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表达水平见表3。 表 3 PPP 作用下 PC3 细胞自噬相关蛋白的表达水平
（x±±s，n＝3）
Bax 21 kDa Tab 3 Expression of autophagy-related protein in
PC3 cells after treated with PPP（x±±s，n＝3）
Bcl-2 26 kDa 组别 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ Beclin-1 p62 Atg12 Atg16
对照组 0.349±0.045 0.523±0.204 1.252±0.546 0.520±0.160 0.433±0.081
PPP低质量浓度组 0.419±0.023 0.685±0.264 0.659±0.511 ＊ 0.500±0.167 0.501±0.042
GAPDH 36 kDa PPP中质量浓度组 0.565±0.106 0.955±0.305 ＊ 0.656±0.378 ＊ 0.725±0.215 0.515±0.133
PPP高质量浓度组 0.825±0.130 ＊ 1.181±0.350 ＊ 0.591±0.463 ＊ 0.963±0.086 ＊ 0.875±0.120 ＊
＊＊
对照组 低质量 中质量 高质量 注：与对照组比较，P＜0.05， P＜0.01
＊
浓度组 浓度组 浓度组
＊
Note：vs. control group， P＜0.05， P＜0.01
＊＊
PPP
图 4 PPP 作用下 PC3 细胞中凋亡相关蛋白表达的电 亡的作用 。细胞增殖抑制是药物抑制作用的综合性
[13]
泳图 表现之一，其机制可能与细胞凋亡、周期阻滞、坏死及衰
Fig 4 Electrophoretic diagrams of apoptosis-related 老等原因有关。有研究表明，干预及调节肿瘤细胞的周
protein expression in PC3 cells after treated 期进而阻滞其生长是目前肿瘤治疗的重要方法 。但
[14]
with PPP 目前并未见从分子机制方面报道PPP对人前列腺癌PC3
表 2 PPP 作用下 PC3 细胞凋亡相关蛋白的表达水平 细胞的促凋亡作用。因此，本研究采用CCK-8法检测了
（x±±s，n＝3） 不同质量浓度PPP对PC3细胞增殖活性的影响，结果显
Tab 2 Expression of apoptosis-related protein in PC3 示 PPP 能抑制 PC3 细胞增殖；当 PPP 质量浓度为 200～
cells after treated with PPP（x±±s，n＝3） 300 μg/mL、作用时间为48～72 h时，细胞增殖抑制率基
组别 Bax Bcl-2 本到达平台期，且IC50为110 μg/mL，因此以50、100、200
对照组 0.749±0.394 1.948±0.661 μg/mL的PPP作用48 h进行后续试验。细胞凋亡和周期
PPP低质量浓度组 0.793±0.259 1.598±0.570
阻滞试验的结果显示，PPP能有效阻滞PC3细胞由G0/G1
PPP中质量浓度组 0.825±0.386 1.217±0.020 ＊
PPP高质量浓度组 1.224±0.429 ＊ 1.136±0.132 ＊ 期向S期转化，阻止细胞生长，并诱导其凋亡。
现有研究表明，细胞凋亡与自噬活性的调控有关，
＊
＊＊
注：与对照组比较，P＜0.05， P＜0.01
＊＊
＊
Note：vs. control group， P＜0.05， P＜0.01 自噬水平的下调可以促进前列腺癌细胞的生长，通过药
物等干预方式上调自噬水平后，能诱导细胞凋亡 [15-17] 。
LC3-Ⅰ 16 kDa
在此基础上，本研究将 PPP 作用于 PC3 细胞，并通过检
LC3-Ⅱ 14 kDa
测细胞自噬水平来探索自噬活性对 PPP 诱导 PC3 细胞
凋亡的影响，为阐明PPP抑制肿瘤细胞增殖的机制提供
Beclin-1 60 kDa
依据。Bax和Bcl-2是细胞凋亡相关的重要标志性蛋白，
其中促凋亡蛋白 Bax 接收到诱导凋亡信号后，能激活
p62 60 kDa
Caspase家族从而导致细胞凋亡；而抗凋亡蛋白Bcl-2能
影响线粒体膜的通透性，从而抑制 Caspases 的激活，进
Atg12 53 kDa
[16]
而抑制细胞凋亡 。本研究结果显示，与对照组比较，
随着 PPP 质量浓度的升高，PC3 细胞中 Bax 的表达水平
Atg16 68 kDa
有不同程度的升高，Bcl-2 的表达水平有不同程度的降
低，表明PPP可诱导前列腺癌细胞的凋亡。
GAPDH 36 kDa 自噬本身作用机制及其在肿瘤中的作用非常复
杂 [18] ，作为诱导细胞发生自噬的标志性蛋白，LC3、
对照组 低质量 中质量 高质量
浓度组 浓度组 浓度组 Beclin-1是反映细胞自噬水平的重要标志 。其中，LC3
[19]
PPP 分为Ⅰ型和Ⅱ型，LC3-Ⅰ在磷脂酰乙醇胺的酯化作用下
图 5 PPP 作用下 PC3 细胞中自噬相关蛋白表达的电
转化为LC3-Ⅱ，而LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比例的升高是自噬水
泳图
[20]
平上升的标志 。另一自噬标志蛋白p62是细胞自噬的
Fig 5 Electrophoretic diagrams of autophagy-related
降解底物，当自噬作用增强时，p62 的降解增加，细胞中
protein expression in PC3 cells after treated 的 p62 蛋白表达水平随之下降 。在本研究中发现，与
[21]
with PPP
对照组相比，自噬主要标志蛋白 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和
4 讨论 Beclin-1表达水平在PPP各质量浓度组细胞中均有不同
研究发现，PPP 具有抑制肿瘤细胞增殖及促进其凋 程度的升高，表明细胞自噬水平升高；p62表达水平则显

·1982 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 16 中国药房 2020年第31卷第16期