Page 65 - 《中国药房》2026年7期

2.2.9 相对校正因子的计算 genin-6-C-arabinoside-8-C-glucoside、异荭草素、牡荆素、
精密吸取“2.2.1”项下混合对照品溶液，分别按 20-hydroxyecdysone的含量；再以维采宁-2为内参物，利
“2.2.2”项下色谱条件进样 2、5、8、10、15、20 μL，记录各 用 QAMS 法计算样品中其他成分的含量。每批样品平
成分的峰面积；以维采宁-2 为内参物，计算其余成分的 行测定2次，结果取平均值。运用SPSS 27.0统计软件对
相对校正因子（ƒ）：ƒ＝（Ai/Ci ）/（As/Cs ），式中 Cs和 Ci分别 两种方法所得数据进行独立样本 t 检验，检验水准 α＝
代表待测成分和内参物的质量浓度，As和Ai分别代表待 0.05。结果（表3）显示，两种方法计算所得各成分含量，
测成分和内参物的峰面积。结果显示，对羟基肉桂酸、 差异无统计学意义（P＞0.05）。
apigenin-6-C-arabinoside-8-C-glucoside、异荭草素、牡荆 3 讨论
素、20-hydroxyecdysone的相对校正因子分别为1.604 0、 3.1 色谱条件与提取方法的考察
0.875 7、1.252 0、1.110 0、0.402 5，RSD均不大于0.89%。 本研究对样品的不同提取方式（回流、超声）、提取
2.2.10 耐用性考察 溶剂（甲醇和 30%、50%、70%、90% 甲醇）及提取时间
分别考察不同柱温（35、40、45 ℃）、不同流速（0.8、 （30、60、90 min）进行了比较，结果发现，使用 70% 甲醇
1.0、1.2 mL/min）、不同品牌的 HPLC 仪（Shimadzu LC- 超声提取 30 min 时，色谱峰峰形较为尖锐、响应性良好
2040C 型、Thermo Fisher Scientific U3000 型）和不同色 且杂质干扰较少，可作为样品的提取条件。同时，本研
谱柱（ACE Excel C18-PFP、ACE C18 ）对待测成分相对校 究还比较了不同色谱柱[ACE Excel C18-PFP（4.6 mm×
正因子的影响。结果显示，不同条件下各成分相对校正 250 mm，5 μm）、Hedera ODS-2（4.6 mm×250 mm，5
因子的RSD均不大于2.56%，表明该方法耐用性较好。 μm）]、检测波长（210、230、254、310 nm）、柱温（35、40、
2.2.11 色谱峰定位考察 45 ℃）、流速（0.8、1.0、1.2 mL/min）对色谱峰分离度的影
采用相对保留时间法对待测成分进行色谱峰定 响，结果发现，采用 ACE Excel C18-PFP 色谱柱，以流速
[18]
位 。取“2.2.1”项下混合对照品溶液，按“2.2.2”项下色 0.8 mL/min 进行洗脱，检测波长设定为 230 nm，柱温控
谱条件分别进样 2、5、8、10、15、20 μL，以维采宁-2 为内 制在40 ℃，对色谱峰的分离效果最好。
参物，计算对羟基肉桂酸、apigenin-6-C-arabinoside-8- 3.2 指标成分的选择
C-glucoside、异荭草素、牡荆素、20-hydroxyecdysone 的 漆姑草中含有黄酮类、甾体类、氨基酸类和香豆素
相对保留时间。结果显示，对羟基肉桂酸、apigenin-6- 类等多种化合物，其在抗炎、抗肿瘤方面的药理研究较
C-arabinoside-8-C-glucoside、异 荭 草 素 、牡 荆 素 、20- 为广泛 [9，19] 。维采宁-2具有抗炎、抗血小板及抑制前列腺
hydroxyecdysone 与内参物维采宁-2 的相对保留时间分 癌生长的活性，已在多项体外与体内实验中得到验
[20]
别 为 1.148、1.542、1.324、1.382、1.651，RSD 均 不 大 于 证 ；apigenin-6-C-arabinoside-8-C-glucoside具有抗炎活
0.23%（n＝6），表明通过相对保留时间定位各色谱峰具 性，可降低 BV2 小胶质细胞中肿瘤坏死因子 α、白细胞
[21]
有可行性。 介素 1β 等炎症介质水平 ；对羟基肉桂酸 [22―23] 、异荭草
[24]
2.2.12 12批漆姑草药材的含量测定 素 、牡荆素 [25―26] 、20-hydroxyecdysone [27―28] 在抗炎、抗肿
取12批漆姑草药材各适量，分别按“2.2.1”项下方法 瘤等方面亦表现出良好活性。这提示上述6种成分与漆姑
制成供试品溶液，按“2.2.2”项下色谱条件进样测定， 草“凉血解毒、散结消肿”的传统功效相吻合。因此，本
采用 ESM 计算样品中维采宁-2、对羟基肉桂酸、api‐ 研究选择这6种成分作为漆姑草药材的质量控制指标。
表3 样品含量测定结果（n＝2，mg/g）
对羟基肉桂酸 apigenin-6-C-arabinoside-8-C-glucoside 异荭草素 牡荆素 20-hydroxyecdysone
编号 维采宁-2（ESM）
ESM QAMS法 ESM QAMS法 ESM QAMS法 ESM QAMS法 ESM QAMS法
S1 2.705 3 0.139 2 0.137 8 4.229 8 4.240 3 3.638 4 3.574 8 0.103 9 0.103 5 4.363 5 4.390 6
S2 1.728 2 0.034 0 0.033 6 2.431 8 2.437 9 1.576 7 1.583 3 0.024 1 0.024 0 3.672 3 3.695 2
S3 2.200 3 0.045 9 0.045 4 2.408 8 2.414 8 2.890 4 2.902 4 0.080 1 0.079 8 3.543 4 3.565 5
S4 1.689 9 0.039 0 0.038 6 2.698 4 2.705 1 2.554 0 2.564 6 0.132 5 0.132 0 3.576 1 3.598 4
S5 1.266 3 0.096 7 0.095 8 1.547 4 1.551 3 1.632 4 1.639 1 0.064 9 0.064 6 2.535 6 2.551 3
S6 0.298 3 0.063 2 0.062 5 0.567 4 0.568 8 0.501 1 0.503 2 0.032 6 0.032 5 2.778 2 2.795 5
S7 1.361 3 0.017 6 0.017 4 1.862 5 1.867 0 2.091 3 2.099 8 0.086 1 0.085 8 3.428 4 3.449 5
S8 3.104 2 0.272 2 0.269 4 3.543 0 3.551 8 5.019 5 5.040 3 0.038 4 0.038 3 4.850 9 4.881 1
S9 2.050 8 0.104 7 0.103 6 2.684 4 2.691 0 2.593 1 2.603 9 0.053 6 0.053 4 3.322 5 3.343 2
S10 1.862 2 0.108 6 0.107 5 2.548 6 2.554 9 1.761 0 1.768 3 0.063 2 0.062 9 3.363 5 3.384 4
S11 1.756 3 0.153 6 0.152 0 2.629 0 2.635 5 2.374 2 2.384 1 0.039 7 0.039 6 2.902 2 2.920 2
S12 2.605 7 0.129 6 0.128 3 4.055 1 4.065 1 3.395 2 3.409 3 0.102 4 0.102 0 4.238 3 4.264 7
P － 0.971 0.988 0.927 0.984 0.937

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