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Runx2、Osx mRNA 的表达水平显著降低（P＜0.01）；与 BMP 40 kDa
模型组比较，淫羊藿总黄酮低、高剂量组和雌二醇组大
Runx2 55 kDa
鼠骨组织BMP、Runx2、Osx mRNA表达水平均显著降低
Osx 65 kDa
（P＜0.05 或 P＜0.01）；与淫羊藿总黄酮低剂量组比较，
GAPDH 60 kDa
淫羊藿总黄酮高剂量组和雌二醇组大鼠骨组织中BMP、
假手术组 模型组 淫羊藿总黄 淫羊藿总黄 雌二醇组
Runx2、Osx mRNA 表达水平均显著升高（P＜0.05）；与 酮高剂量组 酮低剂量组
雌二醇组比较，淫羊藿总黄酮高剂量组大鼠骨组织中 图3 各组大鼠骨组织中BMP、Runx2、Osx蛋白表达的
Runx2、Osx mRNA 表达水平均显著升高（P＜0.05），但 电泳图
BMP mRNA表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）。各 Fig 3 Electrophoretograms of protein expression of
组大鼠骨组织BMP、Runx2、Osx mRNA的表达水平测定 BMP，Runx2 and Osx of rats in each group
结果见表5。 表6 各组大鼠骨组织中BMP、Runx2、Osx蛋白表达水
表 5 各组大鼠骨组织 BMP、Runx2、Osx mRNA 表达 平测定结果（x±±s，n＝10）
水平测定结果（x±±s，n＝3） Tab 6 Protein expressions of BMP，Runx2 and Osx
Tab 5 mRNA expressions of BMP，Runx2 and Osx in of rats in each group（x±±s，n＝10）
bone tissue of rats in each group（x±±s，n＝3） 组别 BMP/GAPDH Runx2/GAPDH Osx/GAPDH
组别 BMP mRNA Runx2 mRNA Osx mRNA 假手术组 4.74±0.11 3.30±0.23 2.21±0.61
假手术组 0.65±0.17 0.50±0.02 1.12±0.23 模型组 1.43±0.14 ＊＊ 2.02±0.26 ＊＊ 1.35±0.54 ＊＊
模型组 0.23±0.06 ＊＊ 0.31±0.03 ＊＊ 0.47±0.15 ＊＊ 淫羊藿总黄酮低剂量组 2.60±0.13 # 2.21±0.24# 5.26±0.57 #
淫羊藿总黄酮低剂量组 0.31±0.18 # 0.35±0.01 # 0.56±0.12 # 淫羊藿总黄酮高剂量组 3.79±0.16 ##Δ 2.59±0.15 ##Δ 3.37±0.36 ##Δ
淫羊藿总黄酮高剂量组 0.44±0.16 ##Δ 0.49±0.02 ##Δ★ 0.95±0.22 ##Δ★ 雌二醇组 3.68±0.12 ##Δ 2.58±0.16 ##Δ 3.44±0.30 ##Δ
雌二醇组 0.43±0.20 ##Δ 0.40±0.03 ##Δ 0.84±0.21 ##Δ 注：与假手术组比较， P＜0.01；与模型组比较，P＜0.05，P＜
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Δ
注：与假手术组比较， P＜0.01；与模型组比较，P＜0.05，P＜ 0.01；与淫羊藿总黄酮低剂量组比较，P＜0.05
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Δ
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0.01；与淫羊藿总黄酮低剂量组比较，P＜0.05；与雌二醇组比较，P＜ Note：vs. sham operation group， P＜0.01；vs. model group，P＜
Δ
