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2 方法                                                r/min离心15 min,制备PPP。
        2.1 水蛭的炮制                                           2.5.1 PT的测定      取50 µL的PPP,37 ℃温育3 min,加
                                   [1]
        2.1.1  吊干品    参考文献方法 ,取100 g水蛭药材去除                  入 PT 试剂 100 µL,混匀,静置,记录血浆凝固时间(即
        杂质(净制),切段,粉碎,过五号筛,得到水蛭吊干品。                          PT)。
        2.1.2  滑石粉烫制品        参考文献方法 ,将50 g滑石粉               2.5.2 APTT 的测定      取 PPP、APTT 试剂各 50 µL,混
                                         [12]
        置于锅内,武火加热至灵活状态后,加入水蛭吊干品                             匀,37 ℃温育3 min,加入氯化钙溶液50 µL,记录血浆凝
        100 g,不断翻动,烫至微鼓起时取出,筛去滑石粉,放凉,                       固时间(即APTT)。
        粉碎,过五号筛,得到水蛭滑石粉烫制品。                                 2.5.3 TT 的测定     取 100 µL 的 PPP,37 ℃温育 3 min,
                                        [13]
        2.1.3  酒润麸制品       参考文献方法 ,取 100 g 水蛭吊              加入TT试剂100 µL,混匀,静置,记录血浆凝固时间(即
        干品,切段,用 10 g 黄酒拌匀,闷润至透心;用中火将锅                       TT)。
        烧热,再将10 g麦麸皮均匀撒入锅内,待冒烟时,倒入酒                         2.6 统计学方法
        润水蛭段,拌炒至水蛭表面呈黄色,有特殊气味逸出时,                               采用SPSS 20.0软件对数据进行统计分析。数据以
        迅速取出,筛出焦麦麸,放凉,粉碎,过五号筛,得到水蛭
                                                            x±s 表示,多组样本间比较采用单因素方差分析,两两
        酒润麸制品。                                              比较采用 Dunnett-t 法。P<0.05 表示差异有统计学
        2.2 分组、造模与给药
                                                            意义。
                         [14]
            根据文献方法 ,所有大鼠适应性喂养7 d后,将其
                                                            3 结果
        随机分为12组,分别为空白组,模型组,阿司匹林组(阳
                                                            3.1  全血黏度和血浆黏度
        性对照),水蛭吊干品低、中、高剂量组,水蛭滑石粉烫制
                                                                与空白组比较,模型组大鼠低、中、高切变率下的全
        品低、中、高剂量组,水蛭酒润麸制品低、中、高剂量组,
                                                            血黏度和血浆黏度均显著升高(P<0.01)。与模型组比
        每组6只。除空白组大鼠皮下注射等体积生理盐水外,
                                                            较,阿司匹林组和水蛭吊干品、滑石粉烫制品、酒润麸制
        其余各组大鼠每日2次皮下注射盐酸肾上腺素0.9 mg/kg
                                                            品高剂量组大鼠低、中、高切变率下的全血黏度和血浆
        (溶剂为生理盐水,每次间隔 4 h),并在第 1 次皮下注射
                                                            黏度以及水蛭滑石粉烫制品低剂量组和水蛭酒润麸制
        2 h 后,将大鼠置于冰水浴中 4 min。重复上述操作 15 d
                                                            品中剂量组大鼠低、中切变率下的全血黏度均显著降低
        以复制急性血瘀模型          [14-16] 。从造模的第 8 天起,根据文
                                                           (P<0.05 或 P<0.01)。各组大鼠全血黏度和血浆黏度
              [8,9]
        献方法 设置给药剂量,水蛭炮制品各剂量组大鼠每日在
                                                            的检测结果见表1。
        第2次注射盐酸肾上腺素1 h后分别按0.35、1.4、3.5 g/kg
                                                            表1   各组大鼠全血黏度和血浆黏度的检测结果(x±±s,
        (以生药量计,溶剂为生理盐水)灌胃相应炮制品,阿司
                                                                 n=6,mPa·s)
        匹林组大鼠同时间段内按0.2 g/kg(溶剂为生理盐水)灌
        胃阿司匹林,空白组和模型组大鼠同时间段内灌胃等体                            Tab 1   Determination results of whole blood vi-
        积生理盐水,每日1次,连续8 d。                                           scosity and plasma viscosity of rats in each
        2.3  血样采集                                                   group(x±±s,n=6,mPa·s)
            末次给药第 2 天,所有大鼠均禁食不禁水 12 h,以                                             全血黏度
                                                            组别                -1       -1       -1   血浆黏度
        10%水合氯醛麻醉后,于腹主动脉取血约 8 mL,其中 4                                        10 s    60 s     150 s
                                                            空白组            11.65±0.52  6.35±0.03  4.77±0.24  1.06±0.03
        mL全血分装于肝素抗凝管中,其余4 mL全血加入3.2%                        模型组            16.90±0.07 **  8.69±0.08 **  6.55±0.12 **  1.23±0.06 **
        枸橼酸钠(血液与抗凝剂体积比为9∶1)抗凝。                              阿司匹林组          14.76±0.11 ##  7.06±0.07 ##  5.22±0.14 ##  1.09±0.03 ##
                                                            水蛭吊干品低剂量组      16.74±0.19  8.59±0.05  6.46±0.09  1.21±0.05
        2.4 血液流变学指标的检测
                                                            水蛭吊干品中剂量组      16.68±0.07  8.55±0.13  6.32±0.05 #  1.19±0.03
            打开血液流变仪,预温 15 min 至 37 ℃。取“2.3”项                水蛭吊干品高剂量组      15.48±0.09 ##  7.13±0.09 ##  5.57±0.10 ##  1.12±0.04 ##
                                                            水蛭滑石粉烫制品低剂量组   16.64±0.08 #  8.54±0.05 #  6.40±0.01  1.19±0.02
        下肝素抗凝管中的全血,混匀后取适量测定在低、中、高
                                                            水蛭滑石粉烫制品中剂量组   16.76±0.07  8.60±0.07  6.37±0.02  1.18±0.04
                           -1
        切变率(10、60、150 s )下的全血黏度,以及红细胞变                      水蛭滑石粉烫制品高剂量组   15.47±0.06 ##  8.53±0.14 #  5.42±0.11 ##  1.15±0.05 #
        形指数、红细胞聚集指数、红细胞压积;剩余全血经3 500                        水蛭酒润麸制品低剂量组    16.77±0.09  8.60±0.06  6.36±0.05  1.21±0.05
                                                            水蛭酒润麸制品中剂量组    15.99±0.25 ##  7.41±0.08 ##  6.36±0.05  1.17±0.02
        r/min离心 15 min,制备贫血小板血浆(PPP),测定血浆                   水蛭酒润麸制品高剂量组    15.96±0.28 ##  7.21±0.04 ##  5.41±0.08 ##  1.11±0.04 ##
        黏度。                                                    注:与空白组比较, P<0.01;与模型组比较,P<0.05,P<0.01
                                                                                                     ##
                                                                                              #
                                                                            **
        2.5  凝血指标的检测                                           Note:vs. blank group, * *  P<0.01;vs. model group, P<0.05,
                                                                                                     #
            取“2.3”项下经3.2%枸橼酸钠抗凝的全血,以3 500                   ## P<0.01
        ·1986 ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 16                                 中国药房    2020年第31卷第16期
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