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significantly(P<0.05). Compared with model group,the general condition and OGTT of mice in each administration group was
improved;the contents of FINS and HDL-C in serum as well as ISI,the activities of SOD,CAT and GSH-Px as well as the
protein expressions of PI3K,p-AKT and GLUT4 in pancreatic tissue were all increased significantly(P<0.05);the contents of
FBG,LDL-C,TC and TG in serum as well as IRI,MDA content of pancreatic tissue were decreased significantly(P<0.05).
CONCLUSIONS:PPLPs has anti-diabetic effects,which are related to reducting oxidative stress level and promoting the activation
of PI3K/AKT/GLUT4 signaling pathway.
KEYWORDS Purple frutescens leaves polysaccharides;Oxidative stress;PI3K/AKT/GLUT4 signaling pathway;Diabetes;Mice
糖尿病在当前世界范围内呈现广泛流行趋势,已成 1.2 药品与试剂
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为威胁人类健康的最重要的慢性非传染性疾病之一 。 紫苏叶药材于 2018 年 8 月采摘自吉林省吉林市地
国际糖尿病联盟2019年的统计数据表明,全球糖尿病患 区,经北华大学药学院苑广信教授鉴定为唇形科植物紫
者人数已高达4.63亿人,而到2045年这一数据将增长至 苏[P. frutescens(L.)Britt.]的叶片;盐酸二甲双胍片(中
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7 亿人 。糖尿病患病率的日益增长给社会带来了沉重 美上海施贵宝公司,批号:20190427,规格:0.5 g);链脲
的负担。双胍类、葡萄糖苷酶抑制剂类、格列奈类、磺酰 佐菌素(STZ)对照品(美国 Sigma 公司,批号:S0130,纯
脲类药物是目前临床应用的主要口服降糖药,虽具有一 度:≥98%);空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)测定
定的降糖作用,但同时也存在着低血糖、肾毒性及肝毒 试剂盒(湖南三诺生物公司,批号:190116、190223);高
性等多种副作用 。而中药治疗糖尿病及其并发症历史 密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇
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悠久,具有低毒副作用、疗效明确等优势 。 (LDL-C)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)测定试剂盒
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紫苏叶为唇形科植物紫苏[Perilla frutescens(L.) (泉 州 睿 信 生 物 科 技 有 限 公 司 ,批 号 :20190415、
Britt.]的干燥叶(或带嫩枝),具有调节糖脂代谢、抗氧 20190426、20190302、20190517);丙二醛(MDA)、超氧
化、抗抑郁、止咳平喘、解热、镇静等多种功效,其中所含 化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧
的多糖类、挥发油类、黄酮类、酚酸类及脂肪酸类成分是 化物酶(GSH-Px)测定试剂盒(南京建成生物工程研究
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其主要活性成分 。有研究发现,给予自发性糖尿病模 所,批号:20180908、20181120、20191120、20181018);兔
型大鼠紫苏茶叶后,可延缓其糖尿病的发生 。并且已 源 PI3K、磷酸化 AKT(p-AKT)、GLUT4 多克隆抗体(美
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有研究报道,紫苏叶总黄酮提取物可调节糖尿病模型小 国 Abcam 公司,批号:ab140307、ab8805、ab654);兔源β-
鼠糖脂代谢紊乱,具有较好的抗糖尿病作用 。然而, 肌动蛋白(β-actin)多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记的
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作为紫苏叶中主要活性成分之一的多糖类成分是否具 山羊抗兔免疫球蛋白G(IgG)二抗(杭州景杰生物公司,
有抗糖尿病作用目前尚未见报道。氧化应激和磷酸肌 批号:180526、180603);其余试剂均为分析纯或实验室
醇-3-激酶(PI3K)/苏氨酸蛋白激酶(AKT)/葡萄糖转运 常用规格,水为蒸馏水。
蛋白 4(GLUT4)信号通路在糖尿病的发生发展中扮演 1.3 动物
着重要角色 [8-9] 。因此,本研究主要研究紫苏叶多糖对糖 SPF级昆明种小鼠70只,雄性,体质量为18~22 g,
尿病模型小鼠是否具有改善作用,并明确该作用与氧化 购自吉林大学实验动物中心,实验动物生产许可证号:
应激及PI3K/AKT/GLUT4信号通路的关联性,初步阐明 SCXK(吉)2016-0001。饲养环境温度为 20~25 ℃、相
其抗糖尿病的作用及机制,为其进一步的临床应用奠定 对湿度为40%~70%,饲养期间小鼠自由饮食。本实验
基础。 经吉林市化工医院实验动物伦理委员会批准,按照中国
1 材料 伦理委员会有关动物研究指导原则开展。
1.1 仪器 2 方法
AL204 型 分 析 天 平(德 国 Mettler-Toledo 公 司); 2.1 紫苏叶多糖的制备
AU600型全自动生化分析仪(日本Olympus公司);1800 将采摘的紫苏叶清洗、沥干和干燥后,粉碎过 40 目
型酶标仪(上海闪谱科技生物有限公司);T6 型紫外-可 筛。称取 500 g 紫苏叶粉末,加入 10 倍体积(mL/g)水,
见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);Uni- 在 80 ℃水浴条件下浸提 6 h,滤过。滤液加入 3 倍体积
versal Hood Ⅱ型凝胶成像系统、170-3930型蛋白电泳及 的无水乙醇进行沉淀,再经 4%H2O2溶液脱色及 Sevag
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转印仪(美国 Bio-Rad 公司);卓越纤巧型血糖仪(瑞士 法除蛋白 ,最终制得紫苏叶多糖,经苯酚-硫酸法 检
Roche公司)。 测其多糖含量为75.6%。
中国药房 2020年第31卷第15期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 15 ·1875 ·