Page 75 - 《中国药房》2021年第6期

ABSTRACT OBJECTIVE：To establish a method for the simultaneous determination of euphol and euphorbol in Euphorbium
resinifera，and to optimize the extraction technology. METHODS：HPLC method was adopted. The determination was performed
on Agilent ZORBAX Eclipse Plus C8 column with mobile phase consisted of acetonitrile-water（90 ∶ 10，V/V）at the flow rate of 1.0
mL/min. The detection wavelength was set at 210 nm，and column temperature was 30 ℃. The sample size was 10 μL. Using the
contents of euphol and euphorbol，yield of the extract as evaluation index，comprehensive score was conducted. The extraction
technology was optimized by L9 （3）orthogonal tests，with ethanol volume fraction，extraction time and solvent dosage as factors.
4
RESULTS：The linear ranges of euphol and euphorbol were 0.030 4-1.216 mg/mL（r＝0.999 6）and 0.01-0.4 mg/mL（r＝0.999 9），
respectively. RSDs of precision，stability（24 h）and producibility tests were all lower than 2％. Average recoveries were 100.46％
（RSD＝1.03％，n＝6）and 99.36％（RSD＝0.91％，n＝6）. The optimized technology was extracting with 40 mL 95％ ethanol for 1 h.
After 3 times of validation tests showed that average content of euphol was 94.43 mg/g （RSD＝0.92％ ，n＝3），and that of
euphorbol was 25.42 mg/g（RSD＝0.98％，n＝3）；average yield of the extract was 51.42％（RSD＝1.95％，n＝3），and average
comprehensive score was 98.87（RSD＝0.92％，n＝3）. CONCLUSIONS：Established method is simple，accurate and reproducible，
which can be used for the quality control of E. resinifera. The optimized extraction technology is simple and stable.
KEYWORDS Euphorbium resinifera；Euphol；Euphorbol；HPLC；Content determination；Extraction technolohy optimization

大戟脂为大戟科植物多脂大戟Euphorbia resinifera 1.2 主要药品与试剂
Berg的树脂状分泌物，又名火秧力、排日非云，别名艾非 本研究所用主要试剂有大戟二烯醇对照品（成都普
[1]
尔比云，主要分布于欧洲、非洲北部及中亚地区 。大戟 思 生 物 科 技 股 份 有 限 公 司 ，批 号 PS010984，纯 度 ≥
脂在我国新疆等地区也有分布，是维吾尔族常用药材， 98.0％）、大戟醇对照品（新疆维吾尔自治区药物研究所，
具有强筋健骨、散寒止痛、燥湿退肿、通利肠阻、除白内 批号 20200622，纯度＞98％，经核磁共振氢谱和核磁共
障等功效，常用于临床治疗白癜风、瘫痪、面瘫、关节骨 振碳谱鉴定）等；乙腈、甲醇均为色谱纯，其余试剂均为
[2]
痛等疾病 。该药材在驱白派甫云片、艾比派尔非云丸、 分析纯，水为超纯水。
买日合米派尔非云软膏等维吾尔族复方制剂中应用广 大戟脂药材（批号201706001）于2018年8月购自新
泛。大戟脂中含有丰富的二萜、三萜类化合物，其中以大 疆济人药业有限公司，经新疆药物研究所何江副研究员
戟二烯醇和大戟醇为代表的四环三萜类化合物是其主要 鉴定为大戟科植物多脂大戟E. resinifera Berg的树脂状
特征性活性成分，具有抗肿瘤、抗炎、降血压等作用 [3－6] 。 分泌物。药材使用前粉碎，过40目筛，备用。
目前，国内外关于大戟脂的研究较少，且现有研究 2 方法与结果
多集中在化学成分分离方面 [7－10] 。虽然，有学者采用乙 2.1 大戟二烯醇和大戟醇的含量测定
醇回流法和甲醇超声法提取大戟脂 [9－10] ，但提取效率不 2.1.1 混合对照品溶液的制备 精密称取大戟二烯醇、
高，且缺乏具体的提取工艺研究，同时亦未见指标性成 大戟醇对照品适量，加甲醇，制成两者质量浓度分别为
分的定量分析。基于此，本研究采用高效液相色谱法 3.04、1.0 mg/mL的混合对照品溶液。
（HPLC）测定了大戟脂中四环三萜类成分大戟二烯醇和 2.1.2 供试品溶液的制备 取大戟脂药材粉末约0.1 g，
大戟醇的含量；同时以乙醇体积分数、提取时间、溶剂用 精密称定，置于圆底烧瓶中，加95％乙醇40 mL，加热回
量为考察因素，大戟二烯醇、大戟醇含量和出膏率为指 流提取 3 次，每次 1 h，滤液用 95％乙醇定容至 250 mL；
标，采用L9 （3）正交试验优化大戟脂的提取工艺，旨在为 精密量取20 mL，蒸干后加甲醇溶解并定容至10 mL，经
4
该药材及其有效成分的深入研究提供参考。 0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，作为供试品溶液。
1 材料 2.1.3 空白对照溶液的制备 取甲醇适量，经 0.45 μm
1.1 主要仪器 微孔滤膜滤过，作为空白对照溶液。
本 研 究 所 用 主 要 仪 器 有 Agilent 1260 型 全 波 长 2.1.4 色谱条件 以 Agilent ZORBAX Eclipse Plus C8
HPLC 仪[包括真空脱气机、四元泵、自动进样器、柱温 （150 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱柱，以乙腈-水（90 ∶ 10，
箱、二极管阵列检测器、OPENLAB CDS 2.1 色谱工作 V/V）为流动相，流速为1.0 mL/min，检测波长为210 nm，
站，安捷伦科技（中国）有限公司]、Sartorius BP211 型十 柱温为30 ℃，进样量为10 μL。
万分之一分析天平[赛多利斯科学仪器（北京）有限公 2.1.5 系统适用性试验 取上述混合对照品溶液、供试
司]、KW-1000DC型恒温水浴锅（金坛市科析仪器有限公 品溶液和空白对照溶液适量，按“2.1.4”项下色谱条件进
司）、DZF-6090 型真空干燥箱（上海精宏实验设备有限 样测定，记录色谱图。结果，理论板数按大戟醇峰计均
公司）、TGL-16M台式高速冷冻离心机（上海卢湘仪离心 不低于7 000，分离度均大于1.5，空白对照溶液对测定无
机仪器有限公司）。 干扰，详见图1。

中国药房 2021年第32卷第6期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 6 ·709 ·