Page 71 - 《中国药房》2024年5期

level of NF-κB p65 protein were increased （P＜0.05）， while the mechanical pain threshold， sensory nerve conduction velocity，
motor nerve conduction velocity， and SOD activity were decreased/slowed down （P＜0.05）. Compared with the DPN group， the
above indexes were significantly potentiated in the andrographolide low- and high-dose groups and lipoic acid group （P＜0.05），
and the corresponding trends in the rHMGB1 group were opposite to those in the above three administration groups （P＜0.05）.
Moreover， rHMGB1 attenuated the hypoglycemic effect of high-dose andrographolide on blood glucose and the improvement of
oxidative stress injury in the sciatic nerve of DPN rats （P＜0.05）. CONCLUSIONS Andrographolide may reduce blood glucose by
inhibiting the HMGB1/RAGE pathway and oxidative stress， thus ameliorating sciatic nerve injury in DPN rats.
KEYWORDS andrographolide； diabetic peripheral neuropathy； high-mobility group protein box 1； receptor for advanced
glycation end products； sciatic nerve； oxidative stress

糖尿病周围神经病变（diabetic peripheral neuropathy， 试剂盒（上海仁捷生物科技有限公司，批号分别为
DPN）是一种常见的糖尿病并发症，会导致患者下肢疼 20220910、20221123），兔源一抗 HMGB1、RAGE、核因
痛和不适、足部溃疡及生活质量下降 。目前，三环类药 子κB p65（nuclear factor kappa-B p65，NF-κB p65）、磷酸
[1]
物、去甲肾上腺素再摄取抑制剂和抗惊厥药物是用于 化 NF-κB p65（p-NF-κB p65）、甘油醛-3-磷酸脱氢酶
DPN 治疗的一线药物，但长期使用会带来各种毒副作 （glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）、
[2]
用 。因此，迫切需要开发更有效的药物来治疗 DPN。 辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）标记的山
穿心莲内酯是爵床科植物穿心莲 Andrographis panicula 羊抗兔二抗（英国 Abcam 公司，批号分别为 ab18256、
（Burm.f.）Nees 的主要活性成分，具有抗炎、抗氧化应激 ab216329、ab16502、ab76302、ab8245、ab6721）。
[3]
及神经保护作用 。已有研究报道，穿心莲内酯可缓解 1.3 动物
[4]
神经损伤模型小鼠的病理性疼痛 。但穿心莲内酯对 本研究所用动物为雌性 SPF 级 SD 大鼠，6 周龄，共
DPN 大鼠坐骨神经功能损伤的影响鲜有报道。相关研 84 只，体重为 200～210 g，购自广东莱迪生物医药研究
究显示，在糖尿病大鼠神经性疼痛增强时，大鼠初级感
院有限公司，生产许可证号为SCXK（粤）2022-0064。所
觉神经元中的高迁移率族蛋白 B1（high-mobility group 有大鼠都在温度为 23～25 ℃、相对湿度为 50%～60%、
protein box 1，HMGB1）/晚期糖基化终产物受体（recep‐
光照/黑暗交替 12 h 的环境中饲养。所有动物实验操作
tor for advanced glycation end products，RAGE）信号通路 均符合 3R 原则，并经黑龙江省牡丹江林业中心医院伦
处于激活状态 。但穿心莲内酯能否通过调节HMGB1/
[5]
理委员会批准（批件号为20210019）。
RAGE 信号通路改善 DPN 大鼠坐骨神经功能损伤尚不 2 方法
明确。因此，本研究主要探究穿心莲内酯对DPN大鼠坐
2.1 分组、造模与给药
骨神经功能损伤的改善作用及机制，为DPN的治疗提供
按照随机数字表法将 84 只大鼠分为对照组、DPN
参考。
组、穿心莲内酯低剂量组、穿心莲内酯高剂量组、硫辛酸组
1 材料
1.1 主要仪器 （阳性对照）、rHMGB1组和穿心莲内酯高剂量+rHMGB1
组，每组12只。除对照组外，其余各组大鼠均采用高糖
本研究所用的主要仪器有 ACCU-CHEK 型动物血
高脂喂养联合腹腔注射链脲佐菌素的方式构建 DPN 大
糖仪（上海玉研科学仪器有限公司）、Von Frey型测痛仪
鼠模型，具体操作如下：将大鼠采用高糖高脂饲料喂养8
（美国 IITC 公司）、DB026 型热板仪（北京智鼠多宝生物
周后，禁食12 h，再通过腹腔一次性注射35 mg/kg的2%
科技有限责任公司）、PowerLab-8Ss 型多通道生理信号
链脲佐菌素。在注射2%链脲佐菌素后72、96 h，若大鼠
记录仪（澳大利亚AD Instruments公司）、DM6M LIBS型
的尾尖静脉血血糖均≥16.7 mmol/L，且神经传导速度降
光学显微镜（德国 Leica 公司）、DYCZ-25D 型蛋白电泳 [6]
仪（北京六一仪器厂）。 低，则视为DPN大鼠模型构建成功 。对照组大鼠饲喂
1.2 主要药品与试剂 标准饲料，以生理盐水代替2%链脲佐菌素，其余操作同
本研究所用的主要药品与试剂有穿心莲内酯标准 造模过程。造模成功24 h后，参考文献及预实验结果进
品（北京索莱宝科技有限公司，批号 IA0360，纯度≥ 行给药处理：穿心莲内酯低、高剂量组大鼠分别腹腔
[4]
98%），链脲佐菌素（金克隆北京生物技术有限公司，批 注射 0.833、3.332 mg/kg 穿心莲内酯 ，且均灌胃等体积
[7]
号 20221003），硫辛酸（西安明朗生物科技有限公司，批 的生理盐水；硫辛酸组大鼠灌胃 0.1 g/kg 硫辛酸 ，并
号 20221123，纯度≥99%），HMGB1 激活剂重组大鼠 腹腔注射等体积生理盐水；rHMGB1 组大鼠腹腔注射
[8]
HMGB1 蛋 白（recombinant rat HMGB1 protein，rH‐ 8 μg/kg rHMGB1 ，并灌胃等体积生理盐水；穿心莲内
MGB1）[ 伊 艾 博（武 汉）科 技 股 份 有 限 公 司 ，批 号 酯高剂量+rHMGB1 组大鼠腹腔注射 3.332 mg/kg 穿心
20220809，纯度≥98%]，大鼠超氧化物歧化酶（super- 莲内酯+8 μg/kg rHMGB1；对照组、DPN 组大鼠均灌胃
oxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA） 且腹腔注射等体积生理盐水。每天给药1次，持续8周。

中国药房 2024年第35卷第5期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 5 · 573 ·