Page 76 - 202013
P. 76
下其他色谱条件不变的情况下,分别在不同浓度流动相 表4 虎掌南星生品及不同炮制品中5种核苷类成分的
B(0.08%、0.10%、0.12%乙酸水溶液)、不同流速(0.7、 含量测定结果(n=3,mg/g)
0.8、0.9 mL/min)、不同柱温(25、30、35 ℃)条件下进样测 Tab 4 Content determination results of 5 kinds of nu-
定,记录峰面积,并根据标准曲线计算样品中5种核苷类 cleosides in raw and different processed pro-
成分的含量。结果,在不同条件下测得的5种核苷类成 ducts of P. pedatisecta(n=3,mg/g)
分含量的 RSD 均小于 3%(n=3),表明该方法耐用性良 样品 编号 腺嘌呤 次黄嘌呤 尿苷 黄嘌呤 肌苷 核苷总含量
好,能满足含量测定的要求。 生品 S1 0.176 9 0.075 6 0.196 9 0.914 7 0.036 0 1.400 1
S2 0.172 0 0.073 8 0.191 9 0.966 1 0.038 3 1.442 1
2.3.11 样品含量测定 分别取虎掌南星生品和 2 种不 S3 0.176 5 0.076 6 0.189 0 0.925 4 0.037 6 1.405 1
同炮制品(各12批)适量,按“2.2.2”项下方法制备供试品 S4 0.182 5 0.076 8 0.194 4 0.906 8 0.040 3 1.400 9
溶液,然后按“2.2.1”项下色谱条件进样测定,记录峰面 S5 0.182 7 0.074 3 0.186 8 0.941 4 0.034 8 1.420 1
S6 0.175 9 0.075 9 0.189 5 0.974 5 0.035 5 1.451 3
积,并根据标准曲线计算样品中 5 种核苷类成分的含 S7 0.167 3 0.074 0 0.186 5 0.879 4 0.035 8 1.342 7
量。每批样品测定3次,取平均值,结果见表4。 S8 0.171 4 0.072 4 0.179 4 0.932 2 0.036 8 1.392 2
表4结果显示,生品中黄嘌呤的含量最高,平均含量 S9 0.177 9 0.072 7 0.187 2 0.981 7 0.036 4 1.455 9
S10 0.175 8 0.075 2 0.187 5 0.874 6 0.036 7 1.349 9
为 0.922 5 mg/g;《规范》炮制品和一体化新工艺炮制品
S11 0.176 0 0.073 5 0.186 4 0.868 3 0.034 3 1.338 5
中黄嘌呤的平均含量分别为 0.042 5、0.065 3 mg/g。《规 S12 0.181 6 0.078 7 0.189 5 0.904 3 0.040 8 1.394 9
范》炮制品和一体化新工艺炮制品中,肌苷的平均含量 平均值 0.176 4 0.075 0 0.188 7 0.922 5 0.036 9 1.399 5
《规范》炮制品 C1 0.076 7 0.053 2 0.023 7 0.039 8 0.484 4 0.677 8
分别为 0.468 8、0.518 6 mg/g,约为生品的 13 倍;而腺嘌
C2 0.079 7 0.052 2 0.023 4 0.040 1 0.452 0 0.647 4
呤、尿苷、黄嘌呤的含量较生品明显降低。一体化新工 C3 0.080 6 0.053 9 0.024 2 0.041 3 0.459 8 0.659 7
艺炮制品中,腺嘌呤、次黄嘌呤、黄嘌呤、肌苷的含量均 C4 0.077 8 0.052 3 0.024 1 0.043 3 0.468 3 0.665 8
C5 0.082 7 0.052 0 0.023 4 0.041 4 0.477 9 0.677 3
比《规范》炮制品略高,而尿苷的含量差异很小。
C6 0.087 4 0.052 6 0.024 0 0.045 3 0.493 7 0.703 0
2.4 虎掌南星不同工艺样品的聚类分析 C7 0.086 0 0.051 5 0.025 1 0.043 6 0.455 6 0.661 9
以虎掌南星样品中腺嘌呤、次黄嘌呤、尿苷、黄嘌 C8 0.082 7 0.051 4 0.025 3 0.043 6 0.466 9 0.669 9
