有峰相对保留时间的 RSD≤0.59％                       较高，提示叶的化学成分与全草相似。
        （n＝6），相对峰面积的 RSD≤1.74％（n＝6），表明方法                    2.2 含量测定
        精密度良好。                                              2.2.1 色谱条件      同“2.1.1”项。
        2.1.5  稳定性试验       取“2.1.3”项下供试品溶液（编号：              2.2.2  溶液的制备       混合对照品溶液的制备同“2.1.2”
        S1）适量，分别于室温下放置 0、2、4、8、12、24 h 时按                   项，供试品溶液的制备同“2.1.3”项。取 80％甲醇溶液，
       “2.1.1”项下色谱条件进样测定，以槲皮素为参照，计算                         经 0.22 µm 微孔滤膜滤过，取续滤液，即得阴性对照
        各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果，7 个共                           溶液。
        有峰相对保留时间的 RSD≤0.48％（n＝6），相对峰面积                      2.2.3  系统适用性试验         取“2.2.2”项下混合对照品溶
        的 RSD≤1.14％（n＝6），表明供试品溶液于室温下放置                      液、供试品溶液、阴性对照溶液各适量，按“2.2.1”项下色


        ·2872 ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 23                                 中国药房    2020年第31卷第23期
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