Page 67 - 《中国药房》2025年2期

组细胞中p-mTOR/mTOR、FBP1蛋白及mRNA的表达水 4 讨论
平亦显著升高（P＜0.05）。结果见图3、表2。 PCOS 患者的主要临床表现包括卵泡发育异常、排
[1]
卵障碍及流产 。作为卵泡发育的标志，卵巢颗粒细胞
FBP1 37 kDa
的生长分化是原始卵泡启动和生长的关键，其能通过受
体介导途径调控生长期卵泡的发育及卵泡闭锁，从而在
p-mTOR 289 kDa
[15]
卵泡发育过程中发挥重要的调控作用 。长期的临床
mTOR 289 kDa 应用表明，四物汤用于女性月经紊乱相关疾病的疗效确
[16]
切 。现代中医学认为，PCOS属于“不孕”“闭经”范畴，
GAPDH 36 kDa
主要病机为痰湿瘀血。该方中，君药熟地黄可补血滋
对照组 DHEA组 空白血清组 中浓度四物汤
含药血清组 阴，臣药当归可补血行血，佐药川芎可祛瘀止痛，佐药白
图3 各组细胞中FBP1/mTOR信号通路相关蛋白表达 芍可养血调经，契合 PCOS 上述病机。本研究使用不同
的电泳图（x±s，n＝6）
剂量的四物汤灌胃大鼠，制备了3种不同浓度的四物汤
表2 各 组 细 胞 中 p-mTOR/mTOR、FBP1 蛋 白 及 含药血清，CCK-8 实验结果显示，各浓度四物汤含药血
mRNA表达水平的比较（x±s，n＝6） 清对KGN细胞的存活均有促进作用。
组别 p-mTOR/mTOR FBP1蛋白 FBP1 mRNA 研究表明，PCOS模型动物/患者的卵巢颗粒细胞自
对照组 1.00±0.03 1.00±0.04 1.00±0.01 [17]
DHEA组 2.34±0.12 a 1.98±0.15 a 4.53±0.21 a 噬会被异常激活 。过度自噬会引起细胞结构受损，影
空白血清组 2.19±0.21 2.06±0.07 4.46±0.35 响卵细胞正常发育，从而导致排卵障碍和性激素合成失
中浓度四物汤含药血清组 2.96±0.19 bc 3.24±0.18 bc 6.67±0.39 bc [4]
调 。因此，通过改变卵巢颗粒细胞的自噬水平有望成
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与DHEA组比较，P＜0.05；c：与空白
血清组比较，P＜0.05。 为 PCOS 治疗的有效途径之一。根据研究报道，四物汤
活性成分豆甾醇、β-谷甾醇及山柰酚均可抑制细胞自
3.4 敲低FBP1对四物汤含药血清相关作用的影响
噬 [18―19] ，由此本课题组推测，该方可能具有调控卵巢颗
与四物汤组比较，四物汤+si-NC 组细胞的存活率、
粒细胞自噬水平的作用。本研究结果显示，四物汤含药
LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p-mTOR/mTOR、p62蛋白、FBP1蛋白及
血清可显著下调 KGN 细胞中自噬体数量和 LC3-Ⅱ/
mRNA 的表达差异均无统计学意义（P＞0.05）。与四物
LC3-Ⅰ，上调 p62 蛋白的表达，升高 mTOR 蛋白的磷酸
汤+si-NC组比较，四物汤+si-FBP1组细胞的存活率、p62
化水平，说明四物汤含药血清可抑制KGN细胞自噬。
蛋白的表达水平、FBP1 蛋白及 mRNA 的表达水平、p- 学者发现，在高雄激素培养的小鼠卵巢颗粒细胞及

mTOR/mTOR 均显著降低，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ显著升高 源自PCOS患者的诱导性多能干细胞中，FBP1蛋白的表
（P＜0.05）。结果见图4、表3。 达均明显升高 [20―21] 。本研究结果发现，经 DHEA 处理
后，KGN细胞中FBP1蛋白及mRNA的表达水平均显著
FBP1 37 kDa [7]
升高，与之前报道一致 ；经四物汤含药血清处理后，
p-mTOR 289 kDa KGN 细胞中 FBP1 蛋白及 mRNA 的表达水平进一步升
mTOR 289 kDa 高；敲低 FBP1 后，四物汤含药血清对 KGN 细胞存活率
的促进作用和对自噬的抑制作用均被减弱，说明 FBP1
LC3-Ⅰ 16 kDa
LC3-Ⅱ 14 kDa
在PCOS进展过程中具有保护作用，高水平的FBP1可抑
p62 62 kDa
制卵巢颗粒细胞的自噬。
GAPDH 36 kDa 综上所述，四物汤含药血清可通过上调 KGN 细胞
四物汤组 四物汤+si-NC组 四物汤+si-FBP1组 中FBP1蛋白及mRNA的表达来促进mTOR蛋白的磷酸
图4 各组细胞自噬和FBP1/mTOR信号通路相关蛋白 化，从而抑制其自噬，这可能是四物汤改善PCOS的潜在
表达的电泳图
作用机制。
表3 各组细胞存活率、自噬和 FBP1/mTOR 信号通路 参考文献
相关蛋白表达比较（x±s，n＝6） [ 1 ] WALKER K，DECHERNEY A H，SAUNDERS R. Mens-
组别 细胞存活率/% LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ p62 p-mTOR/mTOR FBP1蛋白 FBP1 mRNA trual dysfunction in PCOS[J]. Clin Obstet Gynecol，2021，
四物汤组 100.00±5.32 1.00±0.06 1.00±0.05 1.00±0.08 1.00±0.05 1.00±0.00 64（1）：119-125.
四物汤+si-NC组 97.60±6.13 0.97±0.05 0.97±0.08 1.05±0.10 0.96±0.07 1.07±0.08
四物汤+si-FBP1组 40.50±5.35 a 1.87±0.12 a 0.27±0.04 a 0.43±0.07 a 0.38±0.03 0.11±0.02 a [ 2 ] XU Y L，QIAO J. Association of insulin resistance and ele-
a
a：与四物汤+si-NC组比较，P＜0.05。 vated androgen levels with polycystic ovarian syndrome

中国药房 2025年第36卷第2期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 2 · 189 ·