C9 0.072 5 0.049 8 0.022 9 0.042 3 0.447 8 0.635 2
呤、肌苷的含量为原始数据,运用 SPSS 21.0软件中的质
C10 0.082 5 0.050 6 0.024 4 0.041 5 0.470 1 0.669 1
心聚类法,以欧式距离为度量标准区间,对36批虎掌南 C11 0.081 3 0.049 7 0.025 7 0.045 2 0.465 2 0.667 1
星样品进行聚类分析,结果见图6。 C12 0.079 2 0.051 8 0.024 8 0.042 4 0.483 7 0.681 9
平均值 0.080 8 0.051 7 0.024 2 0.042 5 0.468 8 0.668 0
由图6可知,36批虎掌南星样品共聚为2类:虎掌南
一体化新工艺炮制品 Y1 0.095 9 0.079 1 0.020 7 0.065 4 0.518 7 0.779 8
星生品聚为一类;2 种炮制品聚为另一类。以上结果提 Y2 0.102 9 0.078 6 0.021 2 0.063 0 0.522 9 0.788 5
示,虎掌南星生品与不同炮制品之间的核苷类成含量存 Y3 0.095 9 0.079 5 0.021 1 0.064 6 0.535 8 0.796 9
Y4 0.094 3 0.076 9 0.019 7 0.063 6 0.531 1 0.785 5
在差异,也提示2种工艺所炮制的饮片质量较接近。
Y5 0.104 3 0.077 8 0.023 7 0.065 7 0.532 0 0.801 5
3 讨论 Y6 0.100 9 0.079 6 0.021 9 0.061 0 0.538 7 0.802 1
据文献报道,虎掌南星水提物中富含核苷类成分, Y7 0.092 6 0.077 5 0.021 2 0.064 0 0.495 3 0.750 6
Y8 0.103 7 0.078 0 0.021 0 0.066 9 0.490 9 0.760 5
而核苷类成分可参与DNA代谢过程,具有抗肿瘤、抗病
Y9 0.097 8 0.078 7 0.022 4 0.071 9 0.506 3 0.776 2
毒、抗心律失常等多种生物活性,是生物细胞维持生命 Y10 0.101 3 0.077 5 0.020 3 0.062 4 0.505 4 0.766 9
活动的基本组成元素 ,其含量的升高或降低对于糖代 Y11 0.093 2 0.075 6 0.021 5 0.067 1 0.528 4 0.785 8
[15]
Y12 0.095 8 0.076 1 0.020 9 0.068 2 0.517 6 0.778 6
[21]
谢、酶活性改变、受损肝脏的恢复有显著影响 。目前,
平均值 0.098 2 0.077 9 0.021 0 0.065 3 0.518 6 0.781 1
虎掌南星多采用水浸泡加热的方式炮制,而核苷类为水
腺苷和胸腺嘧啶在炮制后几乎检测不到。针对此现象,
溶性成分,且性质不稳定,在炮制过程中易发生水解 。
[22]
笔者推测可能有以下两个方面的原因:一方面可能与煎
笔者通过前期预试验发现,加热温度、加热时间和浸泡
煮时间及煎煮方式有关;另一方面可能是由于白矾溶液
天数是影响水溶性成分含量的主要因素。由本研究结
呈酸性,而核苷呈碱性,炮制过程中两者发生了化学反
果中不同样品的色谱图也可知,虎掌南星中核苷类成分
的色谱峰出峰时间多集中于前15 min,此时水相的比例 应。此外,由于传统工艺是由生品加水浸泡至内无干心
较大,且生品中该时段的色谱峰多而高,而炮制品中该 后与辅料常压煮沸,在反复换水浸泡的过程中,溶于水
时段色谱峰峰面积减小甚至部分峰消失。这提示虎掌 的核苷类成分会随之流失。而本课题组建立的一体化
南星炮制后的化学成分不仅发生了量的改变,同时其种 新工艺是将药材鲜品直接进行加压蒸煮,避免了药材重
类也发生了显著的变化。对比生品和不同炮制品的色 复换水处理的过程,最大程度地减少了有效成分的流
谱图,发现炮制品中除肌苷的含量有大幅度升高外,腺 失,故而采用该法炮制的样品中核苷类成分的总含量比
嘌呤、尿苷、黄嘌呤的含量均明显降低,且尿嘧啶、鸟苷、 《规范》炮制品高。与生品比较,不同工艺炮制品中肌苷
·1606 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 13 中国药房 2020年第31卷第13期