Page 41 - 《中国药房》2023年7期
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          活性 。近年来，因以黑骨藤为原料的复方制剂具有独                                    表1 黑骨藤样品编号及产地信息
                [7]
          特疗效 ，已使黑骨藤成为了医药行业研究与开发的热                            编号            产地                      采集时间
          点，其在治疗关节肿痛、类风湿性关节炎等方面具有良                            S1            贵州省遵义市新民镇               2021年10月
                                                              S2            贵州省遵义市白泥镇               2021年10月
          好的研发和应用前景。                                          S3            贵州省开阳市双流镇               2021年10月
              有研究表明，黑骨藤中咖啡酰基奎宁酸类化合物有                          S4            贵州省息烽县永靖镇               2021年10月
                                                              S5            贵州省安顺市西秀区旧州镇            2021年10月
          较好的抗类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）活
                                                              S6            贵州省息烽县温泉镇               2021年10月
          性，可抑制人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞MH7A                           S7            贵州省遵义市乌江镇               2021年10月
          增殖及其炎症因子分泌          [8―9] ；原花青素 A2 属于黄酮类物           S8            贵州省开阳县龙水乡               2021年10月
                                             [10]
          质，具有较强的抗氧化、抗菌及抗炎活性 。中药具有                            S9            贵州省遵义市南白镇               2021年10月
                                                              S10           贵州省安顺市西秀区蔡官镇            2021年10月
          多成分协同作用的特点，采用多指标对其进行综合评价                            S11           贵州省息烽县石硐镇               2021年10月
          更为科学合理。为了综合评价不同产地黑骨藤的质量                            品各适量，加入 70% 甲醇溶液制备成质量浓度分别为
          差异，本研究采用高效液相色谱（HPLC）法同时测定黑
                                                             1.006、1.01、3.00、1.006、0.202、1.00 mg/mL 的单一对照
          骨藤中 5 种咖啡酰基奎宁酸类成分（新绿原酸、隐绿原
                                                             品母液，再从6份对照品母液中分别精密吸取1 mL置于
          酸、绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C）和黄酮类化合物原                         10、100 mL 容量瓶中，加入 70% 甲醇溶液制备成上述 6
          花青素A2的含量，并结合聚类热图分析、灰色关联度分
                                                             种成分质量浓度分别为 100.6、101.0、300.0、100.6、20.2、
          析（grey relational analysis，GRA）和熵权逼近理想解排           100.0 µg/mL 的混合对照品溶液①和质量浓度分别为
          序（technique for order preference by similarity to ideal so‐  10.06、10.10、30.00、10.06、2.02、10.00 µg/mL的混合对照
          lution，TOPSIS）法来综合评价黑骨藤质量，以期为黑骨
                                                             品溶液②。
          藤药材的综合质量评价提供客观数据和参考方法。                             2.1.2 供试品溶液的制备 取黑骨藤药材粉末（过三号
          1 材料                                               筛）约 1.0 g，精密称定，置于 50 mL 具塞锥形瓶中，精密
          1.1 主要仪器                                           加入70%甲醇溶液10 mL，称定质量，超声（功率100 W，
              Agilent  1100 型 HPLC 仪（包 括 VWD 检 测 器 、         频率 40 kHz）45 min，冷却，再次称定质量，以 70% 甲醇
          G1311A 四元泵、G1329A 自动进样器、G1316A 柱温箱、                溶液补充减失的质量，摇匀，过 0.45 µm 微孔滤膜，取续
          Agilent Chem Station 工作站和 G1322A 脱气机）购自美           滤液，即得。
          国 Agilent 公司；AG135 型十万分之一电子分析天平购                   2.1.3 色谱条件与系统适用性试验 采用 AQUASIL
          自瑞士Mettler-Toledo公司；KQ-500DE型数控超声波清                C18色谱柱（250 mm×4.6 mm×5 µm），以甲醇（A）-0.2%
          洗器购自昆山市超声仪器有限公司；FN101-2A 型电热                       乙酸溶液（B）为流动相进行梯度洗脱（洗脱程序为0～3
          恒温鼓风干燥箱购自长沙仪器仪表厂；HH-S2型数显恒                         min，5%A→29%A；3～5 min，29%A；5～10 min，29%A→
          温水浴锅购自常州普天仪器制造有限公司。                                34%A；10～28 min，34%A；28～32 min，34%A→39%A；
          1.2 主要药品与试剂                                        32～41  min，39%A→43%A；41～44  min，43%A；44～45
              11批黑骨藤药材采集于贵州各地，由贵州中医药大                        min，43%A→44%A；45～55 min，44%A→52%A）；柱温为
          学药学院孙庆文教授鉴定为真品，样品信息来源见表1；                          25 ℃；检测波长为280 nm；流速为1.0 mL/min；进样量为
          采集后将药材切片，阴干备用。新绿原酸对照品（批号                           10 µL。取“2.1.1”项下混合对照品①和“2.1.2”项下供试
          AZ21102901，纯 度 ≥98％）、隐 绿 原 酸 对 照 品（批 号             品溶液（S1）及 70% 甲醇溶液（空白溶剂对照）按此色谱
          AF21010310，纯度≥98％）、异绿原酸 A 对照品（批号                   条件进样测定，记录色谱图（图1）。结果显示，在上述色
          AZ21090101，纯度≥98％）、异绿原酸 C 对照品（批号                   谱条件下，新绿原酸、隐绿原酸、绿原酸、原花青素 A2、
          AF20121801，纯度≥98％）均购自成都埃法生物科技有                     异绿原酸A、异绿原酸C色谱峰与其相邻峰间的分离度
          限公司；绿原酸对照品（批号 MUST-18030620，纯度＞                    均大于1.5，理论板数均不低于5 000，且空白溶剂对测定
          98%）购自成都曼思特生物科技有限公司；原花青素 A2                        无干扰，表明系统适用性良好。
          对照品（批号 20122507，纯度≥98.58％）购自成都普菲                   2.1.4 线性关系考察 取混合对照品溶液①5、10、15、
          德生物技术有限公司；色谱纯乙腈、甲醇均购自天津科                           20 µL和混合对照品溶液②10、15、20 µL，分别按“2.1.3”
          密欧科技有限公司，其余试剂均为分析纯，水为重蒸水。                          项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以各成分的进样
          2 方法与结果                                            量为横坐标（X）、峰面积为纵坐标（Y）进行线性回归，结
          2.1 黑骨藤药材主要成分的含量测定                                 果见表2。结果显示，6种待测成分在各自进样量范围内
          2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取新绿原酸、隐绿原                        均与峰面积呈良好的线性关系（r均大于0.999 0）。结果
          酸、绿原酸、原花青素 A2、异绿原酸 A、异绿原酸 C 对照                     见表2。


          中国药房  2023年第34卷第7期                                                 China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 7    · 803 ·
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