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significantly(P<0.05). Compared with model group,the general condition and OGTT of mice in each administration group was
        improved;the contents of FINS and HDL-C in serum as well as ISI,the activities of SOD,CAT and GSH-Px as well as the
        protein expressions of PI3K,p-AKT and GLUT4 in pancreatic tissue were all increased significantly(P<0.05);the contents of
        FBG,LDL-C,TC and TG in serum as well as IRI,MDA content of pancreatic tissue were decreased significantly(P<0.05).
        CONCLUSIONS:PPLPs has anti-diabetic effects,which are related to reducting oxidative stress level and promoting the activation
        of PI3K/AKT/GLUT4 signaling pathway.
        KEYWORDS    Purple frutescens leaves polysaccharides;Oxidative stress;PI3K/AKT/GLUT4 signaling pathway;Diabetes;Mice


            糖尿病在当前世界范围内呈现广泛流行趋势,已成                         1.2 药品与试剂
                                                     [1]
        为威胁人类健康的最重要的慢性非传染性疾病之一 。                               紫苏叶药材于 2018 年 8 月采摘自吉林省吉林市地
        国际糖尿病联盟2019年的统计数据表明,全球糖尿病患                         区,经北华大学药学院苑广信教授鉴定为唇形科植物紫
        者人数已高达4.63亿人,而到2045年这一数据将增长至                       苏[P. frutescens(L.)Britt.]的叶片;盐酸二甲双胍片(中
             [2]
        7 亿人 。糖尿病患病率的日益增长给社会带来了沉重                          美上海施贵宝公司,批号:20190427,规格:0.5 g);链脲
        的负担。双胍类、葡萄糖苷酶抑制剂类、格列奈类、磺酰                          佐菌素(STZ)对照品(美国 Sigma 公司,批号:S0130,纯
        脲类药物是目前临床应用的主要口服降糖药,虽具有一                           度:≥98%);空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)测定

        定的降糖作用,但同时也存在着低血糖、肾毒性及肝毒                           试剂盒(湖南三诺生物公司,批号:190116、190223);高
        性等多种副作用 。而中药治疗糖尿病及其并发症历史                           密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇
                      [3]
        悠久,具有低毒副作用、疗效明确等优势 。                               (LDL-C)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)测定试剂盒
                                          [4]
            紫苏叶为唇形科植物紫苏[Perilla frutescens(L.)             (泉 州 睿 信 生 物 科 技 有 限 公 司 ,批 号 :20190415、
        Britt.]的干燥叶(或带嫩枝),具有调节糖脂代谢、抗氧                      20190426、20190302、20190517);丙二醛(MDA)、超氧
        化、抗抑郁、止咳平喘、解热、镇静等多种功效,其中所含                         化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧
        的多糖类、挥发油类、黄酮类、酚酸类及脂肪酸类成分是                          化物酶(GSH-Px)测定试剂盒(南京建成生物工程研究
                      [5]
        其主要活性成分 。有研究发现,给予自发性糖尿病模                           所,批号:20180908、20181120、20191120、20181018);兔
        型大鼠紫苏茶叶后,可延缓其糖尿病的发生 。并且已                           源 PI3K、磷酸化 AKT(p-AKT)、GLUT4 多克隆抗体(美
                                              [6]
        有研究报道,紫苏叶总黄酮提取物可调节糖尿病模型小                           国 Abcam 公司,批号:ab140307、ab8805、ab654);兔源β-
        鼠糖脂代谢紊乱,具有较好的抗糖尿病作用 。然而,                           肌动蛋白(β-actin)多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记的
                                               [7]
        作为紫苏叶中主要活性成分之一的多糖类成分是否具                            山羊抗兔免疫球蛋白G(IgG)二抗(杭州景杰生物公司,
        有抗糖尿病作用目前尚未见报道。氧化应激和磷酸肌                            批号:180526、180603);其余试剂均为分析纯或实验室
        醇-3-激酶(PI3K)/苏氨酸蛋白激酶(AKT)/葡萄糖转运                    常用规格,水为蒸馏水。
        蛋白 4(GLUT4)信号通路在糖尿病的发生发展中扮演                        1.3  动物
        着重要角色     [8-9] 。因此,本研究主要研究紫苏叶多糖对糖                     SPF级昆明种小鼠70只,雄性,体质量为18~22 g,
        尿病模型小鼠是否具有改善作用,并明确该作用与氧化                           购自吉林大学实验动物中心,实验动物生产许可证号:
        应激及PI3K/AKT/GLUT4信号通路的关联性,初步阐明                     SCXK(吉)2016-0001。饲养环境温度为 20~25 ℃、相
        其抗糖尿病的作用及机制,为其进一步的临床应用奠定                           对湿度为40%~70%,饲养期间小鼠自由饮食。本实验
        基础。                                                经吉林市化工医院实验动物伦理委员会批准,按照中国
        1 材料                                               伦理委员会有关动物研究指导原则开展。

        1.1 仪器                                             2 方法
            AL204 型 分 析 天 平(德 国 Mettler-Toledo 公 司);       2.1 紫苏叶多糖的制备
        AU600型全自动生化分析仪(日本Olympus公司);1800                       将采摘的紫苏叶清洗、沥干和干燥后,粉碎过 40 目
        型酶标仪(上海闪谱科技生物有限公司);T6 型紫外-可                        筛。称取 500 g 紫苏叶粉末,加入 10 倍体积(mL/g)水,
        见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);Uni-                        在 80 ℃水浴条件下浸提 6 h,滤过。滤液加入 3 倍体积
        versal Hood Ⅱ型凝胶成像系统、170-3930型蛋白电泳及                的无水乙醇进行沉淀,再经 4%H2O2溶液脱色及 Sevag
                                                                                                       [11]
                                                                    [10]
        转印仪(美国 Bio-Rad 公司);卓越纤巧型血糖仪(瑞士                     法除蛋白 ,最终制得紫苏叶多糖,经苯酚-硫酸法 检
        Roche公司)。                                          测其多糖含量为75.6%。

        中国药房    2020年第31卷第15期                                             China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 15  ·1875  ·
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