Page 64 - 《中国药房》2023年4期
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3.6 转染 SIRT3 对 H2S 逆转心肌成纤维细胞中 OPA1 命 ；相反，缺乏SIRT3后OPA1减少，心脏损伤加重，机
[16]
蛋白表达的影响 体寿命显著缩短 。值得注意的是，H2S 对多种细胞具
[17]
如图 6 所示，H2S 能显著逆转 Ang Ⅱ诱导的心肌成 有保护作用 。本实验以 NaHS 作为 H2S 的供体，探讨
[18]
纤维细胞中 OPA1 蛋白表达降低；而下调 SIRT3 表达之 H2S对Ang Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞中SIRT3蛋白表达
后，H2S 的逆转作用被抑制。实验结果表明，H2S 对 Ang 的影响。
Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞中OPA1表达降低的逆转作用
本实验通过CCK-8检测心肌成纤维细胞增殖发现，
依赖于SIRT3。
H2S 可以显著抑制 Ang Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖。
羟脯氨酸是胶原蛋白特有的氨基酸，占氨基酸总量的
13%，因此根据羟脯氨酸含量可以明确胶原水平，而成
纤维细胞是产生胶原的主要细胞之一，测定羟脯氨酸的
[19]
含量可间接反映成纤维细胞增殖情况 。通过检测心
肌成纤维细胞羟脯氨酸含量发现，H2S 可以显著抑制
A. NC siRNA组 B. NC siRNA+AngⅡ组 Ang Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞羟脯氨酸的生成；通过
Western blot 法检测 SIRT3 蛋白表达发现，H2S 可以显著
增强Ang Ⅱ刺激后心肌成纤维细胞中SIRT3蛋白表达。
下调 SIRT3 表达后，H2S 不能抑制 Ang Ⅱ诱导的心肌成
纤维细胞增殖及羟脯氨酸的生成。胶原的生成与心肌
纤维化密切相关，SIRT3缺乏会加重Ang Ⅱ诱导的小鼠
[20]
心肌成纤维细胞间质纤维化 。研究发现，木犀草素通
C. NC siRNA+AngⅡ+NaHS组 D. SIRT3 siRNA组
过调节 SIRT3/ROS/MAPK 信号通路从而抑制胶原表达
以达到减少皮肤老化的效果 ，线粒体融合相关蛋白
[21]
[22]
OPA1 通过促进线粒体吞噬来保护心肌成纤维细胞 。
通过免疫荧光检测心肌成纤维细胞 Col I、Col Ⅲ、OPA1
发现，H2S 可以显著降低 Ang Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞
的胶原生成，增强心肌成纤维细胞的 OPA1 表达。下调
E. SIRT3 siRNA+AngⅡ组 F. SIRT3 siRNA+AngⅡ+NaHS组
图6 转染 SIRT3 对 H2S 增强心肌成纤维细胞中 OPA1 SIRT3 表达后，H2S 降低 Col I 及 Col Ⅲ表达、增强 OPA1
蛋白表达的免疫荧光图（×200） 表达的作用明显减弱。上述结果表明，H2S 可通过上调
4 讨论 SIRT3 表达，进而调节线粒体融合相关蛋白 OPA1 的表
达，改变线粒体的结构和功能，减轻 Ang Ⅱ刺激下氧化
心肌纤维化是细胞外基质重塑的病理过程，可明显
应激，最终抑制心肌成纤维细胞增殖。
增加心肌壁僵硬度，恶化心功能，甚至产生心力衰竭以
[9]
及心源性猝死 。心肌纤维化常见于缺血性心脏疾病， 综上所述，H2S 依赖增加 SIRT3 表达来抑制 Ang Ⅱ
诱导的心肌成纤维细胞增殖。
[11]
[10]
[12]
包括高血压 、心脏瓣膜病 、糖尿病心肌病 、肥厚型
参考文献
[13]
心肌病和特发性扩张型心肌病 等。此外，由于心肌梗
[ 1 ] YANG R，JIA Q，MA S F，et al. Exogenous H2S mitigates
死的局部区域细胞外基质的改变易导致炎症的产生，因
myocardial fibrosis in diabetic rats through suppression of
此心肌梗死发生纤维化的情况最为普遍 。
[9]
the canonical Wnt pathway[J]. Int J Mol Med，2019，44
长期以来，H2S被认为是一种有毒的气体。然而，目
（2）：549-558.
前越来越多的研究发现H2S可参与多种纤维化疾病的发
[ 2 ] XIE L P，FENG H H，LI S，et al. SIRT3 mediates the anti‐
生与发展。有研究证实，内源性和外源性H2S可以延缓
oxidant effect of hydrogen sulfide in endothelial cells[J].
[14]
肺、肝脏和肾脏等纤维化进展 。此外，多种心脏疾病
Antioxid Redox Signal，2016，24（6）：329-343.
也与 H2S 的生成紊乱密切相关，如 H2S 可抑制慢性心力 [ 3 ] KANG S C，SOHN E H，LEE S R. Hydrogen sulfide as a
衰竭机体心肌纤维化及心肌凋亡，其具体机制与减少氧 potential alternative for the treatment of myocardial fibro‐
[15]
化应激有关 。最近的研究表明，SIRT3 可以通过调节 sis[J]. Oxid Med Cell Longev，2020，2020：4105382.
靶蛋白的乙酰化水平，改善线粒体功能，延长机体寿 [ 4 ] CASTELBLANCO M，NASI S，PASCH A，et al. The role
· 442 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 4 中国药房 2023年第34卷第4期
