Page 73 - 《中国药房》2023年24期
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[1]
          临床肝炎、肝胆热等疾病的治疗 。研究表明，山苦荬中                              山苦荬药材（批号分别为 C20210514、T20210607、
                                           [2]
          所含绿原酸、槲皮素具有协同抗炎作用 ；原儿茶酸可通                          H20210523）分别产自内蒙古赤峰市、通辽市、呼和浩特
          过调控Toll样受体4/髓样分化因子88/核因子κB信号通                      市，经内蒙古医科大学药学院中药资源教研室渠弼教授
                                    [3]
          路而达到改善肝脏炎症的目的 ；在四氯化碳诱导的肝                           鉴定为菊科苦荬菜属植物山苦荬 I. chinensis（Thunb.）
          损伤小鼠模型中，木犀草素可显著降低其血清中谷草转                           Nakai的干燥全草。
          氨酶、谷丙转氨酶的活性，并改善肝组织病理损伤，作用                          2 方法与结果
          机制可能与激活核转录因子红系 2 相关因子 2 通路有                        2.1 山苦荬的成分鉴别
            [4]
          关 ；异绿原酸A、芦丁可通过增强抗氧化酶活性而抑制                          2.1.1 溶液的制备
          氧化应激反应，从而发挥保肝作用              [5―6] 。同时，课题组前           （1）混合对照品溶液：精密称定绿原酸对照品 5.03
          期在山苦荬保肝活性部位筛选过程中发现，木犀草苷具                           mg、枸橼酸对照品4.12 mg、隐绿原酸对照品4.95 mg、阿
                          [1]
          有显著的保肝活性 。
                                                             魏酸对照品3.97 mg、木犀草素对照品4.20 mg、槲皮素对
              药材所含成分含量的高低与其疗效密切相关，虽有
                                                             照品 5.05 mg、芦丁对照品 4.01 mg、原儿茶酸对照品
          学者采用高效液相色谱法和一测多评法对山苦荬药材                            5.02 mg、异绿原酸 A 对照品 7.50 mg、木犀草苷对照品
          进行了质量评价       [7―8] ，但受地域差异等因素影响，仅以单
                                                             3.92 mg 分别置于 10 mL 容量瓶中，甲醇溶解、超声、定
          一或3种成分作为质量评价指标难以准确反映药材整体
                                                             容，得单一对照品贮备液，质量浓度分别为 503.00、
          质量，加之目前关于山苦荬的物质基础研究有限，因此
                                                             412.00、495.00、397.00、420.00、505.00、401.00、502.00、
          明确山苦荬的物质组成并进行质量控制对保障其临床
                                                             750.00、392.00 μg/mL；分别精密量取上述各单一贮备液
          应用的安全性和有效性具有良好的现实意义。基于此，
                                                             100 μL于同一10 mL容量瓶中，得质量浓度分别为5.03、
          本研究拟运用高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分
                                                             4.12、4.95、3.97、4.20、5.05、4.01、5.02、7.50、3.92 μg/mL的混
          辨质谱技术对山苦荬药材的物质组成进行快速、全面的
                                                             合对照品溶液，于4 ℃下保存，备用。
          鉴别分析，并采用高效液相色谱串联三重四极杆质谱
                                                                （2）供试品溶液：取山苦荬药材（批号C20210514）粉
         （high  performance  liquid  chromatography-triple  quadru‐
                                                             末（过三号筛）约1.0 g，精密称定，放至50 mL锥形瓶中，
          pole mass spectrometry，HPLC-MS/MS）技术对其所含绿
                                                             加甲醇 10 mL，称重，封口，超声（功率 200 W，频率 50
          原酸、木犀草素、槲皮素、芦丁、原儿茶酸、异绿原酸 A、
          木犀草苷7种成分进行含量测定，旨在为该药材质量评                           kHz）提取30 min，冷却至室温，再次称重，用甲醇补足失
          价体系的建立、药效物质的挖掘提供数据支撑。                              重，摇匀，经0.22 μm滤膜过滤，即得。
          1 材料                                               2.1.2 色谱与质谱条件
          1.1 主要仪器                                              （1）色 谱 条 件 ：以 Agilent  ZORBAX  SB-Aq（4.6
              本研究所用主要仪器有HPLC-Q-Exactive型高效液                  mm×150 mm，5 μm）为色谱柱，以甲醇（A）-0.1% 甲酸
          相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱仪[赛默飞世                          溶液（B）为流动相进行梯度洗脱（0～10 min，10%A；
          尔科技（中国）有限公司]，LC-MS8045型高效液相色谱-                     10～13 min，10%A→28%A；13～15 min，28%A→45%A；
          三重四极杆液质联用仪、AP135W型十万分之一电子天                         15～21 min，45%A→65%A；21～24 min，65%A→80%A；
          平（日本Shimadzu公司）等。                                  24～34 min，80%A→95%A；34～40 min，95%A），流速为
          1.2 主要药品与试剂                                        0.4 mL/min，柱温为35 ℃，进样量为5 μL。
              异绿原酸A对照品（批号PS001052，纯度≥98.0%）、                    （2）质谱条件：采用电喷雾离子源（electron spray
          隐绿原酸对照品（批号 PS011467，纯度≥98.0%）、木犀                   ionization，ESI）进行正、负离子扫描；喷雾电压为 3.80
          草苷对照品（批号 PS013155，纯度≥98.0%）、木犀草素                   kV（正离子）/3.20 kV（负离子）；离子传输管温度为
          对照品（批号 PS010346，纯度≥98.0%）均购自成都普思                   300 ℃（正离子）/400 ℃（负离子）；辅助气体积流量为30
          生 物 科 技 有 限 公 司 ；绿 原 酸 对 照 品（批 号 110753-           L/min；辅助气温度为350 ℃；碰撞能量设置为30 eV；检
          202119，纯度≥98.5%）、槲皮素对照品（批号 100081-                 测方式为 Full MS/dd-MS ，Full MS 分辨率为 70 000，dd-
                                                                                  2
          202010，纯度≥99.0%）、原儿茶酸对照品（批号 110809-                MS 分辨率为17 500；扫描范围为m/z 110～1 200。
                                                                2
          202207，纯度≥98.0%）、枸橼酸对照品（批号 100396-                 2.1.3 数据库建立与分析
          202104，纯度≥99.7%）、阿魏酸对照品（批号 110773-                     采用中医药系统药理学数据库与分析平台（https：//
          201915，纯 度 ≥99.0%）、芦 丁 对 照 品（批 号 100080-           old.tcmsp-e.com/tcmsp.php）、中国知网、万方数据对山苦
          202012，纯度≥98.0%）均购自中国食品药品检定研究                      荬药材所含成分的名称、分子式、多级质谱碎片进行收
          院；甲醇、乙腈均为色谱纯，甲酸均为分析纯，水为蒸                           集整理，建立本地数据库，利用 Thermo Scientific Xcali‐
          馏水。                                                bur 3.0软件，对山苦荬供试品溶液和混合对照品溶液在


          中国药房  2023年第34卷第24期                                              China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 24    · 3007 ·
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