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0.05 0.05，P＜0.01；vs. E. brevicornu total flavonoids low-dose group，P＜
＊＊
Note：vs. sham operation group， P＜0.01；vs. model group，P＜ 0.05
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Δ
0.05，P＜0.01；vs. E. brevicornu total flavonoids low-dose group，P＜ 究表明，淫羊藿总黄酮可以促进 BMSCs 的表达以及骨
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★
0.05；vs. estradiol group，P＜0.05 愈合和骨吸收 ，但是具体相关药理机制尚未明确。
[18]
3.6 淫羊藿总黄酮对 PMOP 模型大鼠骨组织 BMP、
BMP/Runx2/Osx信号通路与骨形成密切相关，参与
Runx2和Osx蛋白表达的影响
调控成骨细胞的分化 [19-20] 。BMPs 属于转化生长因子
与 假 手 术 组 比 较 ，模 型 组 大 鼠 骨 组 织 中 BMP、 （TGF-β）超家族，可诱导BMSCs向成软骨细胞、成骨细
Runx2、Osx蛋白表达水平均显著降低（P＜0.01）；与模型 胞等分化，促进成骨细胞功能。其中，BMP 能通过与细
组比较，淫羊藿总黄酮低、高剂量组和雌二醇组大鼠骨 胞膜表面的异二聚体受体特异性结合，调节Runx2及其
组织中 BMP、Runx2、Osx 蛋白表达水平显著升高（P＜ 下游Osx基因的转录和表达 。作为特异性成骨细胞转
[21]
0.05 或 P＜0.01）；与淫羊藿总黄酮低剂量组比较，淫羊 录因子和成骨细胞分化的关键调节因子，Runx2通过结
藿总黄酮高剂量组和雌二醇组大鼠骨组织中 BMP、 合成骨细胞特异性顺式作用元件（OSE），激活骨桥素、
Runx2、Osx蛋白的表达水平均上升（P＜0.05）；与雌二醇 骨钙蛋白、骨涎蛋白和Ⅰ型胶原基因等多种成骨细胞增
组比较，淫羊藿总黄酮高剂量组骨组织中BMP、Runx2、 殖、分化特异性标志物的转录和表达，促进膜内和软骨
Osx 蛋白表达水平差异均无统计学意义（P＞0.05）。各 内骨化成骨 。而 Osx 属于锌指蛋白，是 Runx2 的下游
[22]
组大鼠骨组织中BMP、Runx2、Osx的蛋白表达电泳图见 关键性转录因子，通过调控许多成骨细胞重要晚期表型
图3，蛋白表达水平测定结果见表6。 和功能蛋白的表达，促进BMSCs的成骨转化 [23-26] 。而在
4 讨论 骨组织构建过程中，骨质的形成和吸收是同时发生的，
中医虽无OP的直接记载，但据OP的病因病机及临 骨构建过程处于失衡状态时，骨吸收显著高于骨形成，
床症状可知，其与中医学的“骨痹”“骨痿”非常相似 。 进而导致OP 。有细胞试验证实，BMP/Runx2/Osx信号
[16]
[27]
根据中医“肾主骨”的理论，肾精盛衰是诱发 OP 的重要 通路参与了淫羊藿总黄酮促BMSCs定向成骨分化的进
[17]
因素 ，故中医治疗多以补肾益精为主。西医治疗 OP 程，淫羊藿总黄酮能明显上调BMP-2的转录和表达 。
[10]
[2]
的方式主要包括给予雌二醇等骨吸收抑制剂 ，故本研 本研究结果显示，淫羊藿总黄酮可以升高PMOP模
究以其为阳性药对照。淫羊藿总黄酮是补肾中药淫羊 型大鼠股骨 BMD、血清钙离子，股骨 Tb.N 和 Tb.Th，降
藿中的一种有效成分，以其为主要成分的制剂（如淫羊 低股骨 Tb.Sp，增多且增宽骨小梁，上调骨组织中 BMP、
藿总黄酮胶囊）在临床上已用于 OP 的治疗。虽然有研 Runx2、Osx的mRNA及其蛋白的表达。以上结果提示，
中国药房 2020年第31卷第19期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 19 ·2337 ·