Page 87 - 《中国药房》2021年12期

绿色

红色

合并

A. GFP组 B. APP组 C. APP+PD组 D.APP+PP2组
2+
图4 各组细胞中Ca 荧光强度的显微图（×200）
2+
Fig 4 Micrographs of Ca fluorescence intensity of cells in each group（×200）
APP+PD、APP+PP2组细胞中上述指标比值均显著降低 活性有关，Fyn 的激活可促进 APP 转基因小鼠脑中 Tau
（P＜0.05）。各组细胞中 Fyn/GluN2B 信号通路相关蛋 蛋白的磷酸化，而抑制 Fyn 活性则可减少其 Tau 蛋白的
白磷酸化水平的检测结果见表3，其荧光显微图见图6。 磷酸化 。这提示，抑制 Fyn 活性可缓解 AD 的病理
[20]
表 3 各组细胞中 Tau 蛋白和 Fyn/GluN2B 信号通路相 进展。
关蛋白磷酸化水平的检测结果（x±±s，n＝3） 本研究先通过分子模拟对接发现，PD与Fyn蛋白具
Tab 3 Results of phosphorylation levels of Tau and 有强烈的亲和力，提示 PD 可靶向抑制 Fyn 蛋白活性。
Fyn/GluN2B signaling pathway related pro- 接着，本研究构建了APP-SH-SY5Y细胞模型来验证PD
teins of cells in each group（x±±s，n＝3）
能否通过抑制Fyn活性从而发挥对AD的改善作用。该
组别 浓度 p-Tau/Tau比值 p-Src/Fyn比值 p-GluN2B/GluN2B比值 细胞模型可以模拟AD患者脑内Aβ对神经系统的损害，
GFP组 0.552±0.087 0.975±0.142 0.803±0.168
APP组 1.831±0.147 ＊＊ 1.599±0.114 ＊＊ 2.039±0.203 ＊＊ 包括降低细胞存活率、促进乳酸脱氢酶释放、诱导细胞
APP+PD组 20 μmol/L 1.533±0.091 # 1.243±0.060 # 1.677±0.085 # 凋亡等 [21－22] 。本研究结果表明，经 PD 干预后，APP-SH-
APP+PP2组 500 nmol/L 1.214±0.231 # 1.093±0.155 # 1.583±0.129 #
SY5Y 细胞的存活率显著升高；同时，笔者还观察到
＊＊
#
注：与GFP组比较， P＜0.01；与APP组比较，P＜0.05
2+
＊＊
#
Note：vs. GFP group， P＜0.01；vs. APP group，P＜0.05 APP-SH-SY5Y细胞中Ca 浓度显著增加，这可进一步引
4 讨论 起Tau蛋白的磷酸化 [5－8] ，而PD和Fyn抑制剂PP2均可降
2+
据 2019 年的一项研究指出，我国约有 1 450 万 AD 低 APP-SH-SY5Y 细胞中 Ca 浓度及 Tau 蛋白的磷酸化
患者，随着人口老龄化的加剧，AD的患病率也将不断上 水平。
[19]
升，预计到2050年，我国AD患者将超过3 000万 。AD 为了阐明PD抑制Tau蛋白磷酸化的潜在机制，笔者
病因复杂，学术界至今仍未完全阐明其发病的具体机 进 一 步 验 证 了 Fyn/GluN2B 信 号 通 路 相 关 蛋 白 在
制。有研究认为，Tau 蛋白的过度磷酸化是 AD 病机之 APP-SH-SY5Y 细 胞 中 的 表 达 情 况 。 结 果 显 示 ，在
一，p-Tau 蛋白的积累会造成神经元的死亡并导致记忆 APP-SH-SY5Y细胞中，Aβ引起了Fyn/GluN2B信号通路
[2]
丧失 。然而，Tau病理学的发展是一个复杂的多因素过 的激活；而PD和PP2干预24 h后，APP-SH-SY5Y细胞中
程，减少 AD 患者脑中 Tau 蛋白磷酸化的机制仍有待进 p-Tau/Tau、p-Src/Fyn（Fyn是Scr家族中的一员，p-Src/Fyn
一步深入研究。有研究表明，Tau 蛋白的磷酸化与 Fyn 比值可反映Fyn蛋白的磷酸化水平）、p-GluN2B/GluN2B

中国药房 2021年第32卷第12期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 12 ·1489 ·