Page 42 - 《中国药房》2023年7期

3 2.1.8 加样回收率试验 精密称定已知含量的黑骨藤
350 粉末（S1）6份，每份约0.5 g。分别精密加入不同质量浓
300
250 度的单一对照品溶液（质量浓度分别为新绿原酸0.805 0
mAU 200 1 mg/mL、隐绿原酸0.475 9 mg/mL、绿原酸2.225 0 mg/mL、
150
100 2
50 4 5 6 原花青素A2 0.750 0 mg/mL、异绿原酸A 0.072 0 mg/mL
0
和异绿原酸C 0.525 0 mg/mL）各1 mL，按“2.1.2”项下方
10 20 30 40 50
t/min 法制备供试品溶液，再按“2.1.3”项下色谱条件进样测
A.供试品溶液（S1）
定，记录峰面积，计算各成分的平均加样回收率。结果
3
350 显示，6种待测成分的平均加样回收率分别为101.18%、
300
250 98.04%、98.13%、101.50%、100.65%、100.12%，RSD 为
mAU 200 1 2 1.01%～2.26%（n＝6），表明该方法准确度良好。结果
150
100 6 见表3。
50 4 5
0 表3 加样回收率试验结果（n＝6）
10 20 30 40 50
t/min 成分 取样量/g 样品含量/mg 加入量/mg 测得量/mg 加样回收率% 平均加样回收率/% RSD/%
新绿原酸 0.500 4 0.771 1 0.805 0 1.589 8 101.70 101.18 1.12
B.混合对照品溶液①
0.500 3 0.770 9 0.805 0 1.597 4 102.67
350 0.500 0 0.770 5 0.805 0 1.578 4 100.36
300 0.500 3 0.770 9 0.805 0 1.585 0 101.13
250 0.500 2 0.770 8 0.805 0 1.571 5 99.47
mAU 200 0.500 2 0.770 8 0.805 0 1.589 7 101.73
150
100 隐绿原酸 0.500 4 0.508 4 0.475 9 0.975 9 98.23 98.04 1.01
50
0 0.500 3 0.508 3 0.475 9 0.974 9 98.05
10 20 30 40 50 0.500 0 0.508 0 0.475 9 0.973 4 97.79
t/min 0.500 3 0.508 3 0.475 9 0.968 8 96.76
C. 75%甲醇溶液 0.500 2 0.508 2 0.475 9 0.972 8 97.63
1：新绿原酸；2：隐绿原酸；3：绿原酸；4：原花青素A2；5：异绿原 0.500 2 0.508 2 0.475 9 0.983 0 99.77
酸A；6：异绿原酸C 绿原酸 0.500 4 2.040 1 2.225 0 4.227 3 98.30 98.13 2.21
图1 系统适用性试验的HPLC图 0.500 3 2.039 7 2.225 0 4.185 3 96.43
0.500 0 2.038 5 2.225 0 4.265 6 100.09
表2 6种成分的线性关系考察结果 0.500 3 2.039 7 2.225 0 4.216 0 97.81
对照品 回归方程 r 线性范围/µg 0.500 2 2.039 3 2.225 0 4.157 4 95.20
新绿原酸 Y＝986.9X－11.74 0.999 9 0.100 6～2.012 0.500 2 2.039 3 2.225 0 4.285 4 100.95
隐绿原酸 Y＝1 782X－18.68 0.999 9 0.101 0～2.020 原花青素A2 0.500 4 0.678 4 0.750 0 1.412 4 97.87 101.50 2.20
绿原酸 Y＝1 379X－55.18 0.999 9 0.300 0～6.000 0.500 3 0.678 3 0.750 0 1.450 9 103.01
原花青素A2 Y＝629.9X－7.033 0.999 8 0.100 6～2.012 0.500 0 0.677 9 0.750 0 1.459 9 104.27
异绿原酸A Y＝1 782X－18.68 0.999 3 0.020 2～0.404 0.500 3 0.678 3 0.750 0 1.430 7 100.32
异绿原酸C Y＝1 417X－53.91 0.999 6 0.100 0～2.000 0.500 2 0.678 2 0.750 0 1.438 9 101.43
0.500 2 0.678 2 0.750 0 1.443 9 102.09
2.1.5 精密度试验 取混合对照品溶液①，按“2.1.3”项
异绿原酸A 0.500 4 0.075 4 0.072 0 0.145 2 96.94 100.65 2.22
下色谱条件连续进样6次，记录各成分峰面积。结果显 0.500 3 0.075 4 0.072 0 0.148 3 101.25
示，6 种待测成分峰面积的 RSD 为 0.50%～1.77%（n＝ 0.500 0 0.075 4 0.072 0 0.150 0 103.61
0.500 3 0.075 4 0.072 0 0.147 8 100.56
6），表明仪器精密度良好。
0.500 2 0.075 4 0.072 0 0.148 7 101.81
2.1.6 重复性试验 精密称定黑骨藤粉末（S1）6 份，每 0.500 2 0.075 4 0.072 0 0.147 2 99.72
份约 1.0 g，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，再按 异绿原酸C 0.500 4 0.455 2 0.525 0 0.957 3 95.64 100.12 2.26
“2.1.3”项下色谱条件进样测定，记录各成分峰面积，并 0.500 3 0.455 1 0.525 0 0.987 2 101.35
0.500 0 0.454 8 0.525 0 0.979 3 99.90
采用外标法计算各成分的含量。结果显示，6 种待测成 0.500 3 0.455 1 0.525 0 0.987 0 101.31
分含量的 RSD 为 0.73%～2.74%（n＝6），表明该方法重 0.500 2 0.455 0 0.525 0 0.987 3 101.39
复性良好。 0.500 2 0.455 0 0.525 0 0.985 8 101.10
2.1.7 稳定性试验 精密称定黑骨藤粉末（S1），按 2.1.9 样品含量测定 取 11 批黑骨藤药材，分别按
“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，分别在室温下放置0、 “2.1.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.3”项下色谱
2、4、8、12、24 h时，按“2.1.3”项下色谱条件进样测定，记 条件进样测定，记录各成分的峰面积，并采用外标法计
录峰面积。结果显示，6 种待测成分峰面积的 RSD 为 算 11 批黑骨藤中各成分的含量。每个样品平行测定 3
1.23%～2.89%（n＝6），表明该供试品溶液于室温下放置 次，取平均值。结果显示，11批黑骨藤样品中绿原酸、隐
24 h内稳定性良好。 绿原酸、新绿原酸、原花青素 A2、异绿原酸 A、异绿原酸

· 804 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 7 中国药房 2023年第34卷第7期