Page 53 - 《中国药房》2023年23期
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发油，挥发油用乙醇溶解后，备用；提取挥发油后的药液 制备供试品溶液，分别在室温放置 0、2、4、8、12、24 h 时
滤出，药渣再加水煎煮2 h，煎液与上述药液合并，滤过， 按“2.1”项下色谱条件进行检测，获取色谱图。以 31 号
得川芎水提液；将该水提液减压浓缩至适当相对密度， 峰为参照峰，计算得各共有峰的相对保留时间 RSD＜
加乙醇使含醇量达60%，静置48 h，滤过；滤液减压回收 0.21%，相对峰面积 RSD＜3.51%（n＝6），符合中药指纹
乙醇，并浓缩至适量，得川芎醇沉浓缩液，备用。取19 g 图谱的要求。
冰片与 20 mL 吐温-80，加适量乙醇混匀，备用。将上述 2.4.4 指纹图谱的建立和相似度评价
备用的药液合并，用乙醇及蒸馏水调整药液总量为1 000 取 13 批（编号 S1～S13）心痛舒喷雾剂样品，按
mL并使含醇量＜30%，混匀，滤过，即得。
“2.3.2（1）”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱
2.3 溶液的制备
条件进行检测。将获取的色谱图导入《中药色谱指纹图
2.3.1 混合对照品溶液的制备
谱相似度评价系统（2012 版）》，将 S1 批次设为参照图
精密称取没食子酸、氧化芍药苷、绿原酸、咖啡酸、
谱，对照图谱生成方法选择平均数法，时间窗宽度设为
芍药苷、阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ、丹皮酚对照品适量至容
0.1，经过多点校正后进行峰匹配获得对照图谱 R 及 13
量瓶中，加入 75% 甲醇制备成质量浓度分别为 69.0、
批样品的叠加图谱，如图1所示。结果显示，共标定共有
72.8、34.8、11.0、366.0、24.2、31.4、379.0 μg/mL 的混合对
峰 33 个，其中 31 号峰（丹皮酚）峰面积最大，分离度较
照品溶液。
好，故选择31号峰为参照峰；各批次心痛舒喷雾剂样品
2.3.2 供试品溶液的制备
与对照图谱的相似度均≥0.994，表明各批次样品之间的
（1）心痛舒喷雾剂供试品溶液的制备：精密吸取心
差异性较小。
痛舒喷雾剂药液 1 mL 至 20 mL 容量瓶中，加 75% 甲醇
至刻度，摇匀，过0.22 μm有机微孔滤膜，取续滤液即得。 800
（2）饮片供试品溶液的制备：取牡丹皮、川芎饮片粗粉各 600 R
S13
0.5 g 至锥形瓶，加 75% 甲醇 50 mL，超声（频率 40 kHz， mAU 400 S12
S11
S10
功率 360 W）提取 30 min；补足失重，离心，取上清液，过 S9
S8
S7
S6
0.22 μm 有机微孔滤膜，取续滤液即得。（3）中间体供试 200 S5
S4
S3
品溶液的制备：按“2.2”项下处方中各饮片量与制备工 0 S2
S1
0 10 20 30 40 50 60
艺，制得牡丹皮渗漉液和流浸膏样品，川芎水提液和醇 t/min
沉浓缩液样品，分别按“2.3.2（1）”项下方法制备即得。 图1 13批心痛舒喷雾剂的指纹图谱和对照图谱R
（4）阴性对照供试品溶液制备：按“2.2”项下处方中各饮 2.4.5 共有峰的指认和归属
片量与制备工艺，制得缺川芎、缺牡丹皮的阴性对照样 取“2.3.1”项下混合对照品溶液、“2.3.2（4）”项下阴
品，分别按“2.3.2（1）”项下方法制备即得。
性对照供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进行检测，获
2.4 心痛舒喷雾剂HPLC图谱的建立
得色谱图。如图 2 所示，将对照图谱 R 与混合对照品图
2.4.1 精密度试验
谱进行比对，指认出5号峰为没食子酸、9号峰为氧化芍
取 S1 号心痛舒喷雾剂样品，按“2.3.2（1）”项下方法
药苷、10 号峰为绿原酸、14 号峰为咖啡酸、17 号峰为芍
制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进行检测，连续
药苷、21 号峰为阿魏酸、27 号峰为洋川芎内酯Ⅰ、31 号
进样 6 次，获取色谱图。以 31 号峰（丹皮酚，下同）为参
峰为丹皮酚。将对照图谱R与缺川芎、缺牡丹皮的阴性
照峰，计算得各共有峰的相对保留时间RSD＜0.13%，相
对照图谱进行对比发现，2、3、5、9、12、16～20、22、23、
对峰面积 RSD＜2.99%（n＝6），符合中药指纹图谱的
25、26、28～31 号峰归属于牡丹皮；1～4、6～8、10、11、
要求。
13～15、21、24、25、27、28、32、33 号峰归属于川芎，其中
2.4.2 重复性试验
取 S1 号心痛舒喷雾剂样品，按“2.3.2（1）”项下方法 2、3、25、28号峰同时归属于牡丹皮和川芎。
平行制备6份供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进行检 2.5 8个指认成分的含量测定
测，获取色谱图。以31号峰为参照峰，计算得各共有峰 2.5.1 专属性试验
的相对保留时间RSD＜0.18%，相对峰面积RSD＜4.46% 取空白溶剂、混合对照品溶液、S1 号心痛舒喷雾剂
（n＝6），符合中药指纹图谱的要求。 供试品溶液及阴性对照供试品溶液按“2.1”项下色谱条
2.4.3 稳定性试验 件进行检测，并记录色谱图。如图3所示，空白溶剂基线
取 S1 号心痛舒喷雾剂样品，按“2.3.2（1）”项下方法 平整，除溶剂峰外无干扰峰；在各对照品成分的相应位
中国药房 2023年第34卷第23期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 23 · 2863 ·
