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下其他色谱条件不变的情况下,分别在不同浓度流动相                            表4   虎掌南星生品及不同炮制品中5种核苷类成分的
        B(0.08%、0.10%、0.12%乙酸水溶液)、不同流速(0.7、                      含量测定结果(n=3,mg/g)
        0.8、0.9 mL/min)、不同柱温(25、30、35 ℃)条件下进样测              Tab 4 Content determination results of 5 kinds of nu-
        定,记录峰面积,并根据标准曲线计算样品中5种核苷类                                  cleosides in raw and different processed pro-
        成分的含量。结果,在不同条件下测得的5种核苷类成                                   ducts of P. pedatisecta(n=3,mg/g)
        分含量的 RSD 均小于 3%(n=3),表明该方法耐用性良                      样品          编号  腺嘌呤   次黄嘌呤  尿苷  黄嘌呤   肌苷  核苷总含量
        好,能满足含量测定的要求。                                       生品           S1  0.176 9  0.075 6  0.196 9  0.914 7  0.036 0  1.400 1
                                                                         S2  0.172 0  0.073 8  0.191 9  0.966 1  0.038 3  1.442 1
        2.3.11  样品含量测定        分别取虎掌南星生品和 2 种不                            S3  0.176 5  0.076 6  0.189 0  0.925 4  0.037 6  1.405 1
        同炮制品(各12批)适量,按“2.2.2”项下方法制备供试品                                   S4  0.182 5  0.076 8  0.194 4  0.906 8  0.040 3  1.400 9
        溶液,然后按“2.2.1”项下色谱条件进样测定,记录峰面                                     S5  0.182 7  0.074 3  0.186 8  0.941 4  0.034 8  1.420 1
                                                                         S6  0.175 9  0.075 9  0.189 5  0.974 5  0.035 5  1.451 3
        积,并根据标准曲线计算样品中 5 种核苷类成分的含                                        S7  0.167 3  0.074 0  0.186 5  0.879 4  0.035 8  1.342 7
        量。每批样品测定3次,取平均值,结果见表4。                                           S8  0.171 4  0.072 4  0.179 4  0.932 2  0.036 8  1.392 2
            表4结果显示,生品中黄嘌呤的含量最高,平均含量                                      S9  0.177 9  0.072 7  0.187 2  0.981 7  0.036 4  1.455 9
                                                                        S10  0.175 8  0.075 2  0.187 5  0.874 6  0.036 7  1.349 9
        为 0.922 5 mg/g;《规范》炮制品和一体化新工艺炮制品
                                                                        S11  0.176 0  0.073 5  0.186 4  0.868 3  0.034 3  1.338 5
        中黄嘌呤的平均含量分别为 0.042 5、0.065 3 mg/g。《规                            S12  0.181 6  0.078 7  0.189 5  0.904 3  0.040 8  1.394 9
        范》炮制品和一体化新工艺炮制品中,肌苷的平均含量                                        平均值  0.176 4  0.075 0  0.188 7  0.922 5  0.036 9  1.399 5
                                                            《规范》炮制品      C1  0.076 7  0.053 2  0.023 7  0.039 8  0.484 4  0.677 8
        分别为 0.468 8、0.518 6 mg/g,约为生品的 13 倍;而腺嘌
                                                                         C2  0.079 7  0.052 2  0.023 4  0.040 1  0.452 0  0.647 4
        呤、尿苷、黄嘌呤的含量较生品明显降低。一体化新工                                         C3  0.080 6  0.053 9  0.024 2  0.041 3  0.459 8  0.659 7
        艺炮制品中,腺嘌呤、次黄嘌呤、黄嘌呤、肌苷的含量均                                        C4  0.077 8  0.052 3  0.024 1  0.043 3  0.468 3  0.665 8
                                                                         C5  0.082 7  0.052 0  0.023 4  0.041 4  0.477 9  0.677 3
        比《规范》炮制品略高,而尿苷的含量差异很小。
                                                                         C6  0.087 4  0.052 6  0.024 0  0.045 3  0.493 7  0.703 0
        2.4  虎掌南星不同工艺样品的聚类分析                                             C7  0.086 0  0.051 5  0.025 1  0.043 6  0.455 6  0.661 9
            以虎掌南星样品中腺嘌呤、次黄嘌呤、尿苷、黄嘌                                       C8  0.082 7  0.051 4  0.025 3  0.043 6  0.466 9  0.669 9
                                                                         C9  0.072 5  0.049 8  0.022 9  0.042 3  0.447 8  0.635 2
        呤、肌苷的含量为原始数据,运用 SPSS 21.0软件中的质
