Page 69 - 2020年2月第31卷第3期

球较相应空白组明显减小，数量明显减少，提示瓜蒂两
EGFR 157 kD
种提取物均能有效降低食管癌细胞克隆形成能力。
细胞周期是细胞生命活动的基本过程，细胞分裂增
PKC-α 75 kD
殖必须通过两个关键的周期调控点，即 G1和 G2期调控
β-actin 43 kD 点。肿瘤细胞周期调控点失调、凋亡受到抑制，造成肿
EC-1瓜蒂水提物组
TE-1空白组 TE-1瓜蒂醇提物组 EC-1空白组 EC-1瓜蒂醇提物组 瘤细胞过度增殖，病情进一步发展和恶化。几乎所有的
TE-1瓜蒂水提物组
癌基因、抑癌基因的功能效应均与细胞周期机制有关，
A. TE-1细胞 B. EC-1细胞 肿瘤可归属于一类细胞周期疾病 [21-22] 。在本研究中发
图5 各组细胞中EGFR、PKC-α蛋白表达的电泳图 现，以瓜蒂水提物和醇提物作用后，两种细胞分裂被明
Fig 5 Electrophoretograms of protein expression of 显阻滞在G2期且细胞早期和晚期凋亡率明显上升，其中
EGFR and PKC-α in cells in each group 晚期凋亡率高于早期凋亡率。对于不同细胞，瓜蒂提取

表 5 各组细胞 EGFR、PKC-α蛋白相对表达量的测定 物诱导凋亡的效果不同：在TE-1细胞中，瓜蒂水提物诱
结果（x±±s，n＝3） 导凋亡的效果强于醇提物；而在EC-1细胞中，则是瓜蒂
Tab 5 Relative protein expression of EGFR and PKC- 醇提物诱导凋亡效果强于水提物。流式细胞周期和凋
α in cells in each group（x±±s，n＝3） 亡试验结果提示瓜蒂水提物和醇提取物均可通过阻滞
细胞周期、诱导细胞凋亡，以此来达到抑制两种食管癌
组别 EGFR/β-actin PKC-α/β-actin
TE-1空白组 3.09±0.19 2.73±0.16 细胞的目的。
TE-1瓜蒂水提物组 2.08±0.11 ＊＊ 0.75±0.08 ＊＊ EGFR 是原癌基因 Cerb B-1 的表达产物，是一种具
TE-1瓜蒂醇提物组 1.11±0.12 ＊＊## 0.60±0.09 ＊＊##
EC-1空白组 2.97±0.06 1.86±0.13 有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白，与相应配体结合后，
EC-1瓜蒂水提物组 2.15±0.09 ＊＊ 0.86±0.07 ＊＊ 其信号通路可调控细胞的增殖、凋亡、血管形成及侵袭
EC-1瓜蒂醇提物组 1.20±0.07 ＊＊## 0.35±0.06 ＊＊## [23]
转移等生命活动 。多种恶性肿瘤中均可检测到EGFR
注：与 TE-1/EC-1 空白组比较， P＜0.01；与 TE-1/EC-1 瓜蒂水提
＊＊
的过度表达，研究发现 EGFR 在食管癌组织存在高表
物组比较，P＜0.01
##
[14]
达 。EGFR高表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、TNM
＊＊
Note：vs. TE-1/EC-1 blank group， P＜0.01；vs. TE-1 Muskmel-
分期有关 [24-26] 。PKC是一类富含丝、苏氨基酸的激酶 ，
[27]
on Pedicel water extract group，P＜0.01
##
PKC-α是其中重要的一种亚型，有促进神经递质的释放、
由表 5 可知，与 TE-1/EC-1 空白组比较，TE-1/EC-1
突触塑形、细胞增生、基因表达等作用。活化后的
各加药组 EGFR、PKC-α蛋白相对表达量均显著降低
PKC-α可催化各种蛋白质底物上的丝氨酸或苏氨酸残
（P＜0.01）；与TE-1/EC-1瓜蒂水提物组比较，TE-1/EC-1
基，使其磷酸化，通过原癌基因丝苏氨酸蛋白激酶/丝裂
瓜蒂醇提物组 EGFR、PKC-α蛋白相对表达量均显著降
原活化蛋白激酶/激活蛋白1（raf-MAPK-AP1）、B淋巴细
低（P＜0.01）。
胞瘤-2基因（bcl-2）、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白
3 讨论
（p27）、小G蛋白超家族激酶A（RhoA）等通路，发挥其调
食管癌为常见的消化系统肿瘤，东南亚、东亚地区
节细胞生长、分化、周期、迁移、凋亡、基因表达等多种功
发病率最高，中国的食管癌发病率也在全球排名前 5
能 [28-29] ，是信号通路的中心分子之一。EGFR可通过活化
[3]
位 。目前植物源药物如紫杉类、长春碱类、鬼臼素类等
PLC-γ1 从而激活下游 PKC-α。本研究显示，TE-1/EC-1
药物的出现给肿瘤治疗带来了新的希望，且具有毒副作
空白组细胞中EGFR、PKC-α均高表达，而瓜蒂水提物和
[14]
用小、不易耐药等优点 。近年来对瓜蒂的主要成分葫
醇提物作用后均下调了EGFR、PKC-α的表达，提示瓜蒂
芦素的研究较多，结果发现葫芦素 A、B、D、E 均具有广 两种提取物可能通过部分阻断EGFR信号通路发挥抑制
泛的抗肿瘤作用 [15-19] ，提示瓜蒂提取物可能具有良好的 食管癌细胞增殖与迁移、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡
抗肿瘤活性。基于此，笔者推测瓜蒂提取物也可能对食 的作用。
管癌具有抗肿瘤活性。 综上所述，瓜蒂水提物和醇提物能有效抑制人食管
食管癌细胞的转移和侵袭是影响其预后的主要 癌 TE-1、EC-1 细胞的增殖、迁移，降低细胞的克隆形成
因素 。本试验结果证实了瓜蒂水提物和醇提物均能 能力，阻滞细胞周期与诱导细胞凋亡，其机制可能与下
[20]
够显著抑制人食管癌TE-1、EC-1细胞的增殖，且存在一 调EGFR、PKC-α蛋白表达有关。在后续研究中，可对瓜
定的剂量、时间依赖关系；其也能够显著抑制两种细胞 蒂提取物中抗食管癌的主要成分、药理作用及进一步的
迁移，药物作用时间主要集中在加药后60 h内。细胞克 分子机制进行深入挖掘，以期为瓜蒂治疗食管癌的临床
隆试验结果证实瓜蒂水提物和醇提物作用后细胞克隆 应用提供参考。

中国药房 2020年第31卷第3期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 3 ·319 ·