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0.10
C12 0.08
C11
C10 mV 0.06
C9 U, 0.04
mV C8
U, C7 0.02
C6 0
C5
C4 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70
C3 t,min
C2
C1
0 10.87 21.74 32.62 43.43 54.36 65.23 76.10 注:3.腺嘌呤;4.尿嘧啶;7.次黄嘌呤;8.尿苷;9.黄嘌呤;11.肌苷;
t,min 12.鸟苷;13.腺苷;15.胸腺嘧啶
A.叠加指纹图谱
Note:3. adenine;4. uracil;7. hypoxanthine;8. uridine;9. xan-
thine;11. inosine;12. guanosine;13. adenosine;15. thymine
79.22
图4 混合对照品溶液的HPLC图
mV 38.98 Fig 4 HPLC chromatogram of mixed control solution
U,
表1 虎掌南星生品及不同炮制品的相似度评价结果
-1.27
0 10.87 21.74 32.62 43.43 54.36 65.23 76.10 Tab 1 Similarity evaluation results of raw and dif-
t,min
B.对照指纹图谱 ferent processed products of P. pedatisecta
图2 12批虎掌南星《规范》炮制品的HPLC叠加指纹图 生品 《规范》炮制品 一体化新工艺炮制品
编号 相似度 编号 相似度 编号 相似度
谱及对照指纹图谱
S1 0.999 C1 0.997 Y1 0.998
Fig 2 HPLC superimposed fingerprints and control S2 0.999 C2 0.993 Y2 0.997
fingerprint of 12 batches of P. pedatisecta pro- S3 0.999 C3 0.995 Y3 0.994
cessed products by Standard S4 0.997 C4 0.999 Y4 0.997
S5 0.999 C5 0.999 Y5 0.998
S6 0.996 C6 0.993 Y6 0.993
S7 0.999 C7 0.997 Y7 0.993
Y12
Y11 S8 0.992 C8 0.998 Y8 0.992
Y10 S9 0.999 C9 0.995 Y9 0.993
Y9
Y8 S10 0.999 C10 0.999 Y10 0.999
mV Y7
U, Y6 S11 0.995 C11 0.996 Y11 0.998
Y5 S12 0.997 C12 0.995 Y12 0.994
Y4
Y3
Y2 嘌呤、次黄嘌呤、尿苷、黄嘌呤、肌苷线性关系考察的母
Y1
0 10.87 21.74 32.62 43.43 54.36 65.23 76.10 液)。混合对照品溶液①中腺嘌呤质量浓度为 0.043 85
t,min
A.叠加指纹图谱 mg/mL,混合对照品溶液②中次黄嘌呤质量浓度为
0.025 64 mg/mL,混合对照品溶液③中尿苷质量浓度为
0.019 28 mg/mL,混合对照品溶液④中黄嘌呤质量浓度
36.07
mV 为 0.080 40 mg/mL,混合对照品溶液⑤中肌苷质量浓度
U,
-0.06 为 0.047 72 mg/mL。(3)阴 性 对 照 溶 液 :以 水 为 阴 性
0 10.87 21.74 32.62 43.43 54.36 65.23 76.10 对照。
t,min
B.对照指纹图谱 2.3.3 色谱条件与系统适用性试验 取“2.3.2”项下混
图3 12批虎掌南星一体化新工艺炮制品的HPLC叠加 合对照品溶液②、供试品溶液(编号:Y1)和阴性对照溶
指纹图谱及对照指纹图谱 液各适量,按“2.2.1”项下色谱条件进样分析,记录色谱
Fig 3 HPLC superimposed fingerprints and control 图。结果显示,5 种核苷类成分的色谱峰与其相邻峰间
fingerprint of 12 batches of P. pedatisecta pro- 的分离度均大于 1.5,理论板数均不低于 10 000,且阴性
cessed products by new integrated technology 对照溶液对测定无干扰,详见图5。
法制备。(2)混合对照品溶液:分别精密称定腺嘌呤、次 2.3.4 线性关系考察 精密吸取“2.3.2”项下混合对照
黄嘌呤、尿苷、黄嘌呤、肌苷对照品适量,置于同一10 mL 品溶液①~⑤适量,分别逐级稀释 1、2、10、20、30 倍后,
量瓶中,加水溶解并定容至刻度,得到上述5种成分质量 按“2.2.1”项下色谱条件进样测定,记录色谱图。以对照
浓度分别为2.193、1.282、0.964、1.608、1.909 mg/mL的混 品峰面积为纵坐标(y)、质量浓度为横坐标(x)绘制标准
合对照品贮备液;分别精密量取该贮备液 0.20、0.20、 曲线,并计算回归方程。结果显示,腺嘌呤、次黄嘌呤、
0.20、0.50、0.25 mL,置于不同10 mL量瓶中,加水稀释并 尿苷、黄嘌呤、肌苷分别在各自的质量浓度范围内具有
定容至刻度,得到混合对照品溶液①~⑤(分别用作腺 良好的线性关系(r均不小于0.999 8),结果见表2。
·1604 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 13 中国药房 2020年第31卷第13期