                                                                        C10  0.082 5  0.050 6  0.024 4  0.041 5  0.470 1  0.669 1
        心聚类法,以欧式距离为度量标准区间,对36批虎掌南                                       C11  0.081 3  0.049 7  0.025 7  0.045 2  0.465 2  0.667 1
        星样品进行聚类分析,结果见图6。                                                C12  0.079 2  0.051 8  0.024 8  0.042 4  0.483 7  0.681 9
                                                                        平均值  0.080 8  0.051 7  0.024 2  0.042 5  0.468 8  0.668 0
            由图6可知,36批虎掌南星样品共聚为2类:虎掌南
                                                            一体化新工艺炮制品    Y1  0.095 9  0.079 1  0.020 7  0.065 4  0.518 7  0.779 8
        星生品聚为一类;2 种炮制品聚为另一类。以上结果提                                        Y2  0.102 9  0.078 6  0.021 2  0.063 0  0.522 9  0.788 5
        示,虎掌南星生品与不同炮制品之间的核苷类成含量存                                         Y3  0.095 9  0.079 5  0.021 1  0.064 6  0.535 8  0.796 9
                                                                         Y4  0.094 3  0.076 9  0.019 7  0.063 6  0.531 1  0.785 5
        在差异,也提示2种工艺所炮制的饮片质量较接近。
                                                                         Y5  0.104 3  0.077 8  0.023 7  0.065 7  0.532 0  0.801 5
        3 讨论                                                             Y6  0.100 9  0.079 6  0.021 9  0.061 0  0.538 7  0.802 1
            据文献报道,虎掌南星水提物中富含核苷类成分,                                       Y7  0.092 6  0.077 5  0.021 2  0.064 0  0.495 3  0.750 6
                                                                         Y8  0.103 7  0.078 0  0.021 0  0.066 9  0.490 9  0.760 5
        而核苷类成分可参与DNA代谢过程,具有抗肿瘤、抗病
                                                                         Y9  0.097 8  0.078 7  0.022 4  0.071 9  0.506 3  0.776 2
        毒、抗心律失常等多种生物活性,是生物细胞维持生命                                        Y10  0.101 3  0.077 5  0.020 3  0.062 4  0.505 4  0.766 9
        活动的基本组成元素 ,其含量的升高或降低对于糖代                                        Y11  0.093 2  0.075 6  0.021 5  0.067 1  0.528 4  0.785 8
                           [15]
                                                                        Y12  0.095 8  0.076 1  0.020 9  0.068 2  0.517 6  0.778 6
                                               [21]
        谢、酶活性改变、受损肝脏的恢复有显著影响 。目前,
                                                                        平均值  0.098 2  0.077 9  0.021 0  0.065 3  0.518 6  0.781 1
        虎掌南星多采用水浸泡加热的方式炮制,而核苷类为水
                                                            腺苷和胸腺嘧啶在炮制后几乎检测不到。针对此现象,
        溶性成分,且性质不稳定,在炮制过程中易发生水解 。
                                                     [22]
                                                            笔者推测可能有以下两个方面的原因:一方面可能与煎
        笔者通过前期预试验发现,加热温度、加热时间和浸泡
                                                            煮时间及煎煮方式有关;另一方面可能是由于白矾溶液
        天数是影响水溶性成分含量的主要因素。由本研究结
                                                            呈酸性,而核苷呈碱性,炮制过程中两者发生了化学反
        果中不同样品的色谱图也可知,虎掌南星中核苷类成分
        的色谱峰出峰时间多集中于前15 min,此时水相的比例                         应。此外,由于传统工艺是由生品加水浸泡至内无干心
        较大,且生品中该时段的色谱峰多而高,而炮制品中该                            后与辅料常压煮沸,在反复换水浸泡的过程中,溶于水
        时段色谱峰峰面积减小甚至部分峰消失。这提示虎掌                             的核苷类成分会随之流失。而本课题组建立的一体化
        南星炮制后的化学成分不仅发生了量的改变,同时其种                            新工艺是将药材鲜品直接进行加压蒸煮,避免了药材重
        类也发生了显著的变化。对比生品和不同炮制品的色                             复换水处理的过程,最大程度地减少了有效成分的流
        谱图,发现炮制品中除肌苷的含量有大幅度升高外,腺                            失,故而采用该法炮制的样品中核苷类成分的总含量比
        嘌呤、尿苷、黄嘌呤的含量均明显降低,且尿嘧啶、鸟苷、                         《规范》炮制品高。与生品比较,不同工艺炮制品中肌苷


        ·1606  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 13                                中国药房    2020年第31卷第13期
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